Практична робота. Дослід 1. Відновлення метиленової синьки аскорбіновою кислотою

Дослід 1. Відновлення метиленової синьки аскорбіновою кислотою.

Принцип методу. Аскорбінова кислота здатна відновлювати метиленовий синій, який переходить при цьому у безколірну лейкосполуку.

Матеріальне забезпечення: 0,01 % розчин метиленового синього, 10 % розчин Na₂CO₃, 1 % витяжка з шипшини, дистильована вода, пробірки.

Хід роботи: У дві пробірки додають по одній краплі 0,01 % розчину метиленової синьки і 10 % розчину Na₂CO₃. В першу пробірку додають 5 крапель 1 % витяжки з шипшини, в другу – стільки ж дистильованої води. Пробірки одночасно нагрівають. У пробірці з витяжкою з шипшини рідина знебарвлюється.

Зробити висновок. Пояснити отриманий результат.

Дослід 2. Реакція з феруму хлоридом на виявлення вітаміну Е.

Принцип методу. Спиртовий розчин a-токоферолу окиснюється феруму хлоридом до токоферилхінону червоного кольору.

Матеріальне забезпечення: токоферол (0,1 % спиртовий розчин), 1 % розчин феруму хлориду, пробірки.

Хід роботи: В суху пробірку вливають 4-5 крапель 0,1 % спиртового розчину токоферолу, додають 0,5 мл 1% феруму хлориду, інтенсивно перемішують, гріють на відкритому вогні до зміни кольору. Вміст пробірки набуває червоного забарвлення.

Зробити висновок. Пояснити отриманий результат, вказати на причини появи червоного кольору.

Клініко-діагностичне значення. За сучасними уявленнями головна функція токоферолів полягає в тому, що вони служать антиоксидантами по відношенню до ненасичених ліпідів. Завдяки наявності в молекулі лабільного атому водню a-токоферол взаємодіє з пероксидними радикалами ліпідів, відновлюючи їх в гідропероксиди і перериваючи таким чином ланцюгову реакцію пероксидації.

Більшість проявів недостатності токоферолу залежить, мабуть, від припинення здійснюваної вітаміном інгібуючої дії на аутоокиснення ненасичених жирних кислот, що входять у склад клітинних і субклітинних мембран: гемолітична анемія у недоношених дітей; атрофія сім’яників і безплідність; розсмоктування плоду на ранніх стадіях вагітності; м’язова дистрофія, що супроводжується втратою внутрішньоклітинних азотистих компонентів та білків м’язів. Безпосередня причина м’язової дистрофії – вивільнення лізосомальних гідролаз внаслідок дефекту мембрани лізосом.

Добова потреба для дорослої людини 20 – 30 мг, концентрація в сироватці крові 3500 – 8000 нмоль/л.

З мембранною патологією, мабуть, пов’язані ділянки некрозу, що спостерігаються при авітамінозі Е в печінці, тканині мозку, особливо мозочка.

Найбільш багаті на вітамін Е рослинні масла: соняшникове, кукурудзяне, бавовняне, оливкове. Особливо високий його вміст у маслі, отриманому із зародків пшениці, вівса, зеленого горошку. Випускають препарат синтетичного a-токоферолу ацетату в рослинному маслі для внутрішнього прийому і для внутрішньом’язових ін’єкцій. Застосовують в якості антиоксиданту при м’язовій дистрофії, порушенні репродуктивної функції у жінок і чоловіків, гемолітичній анемії у новонароджених, в комплексній терапії серцево-судинних захворювань, очних та печінкових захворювань тощо.

Контроль виконання лабораторної роботи

1. Виявлення вітаміну С реакцією з метиленовим синім. Поясніть принцип методу.

2. Виявлення вітаміну Е реакцією з феруму хлоридом. Поясніть принцип методу.

3. У пацієнтки спостерігається порушення перебігу вагітності, існує загроза викидня. Дефіцит якого вітаміну може спостерігатися та якою якісною реакцією це можна виявити?

A.Реакція з нітратною кислотою

B. Реакція з феруму хлоридом

C. Реакція з дихлорфенол-індофенолом

D.Реакція із феруму сульфатом

E. Біуретова реакція

4. Які з наведених лікарських препаратів, що є аналогами вітамінів мають антигеморагічну дію:

A. Синкавіт

B. Вікасол

C. Глутамінова кислота