Робота 2. Дослідження алантоїсної рідини, отриманої з інфікованих курячих ембріонів, на присутність вірусу грипу в реакції гемаглютинації

Культивування вірусу грипу проводили в курячому ембріоні, який був інфікований матеріалом від хворого. Після інфікування курячі ембріони інкубували при температурі 37 ⁰С протягом 48-72 годин. Для індикації вірусу вірусолог застосовує реакцію гемаглютинації (РГА), а для ідентифікації – реакцію гальмування гемаглютинації (РГГА).

РГА ставиться на склі. Стерильною піпеткою інгредієнти вносять за схемою:

Примітка: Якщо в хоріоналантоїсній рідині міститься вірус грипу, а значить він містився також у матеріалі від хворого, яким був інфікований курячий ембріон, то реакція буде позитивною, тобто гемаглютиніни вірусів склеюють еритроцити. Навпаки, якщо в хоріоналантоїсній рідині вірус відсутній, то реакція буде негативною. В контрольній краплі реакція завжди є негативною.

Студент повинен зробити оцінку реакції на основі знань про механізм даної реакції, зарисувати її у протоколі та написати висновок.

Робота 3. Реакція гальмування гемаглютинації – РГГА (ідентифікація виділеного вірусу грипу)

РГГА вірусолог застосує для типування вірусів на етапі ідентифікації. Реакція ґрунтується на пригніченні антигенів (гемаглютинінів) вірусів антитілами імунної сироватки, в результаті чого віруси втрачають властивість аглютинувати еритроцити (на дні луночки зсідання еритроцитів у вигляді "ґудзика").

Студент повинен зробити облік реакції, яка поставлена у планшетці. Компонентами реакції є хоріоналантоїсна рідина, яка отримана з інфікованого курячого ембріону, протигрипозні типоспецифічні сироватки А0, А1, А2 та фізіологічний розчин.

Студенту відомо, що позитивний результат реакції має вигляд диска з рівними краями, а негативний результат – диска з зазубреними краями. Результати реакції свідчать про те, що гемаглютиніни досліджуваного вірусу нейтралізуються типоспецифічною протигрипозною сироваткою А2 в титрах 1:20, 1:40, 1:160. Цей результат вказує на те, що досліджуваний вірус відноситься до підтипу А2.