Методы окислительно- восстановительного титрования

2.1. Йодометрический метод количественного определения соединений с SH-группой (цистеин, ацетилцистеин, пеницилламин). Метод основан на восстановительных свойствах ЛС (за счет меркапто-группы).

• ФС: цистеин в субстанции.

Условия: 1 M HCl, t^o=3^oC, 20 минут, темное место.

Избыток йода титруют раствором натрия тиосульфата (индикатор – крахмал). Параллельно проводят контрольный опыт.

f экв. (цистеина)=1, т.к. каждая молекула теряет один протон.

2.2. Йодометрический метод количественного определения на
метионина (ФС).

Метод основан на окислении метионина йодом в среде фосфатного буферного раствора. Используют вариант обратного титрования, избыток йода титруют раствором натрия тиосульфата (индикатор – крахмал), параллельно проводят контрольный опыт.

f экв.(метионина)=1/2, т.к. сера (II) окисляется до серы (IV).

3. Метод Кьельдаля (в настоящее время не является фармакопейным для аминокислот за исключением пирацетама – видоизмененный метод Кьельдаля).

3.1.Классический метод Кьельдаля. Определение проводят титриметрическим методом после минерализации ЛС концентрированной серной кислотой при нагревании, в присутствии катализаторов (калия сульфата и меди сульфата пентагидрата в соотношении 10:1 или других катализаторов, указанных в частной статье) и разложения образующегося аммония сульфата раствором натрия гидроксида. Аммиак улавливается раствором борной кислоты. Различают следующие методы определения азота в классическом методе Кьельдаля: А. метод Кьельдаля, Б – микрометод Кьельдаля, В – метод обратного титрования.

А. Метод Кьельдаля.

_>t^o

ЛС + конц. H₂SO₄ + катализаторы → (NH₄)₂SO₄ + CO₂ + H₂O

(NH₄)₂SO₄ + 2NaOH → NH₃ + Na₂SO₄ + 2H₂O

NH₃ + H₃BO₃ → NH₃ ^. H₃BO₃

Отгон титруют раствором хлороводородной или серной кислоты (индикатор смешанный: метиловый красный и метиленовый синий).

NH₃ ^. H₃BO₃ + HCl → NH₄Cl + H₃BO₃ , или

2NH₃ ^. H₃BO₃ + H₂SO₄ → (NH₄)₂ SO₄ + 2H₃BO₃

Параллельно проводят контрольный опыт.

Б. Микрометод Кьельдаля.

Все операции проводят аналогично классическому методу Кьельдаля, но используют аппарат для автоматического определения азота. В качестве катализаторов добавляют смесь, указанную в методе А или другой вариант: смесь калия сульфата, меди сульфата пентагидрата и натрия селената десятиводного в соотношении 20:5:8.

В. Метод обратного титрования (полумикрометод Кьельдаля).

Операции проводят как в методе А, выделившийся аммиак улавливают избытком титрованного раствора хлороводородной кислоты, остаток кислоты титруют раствором натрия гидроксида в присутствии смешанного индикатора. Параллельно проводят контрольный опыт.

NH₃ + HCl → NH₄Cl

Избыток HCl + NaOH → NaCl + H₂O

3.2. Видоизмененный метод Кьельдаля. Применяется для количественного определения пирацетама (субстанция, таблетки, раствор для инъекций) (ФС). Основан на свойстве пирацетама гидролизоваться в щелочной среде с образованием эквивалентного количества аммиака (см. реакцию подлинности). Аммиак отгоняют в установке Кьельдаля и количественно улавливают раствором борной кислоты. Отгон титруют раствором хлороводородной кислоты по смешанному индикатору (метиловый красный и метиленовый синий).

NH₃ + H₃BO₃ → NH₃ ^. H₃BO₃

NH₃ ^. H₃BO₃ + HCl → NH₄Cl + H₃BO₃

4. Инструментальные методы. Спектрофотометрия.

Применяют для определения ЛС в лекарственных препаратах промышленного производства (таблетки, гранулы, растворы для инъекций).