Полезное:
Как сделать разговор полезным и приятным
Как сделать объемную звезду своими руками
Как сделать то, что делать не хочется?
Как сделать погремушку
Как сделать так чтобы женщины сами знакомились с вами
Как сделать идею коммерческой
Как сделать хорошую растяжку ног?
Как сделать наш разум здоровым?
Как сделать, чтобы люди обманывали меньше
Вопрос 4. Как сделать так, чтобы вас уважали и ценили?
Как сделать лучше себе и другим людям
Как сделать свидание интересным?
Категории:
АрхитектураАстрономияБиологияГеографияГеологияИнформатикаИскусствоИсторияКулинарияКультураМаркетингМатематикаМедицинаМенеджментОхрана трудаПравоПроизводствоПсихологияРелигияСоциологияСпортТехникаФизикаФилософияХимияЭкологияЭкономикаЭлектроника
Схема постановки опыта
|
|
| № п/п | Ингредиенты | Пробирки | |||||
| Контроли: антигена | |||||||
| 4 (ликвора) | антикомплементарность | Гемоток сичность | |||||
| 1. | Спинномозговая жидкость (неразведенная), мл | 0,10 | 0,25 | 0,5 | 0,5 | ||
| 2. | Антиген в рабочей дозе (ультраозвученный из трепонем), мл | 0,50 | 0,50 | 0,50 | - | 0,5 | 0,5 |
| 3. | Комплемент разведенный по титру (без % надбавок) | 0,50 | 0,50 | 0,50 | 0,5 | 0,5 | - |
| 4. | Физраствор, мл | 0,40 | 0,25 | - | 0,5 | 0,5 | 1,0 |
| Инкубация в термостате 1 час при +37о С | |||||||
| 5. | Гемолитическая смесь, мл | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 |
| Инкубация в термостате 1 час при + 37о С | |||||||
| Результаты у больного сифилисом | - Г | - Г | - Г | + Г | + Г | + Г |
Примечание: Спинномозговую жидкость не инактивируют, но если она содержит кровь, то её прогревают при + 56о С 30 минут. Мутную жидкость центрифугируют.
4. Реакция иммобилизации бледных трепонем (PИБT):
Принцип: угнетение движения бледных трепонем антителами сыворотки крови в присутствии комплемента.
Ингредиенты реакции:
- трепонемы - получают из яичка кролика, зараженного экспериментальным сифилисом. Яичко измельчают в специальной среде, не угнетающей подвижность спирохет;
- комплемент (сыворотка крови морской свинки);
- сыворотка обследуемого больного;
- сыворотка заведомо здорового человека.
Реакцию выполняют в меланжерах для лейкоцитов по Н. М. Овчинникову, который усовершенствовал методику Нельсона-Мауэра.
Схема постановки опыта:
| № п/п | Ингредиенты | № меланжеров | ||||||||
| контр. компле мента | контр. антигена | |||||||||
| 1. | Сыворотка обследуемого | До метки 1 | До метки 1 | - | - | - | ||||
| 2. | Взвесь тканевых спирохет в смеси с активным комплементом | До метки | - | До метки | - | - | ||||
| 3. | Смесь тканевых спирохет с инактивированным комплементом | До метки | - | До Метки | - | |||||
| 4. | Взвесь тканевых спирохет без комплемента | - | - | - | - | До метки | ||||
Концы меланжера закрыть резиновой трубочкой (прекратить доступ воздуха). Поместить в термостат при + 35° С на 18 - 20 часов, после чего учитывать результаты:
- на оба края предметного стекла наносят по капле хорошо перемешанных смесей сыворотки с активированным и инактивированным комплементом;
- капли покрывают покровным стеклом 20 х 20 мм2.
- с помощью микроскопа (темнопольного) определяют количество подвижных и неподвижных трепонем, сначала в капле с активным, потом с инактивированным комплементом;
- процент специфически иммобилизированных спирохет в и опыте определяют по формуле: Х = Tк-То x 1000, где
Тк - число подвижных трепонем в контроле (с инактивированным комплементом);
То - число подвижных трепонем в опыте (с активным комплементом).
Результат считают положительным, если процент иммобилизации выше 50, слабоположительным - от 31 до 50, сомнительным - от 21 до 30, отрицательным - ниже 30.
Date: 2015-08-07; view: 418; Нарушение авторских прав