Медленнорастущих видов Mycobacterium

Примечание к таблице 44: «М. bovis complex» включает M. bovis, BCG и М.africanum. «М.теггае complex» включает М. terrae, M. nonchromogenicum и М. triviale. «M.avium complex» включает M.avium и M.intracellure. Новый подвид, не описанный в «Bergey's Manul of Sistematic Bacteriology», M.avium subsp. silvaticum предложен в 1990 г. (Thorel et al.). Те же авторы предложили считать М. paratuberculosis другим подвидом — M.avium subsp. paratuberculosis, но имеющихся данных недостаточно, чтобы легко различать эти подвиды. Вид M.flavescens — быстрорастущий и может быть ошибочно принят за M.szulgai. M.szulgai может быть фотохромогенным в условиях роста при 25° С.

Биопроба. Используют для выявления возбудителя в исследуемом материале и диффе­ренциации видов микобактерий по спектру патогенности. Биопроба отличается высокой чувствительностью. Заражением морс­ких свинок можно выявить возбудитель при наличии в материале 5-6 кле­ток микобактерий. Для обнаружения М. tuberculosis и М. bovis используют морских свинок, кролики устойчивы к заражению М. tuberculosis. Для вы­явления М. avium в опыт берут кур не моложе 150 дней.

Используют кроликов массой 2 кг, морских свинок — 300-350 г. Биопробу на туберкулез производят следующим образом. При заражении животных тканевым материалом последний после обра­ботки и нейтрализации измельчают, выдерживают до осаждения крупных частиц, надосадочную жидкость используют для заражения.

Соотношение материала и жидкости берется с таким расчетом, чтобы на 1 мл конечной взвеси приходилось около 1 г ткани. Для заражения исследуемой куль­турой бактериальную массу снимают с поверхности плотной питательной среды и помещают в предварительно взвешенную емкость (бюкс, пенициллиновый флакончик), на аналитических весах определяют массу бактерий и, исходя из полученных результатов, добавляют стерильный физиологический раствор в количестве, обеспечивающем содержание 1 мг бактерий в 1 мл. Бактериальная масса должна быть тщательно растерта до получения гомогенной суспензии.

С целью обнаружения микобактерий в исследуемом материале последний вводят в дозе 1-2 мл двум морским свинкам подкожно в область паха, курам — в подкрыльцовую вену. Через 30 суток зараженных животных исследуют тубер­кулиновой пробой. У морских свинок удаляют на боку шерсть и вводят внутрикожно ППД — туберкулин для млекопитающих в дозе
25 ТЕ в объеме 0,1 мл. Курам вводят 0,1 мл ППД туберкулина — для птиц внутрикожно в бородку. У морских свинок реакцию учитывают через 24 и 48 часов, у кур через 30-36 ч.

При определении вида микобактерий культурой заражают двух морских свинок подкожно, двух кроликов и двух кур внутривенно в дозе
1 мг/мл. Критерии дифференциации микобактерий по результатам заражения различ­ных животных представлены в таблице 45.

Таблица 45- Дифференциация микобактерий по результатам заражения различ­ных животных

По данным ученых более точная дифферен­циация основных патогенных видов удается при следующих способах и дозах заражения культурами микобактерий (табл. 46).

Таблица 46 - Дифференциация возбудителей туберкулеза в опыте