Сердечных средств на голубях

Отбор голубей и их содержание

Для опытов отбирают беспородных здоровых голубей массой

280-400 г, находившихся в условиях лабораторного содержания в

течение 5-7 сут. За 18-24 ч до начала опыта птиц лишают пищи, но

не воды.

Техника испытания и принцип расчета

Опыт проводят под легким тиопентал - натриевым наркозом (35

мг/кг внутримышечно в лапку). Наркотизированных голубей

привязывают к станку для мелких животных в положении на спине

таким образом, чтобы голова голубя находилась ниже туловища (во

избежание попадания в дыхательные пути слизи и рвотных масс). С

внутренней стороны крыла удаляют перья, находят и отсепаровывают

вену крыла. В вену вводят металлическую канюлю (затупленная

инъекционная игла N 19-22), соединенную тонкой каучуковой трубкой

с градуированной бюреткой вместимостью 5 мл, имеющей деления 0,05

мл. Бюретку предварительно наполняют раствором испытуемого

препарата, приготовленным на 0,9% растворе натрия хлорида.

Испытуемый раствор вводят отдельными дозами по 0,3 мл через каждые

5 мин до наступления остановки сердца голубя. Остановку сердца

определяют по характерному изменению положения головы и шеи голубя

и контролируют последующим вскрытием грудной клетки. Длительность

опыта должна составлять не менее 65 и не более 95 мин.

Голуби, смерть которых наступает в другие сроки, в расчет не

принимаются. В течение опыта голубю вводят не менее 13 и не более

19 доз (0,3 мл) испытуемого раствора.

Испытание обычно проводят на 6 голубях.

Результаты опытов могут быть использованы для расчета

биологической активности лишь в том случае, если в одной и той же

серии опытов расхождение между максимальными и минимальными

числами введенных доз не превышает 4, а общее число доз не выходит

за установленные пределы (13-19). В противном случае увеличивают

количество подопытных голубей или повторяют опыт с новой

концентрацией испытуемого раствора. Оценку активности испытуемых

препаратов можно проводить 2 способами: 1) по сравнению со

стандартным образцом; 2) в голубиных единицах действия.

Оценка активности испытуемого препарата

по сравнению со стандартным образцом

В опыт берут не менее 12 голубей - по 6 голубей для

стандартного образца и испытуемого препарата.

Данные, полученные при биологическом испытании стандартного

образца, могут быть использованы для расчета и последующих опытов

в течение 30 сут без повторного испытания.

Из полученных в опыте со стандартным или испытуемым препаратом

данных вычисляют величину смертельной дозы препарата для каждого

голубя в миллилитрах на 1 кг массы.

Результаты опытов подвергают статистической обработке

аналогично результатам опытов на кошках.

Пример расчета при обработке данных - по общей статье

"Статистическая обработка результатов химического эксперимента и

биологических испытаний" (ГФ XI, вып. 1, с. 199).

----T------------------------------T-----------------------------

¦ ¦ Стандартный образец ¦ Испытуемый препарат ¦

¦ +--------T--------T------------+-------T---------T-----------+

¦ N ¦ число ¦ число ¦ квадрат ¦ число ¦ число ¦ квадрат ¦

¦п/п¦ доз ¦ мл/кг ¦ отклонений ¦ доз ¦ мл/кг ¦отклонений ¦

¦ ¦ ¦ (Yc) ¦ _ 2 ¦ ¦ (Yи) ¦ _ 2 ¦

¦ ¦ ¦ ¦ (Yc - Yс) ¦ ¦ ¦ (Yи - Yи) ¦

+---+--------+--------+------------+-------+---------+-----------+

¦1 ¦ 16 ¦ 14,9 ¦ 0,81 ¦ 15 ¦ 13,4 ¦ 1,44 ¦

¦2 ¦ 17 ¦ 17,4 ¦ 2,56 ¦ 15 ¦ 15,0 ¦ 0,16 ¦

¦3 ¦ 16 ¦ 15,4 ¦ 0,00 ¦ 18 ¦ 16,1 ¦ 2,25 ¦

¦4 ¦ 18 ¦ 14,4 ¦ 1,96 ¦ 17 ¦ 15,3 ¦ 0,49 ¦

¦5 ¦ 15 ¦ 14,7 ¦ 1,21 ¦ 16 ¦ 14,3 ¦ 0,09 ¦

¦6 ¦ 14 ¦ 18,0 ¦ 4,84 ¦ 18 ¦ 13,5 ¦ 1,21 ¦

L---+--------+--------+------------+-------+---------+------------

Активность испытуемого препарата по отношению к стандартному

образцу:

_ _ 2 _ 2

Y = 15,8; (Yс - Yс) = 11,38; Yи = 14,6; (Yи - Yи) = 5,64;

-----------

_ / 11,38 ------

SYс = +/- /----------- = +/- / 0,379 = +/- 0,61 мл/кг;

\/ 6 x (6 - 1) \/

----------

_ / 5,64 ------

SYи = +/- /----------- = +/- / 0,188 = +/- 0,43 мл/кг;

\/ 6 x (6 - 1) \/

SYс х 100 0,61 х 100

--------- = +/- ------------ = +/- 3,8%;

_

Yс 15,8

_

SYи х 100 0,43 х 100

--------- = +/- ------------ = - 2,9%.

Yи 14,6

15,8 х 100

------------ = 108%.

14,6

Различие средних: 15,8 - 14,6 = 1,2 мл/кг.

---------------------

/ 11,38 + 5,64 12

s = +/- /-------------- х ----- = +/- 0,75 мл/кг.

d \/ 12 - 2 36

Величина t при 12 - 2 = 10 равна 2,23 [см. таблицу значений

t(Р, f); ГФ XI, вып. 1, с. 249].

Отсюда s х t = 0,75 х 2,23 = 1,67 мл/кг.

d

Как видно из полученных данных, разность средних (1,2 мл/кг)

меньше величины s х t(1,67 мл/кг), а активность испытуемого

d

препарата отличается от активности стандартного лишь на 8%.

Следовательно, испытуемый препарат по своей активности

удовлетворяет требованиям.

Определение активности испытуемого препарата в ГЕД

Для выражения активности испытуемого препарата в голубиных

единицах действия (ГЕД) расчет проводят для каждого голубя по

формуле:

К х m

А = -----

а

где К - разведение испытуемого препарата; m - масса голубя в

килограммах; а - доза разведенного препарата в миллилитрах.

Из данных, полученных в опытах, выводят среднее число ГЕД и

вычисляют в процентах отклонение отдельных опытов от среднего

числа.

Пример расчета. Определение числа ГЕД для строфантина К.

------T---------T-----------T--------T-------T-----T-------------

¦ N ¦ Масса ¦ Разведение¦ Число ¦ Доза, ¦Число¦ Отклонение ¦

¦опыта¦ голубя,¦ гликозида ¦введений¦ мл ¦ ГЕД ¦ от средней, ¦

¦ ¦ кг ¦ ¦ (доз) ¦ ¦ ¦ % ¦

+-----+---------+-----------+--------+-------+-----+-------------+

¦1 ¦ 0,335 ¦ 1:60000 ¦ 15 ¦ 4,5 ¦4467 ¦ 8,9 ¦

¦2 ¦ 0,301 ¦ 1:60000 ¦ 15 ¦ 4,5 ¦4013 ¦ 2,1 ¦

¦3 ¦ 0,335 ¦ 1:60000 ¦ 18 ¦ 5,4 ¦3722 ¦ 9,2 ¦

¦4 ¦ 0,325 ¦ 1:60000 ¦ 17 ¦ 5,1 ¦3823 ¦ 6,8 ¦

¦5 ¦ 0,332 ¦ 1:60000 ¦ 16 ¦ 4,8 ¦4150 ¦ 1,1 ¦

¦6 ¦ 0,400 ¦ 1:60000 ¦ 18 ¦ 5,4 ¦4445 ¦ 8,3 ¦

L-----+---------+-----------+--------+-------+-----+--------------

Среднее число ГЕД = 4103.

Сведения о требуемом содержании ЛЕД, КЕД и ГЕД в отдельных

препаратах и растительном сырье, а также методики их определения

приведены в соответствующих фармакопейных статьях.

Date: 2015-07-01; view: 406; Нарушение авторских прав