Микроскопическое исследование материала. Мазки из крови, биоптатов фиксируют метанолом, окрашивают по Романовскому-Гимза, при наличии антисывороток используют метод флуорес­цирующих антител

Мазки из крови, биоптатов фиксируют метанолом, окрашивают по Романовскому-Гимза, при наличии антисывороток используют метод флуорес­цирующих антител.

E.phagocytophila обнаруживают в гранулоцитах, реже — в моноцитах. В период риккетсемии поражены до 6-50% гранулоцитов. Для отрицательного ответа необходимо исследовать не менее 100 клеток. Морфогенез возбудителя складывается из превращения элементарного тельца овальной или кокковидной формы красного цвета диаметром около 0,4-0,5 мкм в тельце размером 1-2 мкм, с последующей трансформацией в морулу (образование похоже на тутовую ягоду) диаметром 2-4 мкм. Цикл развития завершается распадом морулы на элементарные тельца.

Есть данные о применении флуоресцирующих антител для обнаружения возбудителей в головном мозге.

При исследовании на инфекцию Е. canis возбудитель можно обнаружить в окрашенных мазках крови на 2-3-й сутки после появления температуры, лучше в мазках из лейкоцитарного слоя. Возможно обнаружение возбуди­теля в биоптатном материале из печени, селезенки, легких. Морфология возбудителя такая же, как и у E.phagocytophila, локализуется в моноцитах или лимфоцитах.

E.equi наиболее успешно удается обнаружить в мазках из свежей крови, поражено бывает от 0,5 до 73% гранулоцитов (в среднем 35%). Элементар­ные тельца имеют диаметр около 0,2 мкм, цвет от голубого до серо-голубо­го, морула достигает диаметр 5 мкм. С успехом апробирована для выявления эрлихий полимеразная цепная реакция.

Выделение и идентификация культуры возбудителя

Для изоляции возбудителей используют перевиваемые или первичные куль­туры клеток костного мозга и нейтрофилов крови. Идентификацию возбу­дителя проводят микроскопически, в РИФ, ПЦР.

Биопроба. Инфекция, вызываемая E.phagocytophila воспроизводится введением дефибринированной крови, взятой в период лихорадки, крупному рогатому скоту, овцам. Инкубационный период составляет 4-8 дней. Эрлихиоз собак воспроизводится заражением животных кровью, возможно культи­вирование возбудителя в культуре моноцитов собак. При заражении кро­вью молодых лошадей клинические признаки инфекции E.equi воспроизво­дятся не всегда.