Полезное:
Как сделать разговор полезным и приятным
Как сделать объемную звезду своими руками
Как сделать то, что делать не хочется?
Как сделать погремушку
Как сделать так чтобы женщины сами знакомились с вами
Как сделать идею коммерческой
Как сделать хорошую растяжку ног?
Как сделать наш разум здоровым?
Как сделать, чтобы люди обманывали меньше
Вопрос 4. Как сделать так, чтобы вас уважали и ценили?
Как сделать лучше себе и другим людям
Как сделать свидание интересным?
Категории:
АрхитектураАстрономияБиологияГеографияГеологияИнформатикаИскусствоИсторияКулинарияКультураМаркетингМатематикаМедицинаМенеджментОхрана трудаПравоПроизводствоПсихологияРелигияСоциологияСпортТехникаФизикаФилософияХимияЭкологияЭкономикаЭлектроника
|
Обнаружение карбоксигемоглобина⇐ ПредыдущаяСтр 38 из 38 Химический метод основан на том, что оксид углерода(II) образует с гемоглобином довольно прочное хим. соед-е, к-е плохо реагирует с другими реактивами. Обнаружение хим. методом при отравлениях проводят непосредственно в крови с исп-нием различ. реактивов. Для сравнения исп-ют кровь животных или доноров (контрольная проба), с к-й проводят те же испытания. Изменение окраски наблюдают путем сравнения контрольного и испытуемого образца после добавления различ. реактивов. Кровь, сод-щая карбоксигемоглобин, от прибавления хим. реагентов не изменяет или незначительно изменяет окраску. Заключение об обнаружении карбоксигемоглобина в крови дается, если с большинством реактивов будут получены указанные в таблице рез-ты. Следует учитывать, что при легкой степени отравления и незначительном сод-нии карбоксигемоглобина возможно получение отриц. рез-та. Спектроскопический метод исп-ся для обнаружения в крови карбоксигемоглобина при отравлении оксидом углерода(II). В практике химико-токс. анализа для этих целей исп-ют микроспектроскоп - это спектроскоп, соединенный с окуляром. В основе метода - способность гемоглобина и его производных поглощать световое излучение опред. длины волны. Если луч света проходит ч/з р-р, сод-щий гемоглобин и его производные, в спектре появляются темные полосы поглощения. Разбавленная кровь, не сод-щая карбоксигемоглобина, при наблюдении в спектроскопе обнаруживает две полосы поглощения. Они располагаются между линиями Фраунгофера Д и Е в желтой и зеленой частях спектра, к-е соответствуют оксигемо-глобину. Если к крови добавить восстановитель (NH4)2S, оксигемоглобин восстанавливается в гемоглобин. При этом вместо 2 полос поглощения будет наблюдаться одна широкая полоса в той же области спектра. В разбавленной крови, направленной на химико-токс. анализ с подозрением на отравление оксидом углерода(II), также будут наблюдаться две темные полосы поглощения. При добавлении к этой крови (NH4)2S восстановления не происходит. Две полосы поглощения не исчезают. Это говорит о высокой хим. стойкости карбоксигемоглобина. Однако м/у этими четко выраженными полосами часто появл-ся небольш. затемнение за счет того, что несвязанный с оксидом углерода(II) оксигемоглобин восстанавливается до гемоглобина. Спектрофотометрическое определение карбоксигемоглобина. По своей сущности этот метод можно отнести к дифференциальной фотометрии. В крови людей и животных гемоглобин сод-ся в виде дезоксигемоглобина (Нb) и оксигемоглобина (Нb02) - продукта взаим-вия гемоглобина с кислородом. В крови может содержаться также небольшое кол-во метгемоглобина (МtHb). При поступлении в организм оксида углерода(II) происх. образ-е карбоксигемоглобина за счет оксигемоглобина и дезоксигемоглобина. Метгемоглобин с оксидом углерода(II) не связывается. Все указанные соединения имеют характерные спектры поглощения в области 450-620 нм. Метод определения карбоксигемоглобина основан на том, что при взаим-вии с восст-лями (дитионатом натрия, сульфидом аммония) все соединения гемоглобина (MtHb, НЬ02) за исключением карбоксигемоглобина (СОНb) восстанавливаются до дезоксигемоглобина. Спектр поглощения дезоксигемоглобина имеет одну полосу поглощения с максимумом при 557 нм. Карбоксигемоглобин не восстанавливается, и его спектр поглощения сохраняется. Методика определения карбоксигемоглобина (ВОЗ, Женева, 1998). Для анализа исследуемую кровь делят на 3 части. Одну часть (А) оставляют без изменения, вторую часть (В) насыщают оксидом углерода до 100% содержания СОНb и исп-ют в кач-ве стандарта, третью часть (С) насыщают кислородом до полного вытеснения СО, т.е. получают 100% оксигемоглобина.К каждой из трех проб добавляют восстановитель дитионат натрия - NajSjCy 2Н20. Регистрируют спектры поглощения всех трех растворов в области 500-620 нм и измеряют значение оптической плотности А при 540 и 579 нм (изобестическая точка). Расчет содержания карбоксигемоглобина ведут по величине отношения оптической плотности А540/А579. Находят отношение А540/А579 для растворов А, В и С. Эти отношения подставляют в формулу. Этот метод эффективен при исследовании крови, содержащей более 10% карбоксигемоглобина. Физиологическая норма содержания карбоксигемоглобина в крови составляет от 1,5 до 3,1%, для курильщиков - <10%. Смертельная концентрация карбоксигемоглобина в крови составляет в среднем -60% и может колебаться в зависимости от внешних условий и особенностей организма от 40 до 80%.
|