Системы растворителей

Сорбенты

При проведении ТСХ используют закрепленные на металлической, стеклянной или пластиковой подложке слои сорбента: силикагели различного зернения, целлюлозу, алюминия окись, кизельгель, сефадекс, полиамид, другие материалы (табл. 9.1).

Таблица 9.1

Сорбенты для ТСХ и их характеристики

Иногда к сорбентам добавляют флуоресцентный индикатор. Для закрепления адсорбционного слоя применяют гипс, крахмал, агар-агар и другие связующие материалы.

В настоящее время используются пластинки «Сорбфил», «Армсорб», «Silufol», «Merck» и другие.

Системы растворителей

При выборе систем растворителей пользуются элюотропными рядами с учетом свойств разделяемых веществ и применяемых сорбентов. Существуют элюотропные ряды для данного сорбента, облегчающие выбор растворителя для ТСХ. В таком ряду растворители расположены в порядке увеличения их элюирующей способности и возрастания их полярности (диэлектрической проницаемости): гексан, гептан, циклогексан, четыреххлористый углерод, бензол, хлороформ, диэтиловый эфир, этилацетат, пиридин, ацетон, этанол, метанол, вода (элюотропный ряд по Шталю). Систему растворителей подбирают, смешивая два растворителя из начала и конца элюотропного ряда.

Для оценки способности хроматографических систем решать поставленную задачу разделения токсических веществ используют расчет «дискриминирующей силы» (DP):

, где

M – число сходных пар,

N – общее число определяемых веществ.

Величина DP существует в пределах от 0 до 1, поэтому, чем больше значение DP, тем более эффективна данная система растворителей для анализа исследуемых веществ

Выгодно применять растворители с высоким поверхностным натяжением и малой вязкостью. Такими растворителями являются ацетонитрил, вода, диэтиловый эфир, ацетон.

Хроматографические системы подбираются таким образом, чтобы результаты исследования были максимально эффективны, воспроизводимы в разных лабораториях.

Комитет по токсикологическому анализу Международной ассоциации судебных токсикологов (TIAFT) рекомендует ряд систем:

Для веществ кислого и нейтрального характера:

Хлороформ:ацетон (8:2)

Этилацетат:метанол:25% раствор аммиака (17:2:1)

Этилацетат

Хлороформ:метанол (9:1)

Для веществ основного характера

Метанол:25% раствор аммиака (100:1,5)

Хлороформ:метанол (9:1)

Ацетон

Метанол

Универсальные системы

Хлороформ:96% этанол (9:1)

Хлороформ:циклогексан:ледяная уксусная кислота (2:2:1)

Подготовленную систему заливают в хроматографическую камеру, герметично закрывают крышкой и оставляют на 0,5-1 час для установления равновесия.