Полезное:
Как сделать разговор полезным и приятным
Как сделать объемную звезду своими руками
Как сделать то, что делать не хочется?
Как сделать погремушку
Как сделать так чтобы женщины сами знакомились с вами
Как сделать идею коммерческой
Как сделать хорошую растяжку ног?
Как сделать наш разум здоровым?
Как сделать, чтобы люди обманывали меньше
Вопрос 4. Как сделать так, чтобы вас уважали и ценили?
Как сделать лучше себе и другим людям
Как сделать свидание интересным?
Категории:
АрхитектураАстрономияБиологияГеографияГеологияИнформатикаИскусствоИсторияКулинарияКультураМаркетингМатематикаМедицинаМенеджментОхрана трудаПравоПроизводствоПсихологияРелигияСоциологияСпортТехникаФизикаФилософияХимияЭкологияЭкономикаЭлектроника
|
Эксклюзионная хроматография
В эксклюзионной хроматографии (гель-хроматографии) разделение основано на различиях в размерах и форме молекул. В качестве твёрдого носителя испол. разл. сетчатые полимеры («гели»). Неподвижной фазой является элюент, наход. в порах зёрен твёрдого носителя, подвижной фазой - этот же элюент, протекающий вдоль слоя частиц полимера. В процессе хроматографирования более мелкие молекулы проникают в поры геля и задерживаются в находящейся в них неподвижной фазе. Более крупные молекулы не проникают в поры и поэтому движутся быстрее. Выход компонентов смеси из колонки происходит в порядке уменьшения их молекулярных масс. Величина коэффициента распределения (D) в эксклюзионной хроматографии может находиться в пределах от 0 до 1. Для крупных молекул D = 0,удерживаемый объём равен свободному объёму колонки -VR = Vm. В случае молекул, размер которых позволяет им свободно диффундировать через пористый материал, D = 1 Для эффективногоразделения в данном виде хроматографии приходится применять длинные колонки или несколько соединённых друг с другом колонок. Твёрдые носители: 1. Мягкие - сефадексы, агранозные гели, полиакриламидные гели- орг. ВМС с небольшим кол-вом поперечных связей. Они гидрофильны. Обладают высокой эффективностью и прим. для разделения смесей низкомол.вещ-в. Процесс хроматорафирования на мягких гелях называется гель-фильтрационной хроматографией. 2. Полужёсткие (сополимеры стирола дивинилбензола, поливинилацетатные гели).Гидрофобны.Их получают полимеризацией. Фактор емкости= 1.2-1.8 Процесс хроматографирования на таких гелях называется гель-проникающей хроматографией. 3. Жёсткие( силикагели и пористые стекла)- имеют фиксированный размер пор, кот. не изменяется ни при каких усл.бывают как гидрофильн., так и гидрофобными. В качестве растворителей в эксклюзионной хроматографии используют воду, диметилформамид, хлороформ, толуол и т.д. Выбор растворителя зависит от типа используемого геля, вида разделяемых веществ, применяемой системы детектирования. Основное назначение гель-хроматографии - разделение смесей высокомолекулярных соединений и определение молекулярно-массового распределения полимеров. Для отделения высокомол. вещ-в от низкомол. (белков от АК и низкомол. пептидов)чаще испол. гель-фильтрационная. 68. Масс-спектрометрия — метод исследования вещ-ва путём определения отношения массы к заряду и кол-ва заряженных частиц, обр.при том или ином процессе воздействия на вещество. Масс-спектрометры -приборы для разделения ионизированных частиц вещества (молекул, атомов) по их массам, основанные на воздействии магнитных и электр.полей на пучки ионов, летящих в вакууме. В масс-спектрометрах регистрация ионов осуществляется электр. методами, в масс-спектрографах — по потемнению чувствительного слоя фотопластинки, помещаемой в прибор. Масс-спектрометры имеют широкий динамический диапазон: от 5-6 порядков для анализа вещества орг.природы до 9-10 порядков для элементного анализа вещ-в. Масс-спектрометр обычно сод. устройство для подготовки исследуемого вещ-ва; ионный источник, где это вещество частично ионизуется и происходит формирование ионного пучка; масс-анализатор, в котором происходит разделение ионов по массам, приёмник ионов, где ионный ток преобразуется в электрический сигнал, который затем усиливается и регистрируется. В регистрирующее устройство, помимо информации о количестве, из анализатора поступает также информация о массе ионов. Масс-спектрометр содержит также системы электрического питания и устройства, создающие и поддерживающие высокий вакуум в ионном источнике и анализаторе. Масс-спектр - это зависимость интенсивности ионного тока от отношения массы к заряду. Каждый из пиков ионного тока соответствует однозарядным ионам изотопов. Отношение массы иона к ширине m пика (в единицах массы) - разрешающая способность масс-спектрометра. Различают статические ( используются электрические и магнитные поля )и динамические ( для разделения ионов с разными m/е используют разные времена пролёта ионами опр.расстояния) масс-спектрометры. Хромато-масс-спектрометрия. Метод анализа смесей и определения следовых количеств веществ в объеме жидкости. Метод основан на комбинации двух самостоятельных методов – хроматографии и масс-спектрометрии. С помощью первого осуществляют разделение смеси на компоненты, с помощью второго -идентификацию и определение строения вещества, количественный анализ. Хромато-масс-спектометр включает три основные части: хроматограф (обычно газовый или жидкостный), масс-спектометр и интерфейс – специфический узел, обеспечивающий соединение и совместную работу хроматографических и масс-спектрометрических приборов. Газовый поток из хроматографической колонки через первую форсунку со сверхзвуковой скоростью попадает в область вакуума, где молекулы распростр. со скоростями, обратно пропорциональными их массе. В результате более легкие и быстрые молекулы газа-носителя откачиваются насосом, а более медленные мол. орг. вещ-ва попадают в отверстие второй форсунки, а затем в ионный источник масс-спектрометра. Некоторые приборы снабжены двухстадийным мол. сепаратором, снабженным еще одним подобным блоком форсунок. В объеме между ними созд. высокий вакуум. Чем легче мол. газа-носителя, тем эффективнее они удал.из газ. потока и тем выше обогащение орг. вещ-вом. Наиб. удобный газ-носитель - гелий. Date: 2015-08-15; view: 1119; Нарушение авторских прав |