Ксантопротеиновая реакция на циклические аминокислоты

Принцип метода. При смешивании раствора белка с концентрированной азотной кислоты белок сначала выпадает в осадок, при последующем нагревании растворяется и жидкость окрашивается в желтый цвет. Аминокислоты, имеющие в своем составе бензольное кольцо (фен, тир, три), вступают с азотной кислотой в реакцию нитрования с образованием нитросоединений желтого цвета.

Реактивы:

1) 1 % раствор яичного белка;

2) 1 % раствор желатина;

3) азотная кислота концентрированная (HNO₃)_.

Ход работы. Берут 3 пробирки: в первую вносят 5 капель 1 % раствора яичного белка, во вторую – 5 капель 1 % желатина, в теретью - 5 капель воды. Затем в каждую пробирку добавляют по 5 капель концентрированной азотной кислоты (HNO₃ - агрессивная жидкость!). Кипятят 2 минуты в водяной бане. Регистрируют изменение цвета.

Результат:

Первая пробирка: _____________________________________________________________

_____________________________________________________________________________Вторая пробирка: ______________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Третья пробирка: ______________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Вывод: ______________________________________________________________________

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Реакция Миллона на тирозин

Принцип метода. При добавлении к раствору белка реактива Миллона, (раствор ртути (I и II) в азотной кислоте с небольшим количеством HNO₃), образуется белый осадок (действие соли тяжелого металла), окрашивающийся при нагревании в красный цвет. Реактив Миллона дает окрашивание почти со всеми фенолами, причем у белков реакция обусловлена присутствием в них фенольной группы тирозина. Белки, не содержащие тирозина, этой реакции не дают.

Реактивы:

1) 1 % раствор яичного белка;

2) реактив Миллона.

Ход работы. Берут 3 пробирки: в первую вносят 10 капель 1 % раствора яичного белка, во вторую - 10 капель воды, в третью - 10 капель раствора фенола. В каждую пробирку добавляют по 3 капли реактива Миллона (смесь солей ртути в концентрированной азотной кислоте). Нагреть до окрашивания

Результат:

Первая пробирка:_____________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Вторая пробирка: ______________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Третья пробирка: ______________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Вывод: ___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________