Полезное:
Как сделать разговор полезным и приятным
Как сделать объемную звезду своими руками
Как сделать то, что делать не хочется?
Как сделать погремушку
Как сделать так чтобы женщины сами знакомились с вами
Как сделать идею коммерческой
Как сделать хорошую растяжку ног?
Как сделать наш разум здоровым?
Как сделать, чтобы люди обманывали меньше
Вопрос 4. Как сделать так, чтобы вас уважали и ценили?
Как сделать лучше себе и другим людям
Как сделать свидание интересным?
Категории:
АрхитектураАстрономияБиологияГеографияГеологияИнформатикаИскусствоИсторияКулинарияКультураМаркетингМатематикаМедицинаМенеджментОхрана трудаПравоПроизводствоПсихологияРелигияСоциологияСпортТехникаФизикаФилософияХимияЭкологияЭкономикаЭлектроника
|
Серологическая диагностикаАнтитела выявляются в серологических реакциях через 2-3 недели после заражения. Для этого используют РСК, ELIS А, РА. В соответствии с «Методическими указаниями по серологической диагностике лихорадки Ку животных» (1996) в РФ используют реакцию длительного связывания комплемента, ИФА, РСК. Реакция связывания комплемента. В РСК применяют антиген из I фазы C.burneti. Исследуемые сыворотки крови разводят 1:10, инактивируют в водяной бане при 56-58° С в течение 30 мин. Контрольную позитивную сыворотку не инактивируют. Средой разведения служит 0,85%-ный раствор натрия хлорида (рН 7,0-7,4). Берут 2%-ную взвесь эритроцитов барана, гемолизин в удвоенном титре. Комплемент разводят 1:10 и титруют в разведениях 1:20, 1:25, 1:30, 1:35, 1:40, 1:50, 1:60, в присутствии антигена в рабочем разведении при общем объеме компонентов 0,5 мл. В опыт берут комплемент в удвоенном титре. Испытуемые и контрольную негативную сыворотки исследуют в разведении 1:10 (с антигеном и без него), контрольную позитивную — в разведениях с 1:10 до предельного титра. Остальные контроли проводят как обычно при РСК. Первая фаза РДСК длится 18-20 часов при 4-6° С и 20 минут при комнатной температуре, вторая фаза — 30 минут в водяной бане при 37-38° С. Результаты реакции учитывают через 18-20 часов выдерживания пробирок при 4-6° С при условии задержки гемолиза в контроле с позитивной сывороткой до ее предельного титра и при полном гемолизе с негативной сывороткой. Результат реакции оценивают как положительный при задержке гемолиза с испытуемой сывороткой (1:10) на 3-4 креста, сомнительный — задержка гемолиза на 1-2 креста. При сомнительных результатах сыворотку крови от таких животных исследуют повторно через 15-21 день. При повторном получении сомнительного или отрицательного результата животное признают здоровым. Непрямой вариант ИФА. Используют при сенсибилизации планшет антиген для РДСК из I фазы возбудителя лихорадки Ку. ИФА по чувствительности превосходит РДСК. Реакция микроагглютинации. При помощи данной реакции выявляют антитела в молоке (индивидуальные пробы, сборное молоко), сыворотке крови. Молоко до исследования хра нят при 4-8°С или консервируют 0,1% формалинa. В качестве антигена применяют очищенную суспензию C.burneti в I фазе, окрашенную гематоксилином. Реакцию проводят в капиллярах. Капилляр заполняют молоком, затем антигеном (см. «Реакция микропреципитации»), капилляры закрепляют в пластилине, инкубируют при 37° С в течение 5 часов или 24 часа при комнатной температуре. В молоке, содержащем агглютинины к возбудителю, слой сливок приобретает сине-черный цвет — положительный результат.
|