Выделение и идентификация патогенных видов рода Nocardia

Культивирование. Посев материала проводят на кровяной агар, сердечно-мозговой кро­вяной агар, декстрозный агар Сабуро. Культивирование проводят при 25- 27° С в течение 7 суток в аэробных условиях.

N. asteroides обычно формирует колонии на кровяном и сердечно-мозго­вом агарах на 4-5-е сутки культивирования, на агаре Сабуро — несколь­ко позднее. Колонии диаметром 1-2 мм прочно соединены с питательным субстратом. Цвет колоний от белого до желтовато-розового, розового или темно-оранжевого, с редким воздушным мицелием.На колонии N. asteroides весьма похожи колонии непатогенных видов рода Streptomyces. Образую­щиеся воздушные гифы можно обнаруживать микроскопией. Обычно на воздушных, реже на вегетативных конидиях могут наблюдаться короткие и длинные цепи конидий.

Морфология клеток нокардий в культуре. Из подозрительных колоний готовят мазки, которые окрашивают по Граму и модифицированному методу Циля-Нильсена. В положитель­ных случаях находят грамположительные нити, распадающиеся со вре­менем (2-7 суток) на палочковидные формы и коккобактерии. В мазках из молодых культур, окрашенных по Цилю-Нильсену, находят ветвя­щиеся клетки красного цвета.

Идентификация нокардий на уровне рода. Дифференциацию нокардий от сходных видов родов Actynomyces, Streptomyces, Dermatophilus проводят после определения признаков, пред­ставленных в таблице 59 (см. «Лабораторная диагностика актиномикоза»). К нокардиям относят культуры, типичные по морфологии колоний, клеток для рода Nocardia, являющиеся строгими аэробами, обладающие каталазной активностью, растущие на декстрозном агаре Сабуро, имею­щие на колониях воздушные гифы, образующие споры (конидии), прояв­ляющие склонность к фрагментации нитевидных структур на палочко­видные и кокковидные формы, расщепляющие в тесте Хью-Ляйфсона глюкозу путем оксидации (в аэробных условиях), а также при отсутствии острого специфического запаха у культур.

Идентификация нокардий на уровне вида. При наличии у животных характерных для нокардиоза патологоанатомических изменений и выделении культур, типичных по вышеперечислен­ным признакам для нокардий, диагноз, в принципе, может быть установлен. Определенные затруднения пред­ставляет дифференциация кроличьего нокардиоза от актиномикоза. Лабора­торные критерии дифференциации возбудителей представлены в таблице 67.

Питательные среды

Культивирование этой группы микроорганизмов не представляет трудно­стей. Для их выделения из патологического материала можно использовать теллуритовую среду, декстрозный агар Сабуро, сердечно-мозговой агар и среду Левенштейна-Иенсена. Для подав­ления посторонней микрофлоры рекомендуется при выделении N. asteroides добавлять в питательную среду диметилхлортетрациклин (5 мкг/мл) или метилтетрациклин (10 мкг/мл) и противогрибные антибиотики.

Таблица 67 - Дифференцирующие признаки видов Nocardia

11-89% штаммов положительные.