Окраска по методу Михина на бешенство животных

Материалом для исследования на бешенство служит свежий труп мелких животных (собака, кошка, овца, теленок и др.), голова крупных животных или головной мозг.

Из головного мозга делают засев на питательные среды. Часть мозга помещают в стерильный 50%-й глицерин на буферном или физиологическом растворе и сохраняют в холодильнике на случай необходимости повторного исследования. Из оставшейся части мозга берут материал для микроскопического исследования, серологических реакций и биологической пробы.

Вскрытие трупа, изъятие мозга и другие работы необходимо проводить в условиях асептики при строгом соблюдении мер личной профилактики (прочная фиксация головы животного, защита рук двумя парами перчаток - хирургическими и анатомическими, для защиты глаз надевают очки, а на нос и рот марлевую повязку).

Микроскопические исследования. Для микроскопического исследования делают отпечатки, мазки или срезы из разных участков головного мозга.

Для приготовления отпечатка кусочки головного мозга кладут на фильтровальную бумагу, сложенную в 4-6 слоев, срезанной поверхностью кверху. К поверхности среза несколько раз (3-4) подряд прикасаются чистым предметным стеклом, слегка надавливая его, чтобы на стекле получился тонкий отпечаток.

Мазки делают из тех же участков головного мозга. Для этого кусочки мозга растирают в фарфоровой ступке пестиком или в пробирке стеклянной палочкой до образования гомогенной массы, из которой делают грубые мазки на обезжиренном предметном стекле. Можно делать мазки и другим способом. Для этого небольшой кусочек мозга кладут на край предметного стекла, а другим стеклом раздавливают его и размазывают от одного края до другого, в результате чего на поверхности стекла получается тонкий равномерный мазок.

Полученные мазки или отпечатки окрашивают методом Михина.

Окраска по Михину. Мазки или отпечатки фиксируют в смеси спирта и эфира (поровну) в течение 5-10 минут, после чего их просушивают фильтровальной бумагой и окрашивают 30- 40 минут краской Гимза (1-2 капли на 1 мл дистиллированной воды), быстро промывают подкисленным спиртом, а затем водой, просушивают фильтровальной бумагой и исследуют.

В окрашенном препарате при микроскопическом исследовании основной фон должен быть красным с фиолетовым оттенком. Если преобладает синий фон, мазок снова обмывают подкисленным спиртом и водой. Пирамидальные нервные клетки синеватые, ядро интенсивно черное, а тельца Бабеша-Негри - розово-красные с точечными включениями темно-синего цвета.

Date: 2015-08-15; view: 3024; Нарушение авторских прав