Возбудители респираторных вирусных инфекций

Приложение № 2.

Правила сбора материала для вирусологических, иммунологических

Исследований

1. Отделяемое из зева, носовых ходов целесообразно брать на 1-2-й день от начала заболевания:

- больному предлагают прополоскать рот водой, затем 8-10 мл слабощелочного раствора Хенкса. Полоскание ведут, запрокинув голову, затем осторожно сплёвывают смыв в стеклянную воронку, вставленную в стеклянную пробирку;

- у детей, ослабленных взрослых материал получают с помощью стерильного ватного тампона, который вводят по наружной поверхности языка, придавливая его шпателем и тщательно протирая им слизистые стенки зева;

- слизь из носовых ходов забирают тампоном с помощью носового зеркала-расширителя, которое вводят в область средней раковины;

- для получения секрета из полости носа в большом объёме в оба носовых хода глубоко вводят длинным узким пинцетом марлевую ленточку (тампоны). Через 15-20 минут её извлекают и помещают в шприц ёмкостью 5-10 мл, с помощью поршня отжимают адсорбированный субстрат в стерильную пробирку. 0,1-0,5 мл секрета помещают на лёд и быстро переправляют для анализа в лабораторию;

- материал транспортируют в охлаждённом состоянии (пробирки помещают в термостат или сосуд со льдом);

- тампоны со слизью из зева и носа от одного больного можно погружать в общую пробирку с 3 мл раствора Хенкса.

2. Мокроту для выделения вируса собирают утром, натощак. Накануне больному можно назначить отхаркивающее. Мокроту помещают в холодильник или в смесь сухого льда со спиртом на 2-3 часа. Затем отттаивают, верхний слой осторожно переносят пипеткой в стерильную пробирку и добавляют 500 ед. пенициллина и 250 ед. стрептомицина на 1 мл. Для инактивации сопутствующих бактерий, смесь выдерживают 3 часа при комнатной температуре и используют для вирусологических исследований.

3. Кровь – 3-5 мл берут из вены утром натощак, дефибринируют, добавляют 200 ед. пенициллина и 100 ед. стрептомицина на 1 мл. выдерживают до работы 15-20 минут при комнатной температуре:

- Можно использовать свернувшуюся кровь, которую предварительно растирают в ступке и разводят 1:2 физиологическим раствором, выдерживают в холодильнике 1 час, работают с надосадочной жидкостью$

- Иногда кровь берут из вены и немедленно разводят дистилированной водой 1:3$

- От трупа кровь берут из сердца.

4. Кал при энтеровирусной, респираторной инфекциях помещают в пенициллиновые флакончики (заполняют на 1/3 его), закрывают резиновой пробкой, транспортируют в лабораторию при 16-20 ⁰С.

Приступая к анализу, во флакон добавляют 7-8 мл дистилированной воды, заворачивают в марлевую салфетку, смоченную 3% раствором хлорамина, встряхивают до получения гомогенной взвеси. Её центрифугируют 30 минут при 1500-3000 об/мин.

Надосадочную жидкость отбирают пипеткой, добавляют 1000 ед. пенициллина и5 00 ед. стрептомицина на 1 мл взвеси, выдерживают 40 минут при комнатной температуре и 12 часов при 16-20 ⁰С. После отстаивания суспензию повторно центрифугируют.

7.5. Источники информации:

Список рекомендуемой литературы:

Основная:

1. Лекции

2. Методическая разработка

3. Борисов Л.Б. с соавт. Руководство к лабораторным занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии. - М., 2002.

4. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология /Под ред. Л.Б. Борисова, А.М. Смирновой. - М., 2008.

5. Микробиология, вирусология иммунология/ под ред. В.Н. Царева.- М., 2009. – 543с.

6. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология: Учебник для мед. вузов.- 3-е изд.- СПб.: СпецЛит, 2008.

7. Поздеев О.К. Медицинская микробиология: учебное пособие (под ред. Покровского В.И. - 4 изд.). М., 2008.

Рекомендуемая литература

1. Атипичная пневмония – новая патология XXI века// Рос. мед. журн., 2003. -№5. С.50-56.

2. Атлас-руководство по микробиологии, иммунологии и вирусологии/ под ред. Академика РАМН, проф. А.А. Воробьева и проф. А.С. Быкова.- М.: МИА. – 2003, 2005. – 563с.

3. Белов А.Б., Огарков П.И. Зоонозный (птичий) грипп, прогнозы пандемии и реальность // Журн. микробиологии, 2008. - №1. – С 90-95.

4. Букринская. Вирусология. - М., 1987. – 221с.

5.Лусс Л.В. Современные принципы терапии и профилактики гриппа// Росс. аллергол. журн., 2007. - №2. – С. 32-45.

6.Онищенко Г.Г., Нетесов С.В., Агафонов А.П. и др. Высокопатогенный птичий грипп: угроза новой пандемии и возможности ее противостоять// Вестн. РАМН, 2006. - №12. – С 36-41.

7. Справочник по микробиологическим, вирусологическим методам исследования под ред. М.О. Биргера. -М., 1982. - С.363-381.

8. Шубладзе А.Н., Гайдамович С. Я. Краткий курс практической вирусологии. - М., 1954.

9. Царев В.Н., Давыдова М.М. Микробиология полости рта – Учебное пособие. – М.: МГМСУ, 2006. – 45с.