Методика виявлення етилового спирту в напоях і розчинах

У флакон з-під пеніциліну вносять 0,5 мл 50 %-го розчину трихлороцтової кислоти і 0,5 мл водного розчину еталонної речовини (95 %-го етилового спирту, розбавленого з таким розрахунком, щоб концентрація його становила 3—4 °/₀₀). Флакон закривають гумовим корком і закріплюють спеціальним пристроєм (фіксатором). Потім за допомогою шприца через гумову пробку у флакон вводять 0,25 мл 30 °/₀₀-го розчину нітриту натрію. Вміст флакона протягом 1 хв ретельно перемішують і за допомогою іншого сухого шприца набирають 3 мл газової фази, що знаходиться над рідиною. її вводять у дозатор хроматографа і здійснюють хроматографування. При цьому записують час утримування етилнітриту.Після закінчення хроматографування еталонної речовини проводять точно такий самий дослід з розчином, у якому передбачають наявність етилового спирту. Збіг часу утримування речовини в обох пробах (у пробі з еталонною і досліджуваною речовиною) свідчить про ідентичність цих речовин.

Методика виявлення етилового.спирту в крові і сечі. Методика виявлення етилового спирту в крові і сечі аналогічна методиці виявлення його в напоях і розчинах. Спочатку здійснюють хроматографування і-визначення часу утримування чистого етилового спирту, який є еталонною речовиною. Це визначення проводять так, як зазначено в описі методики визначення цього спирту в напоях і розчинах. Потім приступають до визначення етилового спирту в крові і сечі. У флакон з-під пеніциліну вносять 0,5 мл досліджуваної крові або сечі і 0,5 мл 50 %-го розчину трихлороцтової кислоти. Флакон і закривають гумовою пробкою і закріплюють її спеціальним фіксатором. Після цього у флакон через гумову пробку за допомогою шприца вводять 0,25 мл 30 %-го розчину нітриту натрію. Вміст флакона ретельно збовтують протягом 1 хв. Потім з флакона іншим шприцом набирають 3 мл газової фази, вводять її в дозатор хроматографа і хроматографують. Якщо час утримування еталонної речовини і речовини, що міститься в крові або сечі, збігається, роблять висновок про наявність етилового спирту в досліджуваних біологічних рідинах. При виявленні етилового спирту в крові або сечі методом газорідинної хроматографії здійснюють кількісне його визначення в зазначених об'єктах..Кількісне визначення етилового спирту в крові щі сечі методом газорідинної хроматографії. Для кількісного визначення етилового спирту в крові і сечі застосовують метод внутрішнього стандарту як один з методів газорідинної хроматографії. Згідно з цим методом, до крові або сечі, в яких визначають кількісний вміст етилового спирту, добавляють внутрішній стандарт. Як внутрішній стандарт застосовують пропіловий спирт. Етиловий спирт, що міститься в крові або сечі (т. кип. 78 °С), а також пропіловий спирт (т. кип. 97,5 °С), який внесли як внутрішній стандарт, переводять у більш леткі сполуки (етилнітрит з т. кип. 17 °С і пропілнітрит з т. кип. 46—48 °С). Суміш етилнітриту й пропілнітриту вводять у дозатор хроматографа і здійснюють хроматографування. При цьому на хроматограмі виписуються два піки, один з них відповідає етиловому спирту (етилнітриту), другий — пропіловому спирту (пропілнітриту). Потім обчислюють відношення площі або висоти піка етилового спирту (етилнітриту) до площі або висоти піка пропілового спирту (пропілнітриту). Розрахунок кількісного вмісту етилового спирту в крові і сечі здійснюють за калібрувальним графіком. Побудова калібрувального графіка. Спочатку готують серію стандартних розчинів, які містять по 2, 3, 4, 5 °/₀₀ етилового спирту, і розчин внутрішнього стандарту, в якому міститься 4 °/₀₀ пропілового спирту. У кілька флаконів з-під пеніциліну вносять по 2 мл внутрішнього стандарту (пропілового спирту), потім у кожний флакон добавляють по 2 мл етилового спирту різної концентрації (2, 3, 4 і 5 °/₀₀). Вміст флаконів ретельно перемішують, з кожного флакона беруть по 1 мл суміші спиртів і переносять в інші флакони з-під пеніциліну. В кожний флакон добавляють по 0,5 мл50 %-го розчину трихлороцтової кислоти. Флакони закривають гумовими пробками, які закріплюють фіксаторами. Потім за допомогою шприца через гумову пробку у флакони вносять по 0,25 мл 30 %-го розчину нітриту натрію. Вміст флаконів збовтують протягом 1 хв. Після цього за допомогою іншого шприца з кожного флакона беруть по 3 мл газової фази, яка знаходиться над рідиною, і вводять її в хроматограф, дотримуючись умов хроматографування, зазначених вище.

На хроматограмах вимірюють висоти або площі піків, обчислюють відношення площ або висот піків етилового спирту до площ або висот піків пропілового спирту для кожної проби. Одержані результати множать на 100 і наносять на вісь ординат калібрувального графіка, на вісь абсцис наносять концентрації етилового спирту (в °/₀₀).

Date: 2015-09-05; view: 518; Нарушение авторских прав