Сердечных средств на кошках

Отбор кошек и их содержание

Для опыта отбирают кошек обоего пола, здоровых, не беременных

и не лактирующих, массой 2-3,5 кг, находившихся в условиях

лабораторного содержания в течение 2-3 сут. За 16- 20 ч до начала

опыта животных лишают пищи, но не воды.

Техника испытания и принцип расчета

Опыт проводят под легким эфирным или уретановым наркозом

(1,5-1,7 г/кг внутримышечно в затылочную часть головы). В

отпрепарированную бедренную вену животного вводят канюлю,

соединенную тонкой каучуковой трубкой с градуированной бюреткой

вместимостью 50-100 мл, откуда поступает раствор испытуемого

препарата, приготовленный на 0,9% растворе натрия хлорида. На пути

между бюреткой и канюлей включают стеклянный змеевик, помещенный в

баню с подогреваемой водой (39 град. С) для поддержания постоянной

температуры вводимого раствора. В резиновую трубку, соединяющую

стеклянный змеевик с канюлей, вставляют с помощью стеклянного

тройника термометр, показывающий температуру жидкости, поступающей

к животному. Жидкость из бюретки вытекает под постоянным

давлением, что достигается введением в бюретку стеклянного

капилляра внешним диаметром не более 1 мм, укрепленного при помощи

каучуковой пробки в верхнем отверстии бюретки (по принципу сосуда

Мариотта). Длина капилляра должна быть такова, чтобы нижний его

конец доходил до уровня нижнего деления бюретки. Скорость

вытекания жидкости из бюретки регулируют при помощи зажима,

наложенного на каучуковую трубку, или стеклянного крана таким

образом, чтобы в вену животного в 1 мин поступал 1 мл испытуемого

раствора. Введение раствора проводят до наступления остановки

сердца. Длительность опыта должна составлять не менее 30 и не

более 55 мин. Момент остановки сердца определяют по исчезновению

сердечного толчка и контролируют последующим вскрытием грудной

клетки. При наличии патологических изменений в органах опыт в

расчет не принимают.

Оценку активности испытуемых препаратов можно проводить 2

способами: 1) по сравнению со стандартным образцом; 2) в кошачьих

единицах действия (КЕД).

Оценка активности испытуемого препарата

по сравнению со стандартным образцом

В опыт берут не менее 12 кошек - по 6 кошек для испытуемого

препарата и стандартного образца. Данные, полученные при

биологическом испытании стандартного образца, могут быть

использованы для расчетов в последующих опытах в течение 15 сут

без повторного испытания.

Из полученных в опыте данных вычисляют величину смертельной

дозы препарата для каждого животного в миллилитрах на 1 кг массы.

_

Находят величину средней смертельной дозы для стандартного (Yc) и

_

испытуемого (Yи) препаратов, а также стандартную ошибку по

формулам I.1.2 и I.1.9 статьи "Статистическая обработка

результатов химического эксперимента и биологических испытаний"

(ГФ XI, вып. 1, с. 199).

Результаты опытов удовлетворяют требованиям метода, если

отношение стандартной ошибки к среднему значению не превышает

5,7%. В противном случае необходимо увеличить число опытов.

Испытуемый препарат считают удовлетворяющим требованиям, если

отношение средних смертельных доз испытуемого препарата и

стандартного образца составляет 90-110%, а их разность не

превышает величины s х t(P, f).

d

Стандартную ошибку разности s вычисляют по формуле I.4.4 (ГФ

d

XI, вып. 1, с 212). Критическое значение t(P, f) находят по

таблице значений t(P, f) из той же статьи "Статистическая

обработка результатов химического эксперимента и биологических

испытаний" (с. 249) при уровне значимости 5%, что соответствует

уровню достоверности 95%. Значение величины t(P, f) зависит от

так называемого числа степеней свободы (f), которое равно общему

_ _

числу опытов, использованных для вычисления Yс и Yи, уменьшенному

на 2.

Пример расчета:

----T-------------------------------T----------------------------

¦ ¦ Стандартный образец ¦ Испытуемый препарат ¦

¦ +------T----------T-------------+------T----------T----------+

¦ N ¦ мл/кг¦отклонения¦ квадрат ¦ мл/кг¦отклонения¦квадрат ¦

¦п/п¦ (Yс) ¦от средней¦ отклонений ¦ (Yи) ¦от средней¦отклонений¦

¦ ¦ ¦ _ ¦ _ 2 ¦ ¦ _ ¦ _ 2¦

¦ ¦ ¦(Yс - Yс) ¦ (Yс - Yс) ¦ ¦(Yи - Yи) ¦(Yи - Yи) ¦

+---+------+----------+-------------+------+----------+----------+

¦1 ¦ 15,0 ¦ 2,0 ¦ 4,0 ¦ 16,0 ¦ 2,5 ¦ 6,25 ¦

¦2 ¦ 16,3 ¦ 0,7 ¦ 0,49 ¦ 17,1 ¦ 1,4 ¦ 1,96 ¦

¦3 ¦ 18,2 ¦ 1,2 ¦ 1,44 ¦ 20,0 ¦ 1,5 ¦ 2,25 ¦

¦4 ¦ 17,8 ¦ 0,8 ¦ 0,64 ¦ 19,5 ¦ 1,0 ¦ 1,0 ¦

¦5 ¦ 17,0 ¦ 0 ¦ 0 ¦ 20,0 ¦ 1,5 ¦ 2,25 ¦

¦6 ¦ 17,7 ¦ 0,7 ¦ 0,49 ¦ 18,4 ¦ 0,1 ¦ 0,01 ¦

L---+------+----------+-------------+------+----------+-----------

_ _ 2

Yс = 17,0 мл/кг; (Yс - Yс) = 7,06;

_ _ _ 2

Yи = 18,5 мл/кг; (Yи - Yи) = 13,72;

---------

_ / 7,06 ------

SYс = +/- /----------- = +/- \/ 0,235 = +/- 0,48 мл/кг;

\/ 6 х (6 - 1)

---------

_ / 13,72 ------

SYи = +/- /----------- = +/- \/ 0,457 = +/- 0,68 мл/кг.

\/ 6 х (6 - 1)

Далее находят отношение стандартной ошибки к среднему значению

для стандартного и испытуемого препаратов соответственно.

_

SYс х 100 0,48 х 100

--------- = +/- ----------- = +/- 2,8%;

_

Yс 17,0

_

SYи х 100 0,68 х 100

--------- = +/- ----------- = +/- 3,68%.

_

Yи 18,5

Из расчетных данных видно, что эти величины меньше 5,7%.

Следовательно, число проведенных опытов является достаточным и

можно вести расчет дальше.

Активность испытуемого препарата по отношению к стандартному

образцу:

17,0 х 100

---------- = 91%.

18,5

Различие средних: 18,5 - 17,0 = 1,5 мл/кг.

Стандартную ошибку разности находят по формуле I.4.4 (ГФ XI,

вып. 1, с. 212).

-------------

_ _ / 7,06 + 13,72

s = SYс - Yи = +/- / ------------- = +/- 0,8 мл/кг.

d \/ 12 - 2

Величина t при 12 - 2 = 10 равна 2,23 [см. таблицу значений

t(Р, f); ГФ XI, вып. 1, с. 249].

Отсюда s х t = +/- 2,23 х 0,8 = +/- 1,78 мл/кг.

d

Поскольку разность средних (1,5 мл/кг) меньше величины

s х t(1,78 мл/кг), а активность испытуемого препарата отличается

d

от активности стандартного образца на 9%, испытуемый препарат

следует считать удовлетворяющим по своей активности предъявляемым

требованиям.

Определение активности испытуемого препарата в КЕД

Для выражения активности испытуемого препарата в кошачьих

единицах действия (КЕД) расчет проводят для каждого животного по

формуле:

К х m

А = -------

а

где К - разведение испытуемого препарата; m - масса животного в

килограммах; а - доза разведенного препарата в миллилитрах.

Из данных, полученных в опытах, выводят среднее число КЕД и

вычисляют (в КЕД и процентах) отклонения результатов отдельных

опытов от среднего числа КЕД.

Результаты опытов удовлетворяют требованиям метода, если

найденное среднее отклонение от среднего числа КЕД будет меньше

максимально допустимого отклонения для данного числа опытов,

указанного в табл. 10.

Таблица 10

Максимально допустимое отклонение

отдельных опытов от их средней

-------T----------------------T------------T---------------------

¦Число ¦ Отклонение, % ¦ Число ¦ Отклонение, % ¦

¦опытов¦ ¦ опытов ¦ ¦

+------+----------------------+------------+---------------------+

¦ 3 ¦ 9,4 ¦ 7 ¦ 16,3 ¦

¦ 4 ¦ 11,5 ¦ 8 ¦ 17,6 ¦

¦ 5 ¦ 13,3 ¦ 9 ¦ 18,9 ¦

¦ 6 ¦ 14,9 ¦ 10 ¦ 20,0 ¦

L------+----------------------+------------+----------------------

Из табл. 10 следует, что испытания можно проводить на 3 кошках

(минимальное число опытов), но только в том случае, если

полученное в опытах отклонение будет меньше 9,4 %. В противном

случае число опытов надо увеличить.

Пример расчета. Определение числа КЕД для раствора строфантина

К 0,05% для инъекций.

----T----------T------------T------T---------T---------------------

¦ N ¦ Масса ¦ Разведение ¦ Доза,¦Число КЕД¦ Отклонение ¦

¦п/п¦животного,¦раствора для¦ мл ¦ ¦ от средней ¦

¦ ¦ кг ¦ инъекций ¦ ¦ +----------T----------+

¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ КЕД ¦ % ¦

+---+----------+------------+------+---------+----------+----------+

¦1 ¦ 2,63 ¦ 1:50 ¦ 37 ¦ 3,55 ¦ + 0,22 ¦ + 6,6 ¦

¦2 ¦ 2,56 ¦ 1:50 ¦ 39 ¦ 3,28 ¦ - 0,05 ¦ - 1,5 ¦

¦3 ¦ 2,22 ¦ 1:50 ¦ 35 ¦ 3,17 ¦ - 0,16 ¦ - 4,8 ¦

L---+----------+------------+------+---------+----------+-----------

Среднее число КЕД = 3,33.

Date: 2015-07-01; view: 421; Нарушение авторских прав