Морфология и физиология 2 page

Антигенная структура и токсинообразование. Менингококки содержат протеиновый антиген, общий для всего вида, и полисахарид, различная структура которого дала возможность разделить кокки на серологические типы, обозначаемые также как серологические группы: А, В, С, D, (X, Y, Z, N — редко встречающиеся). Токсическое воздействие менингококков связано с эндотоксином.

Резистентность. Менингококки относятся к числу очень нестойких микроорганизмов. Повышение температуры до 39 "С задерживает размножение кокков, а до 50 °С — вызывает гибель в течение 5 мин. Понижение температуры до 22 °С и ниже также губительно. При высушивании менингококки погибают в течение нескольких часов.

Дезинфицирующие вещества уничтожают менингококки почти моментально. Патогенез и клиника. Входными воротами для менингококков служат слизистые оболочки носоглотки, размножаясь па которых, кокки вызывают местное катаральное воспаление.

Микробиологическая диагностика: Материал для исследования - кровь, спинномозговая жидкость, носоглоточные смывы. Бактериоскопический метод окраска мазков из ликвора и крови по Граму для определения лейкоцитарной формулы, выявления менингококков и их количества. Наблюдают полинуклеарные лейкоциты, эритроциты, нити фибрина, менингококки – грам«-», окружены капсулой. Бактериологический метод – выделение чистой культуры. Носоглоточная слизь, кровь, ликвор. Посев на плотные, полужидкие питательные среды, содержащие сыворотку, кровь. Культуры инкубируют в течение 20 ч. При 37С с повышенным содержанием СО2.

2. Диагностика брюшного тифа, паратифа. В качестве материала для исследования используют кровь, мочу, испражнения. Основным методом диагностики является бактериологический, завершающийся внутривидовой идентификацией выделенной чистой культуры возбудителя – определением фаговара. Применяют также серологический метод – реакцию агглютинации Видаля, РНГА. Бактериологический метод — выделение B. pertussis из слизи задней стенки глотки, которую забирают натощак или спустя 2–3 ч после еды. Применяют два способа: метод «кашлевых пластинок» и «заднеглоточного тампона». Посев осуществляют на казеиново-угольный агар. Предварительный ответ может быть получен на 3–5-е сутки, окончательный — лишь на 5–7-е сутки.

.Диагностика коклюша серологические методы (РПГА, РА, РНГА) могут быть использованы для диагностики коклюша на поздних сроках заболевания или для эпидемиологического анализа (при обследовании очагов инфекции)..Иммуноферментный анализ (ИФА) позволяет определить содержание антител класса Ig М (в ранние сроки) и Ig G (в поздние сроки заболевания Єкспресс-методы диагностики коклюша (иммунофлюоресцентный, латексной микроагглютинации). Иммунофлюоресцентный (РНИФ) метод позволяет обнаружить наличие корпускулярных антигенов B. pertussis в гортанно-глоточном смыве с задней стенки глотки.. Метод латексной микроагглютинации (ЛМА) позволяет выявить антигены возбудителя коклюша в слизи задней стенки глотки уже через 30–40 мин. Молекулярный метод (ПЦР) обладает высокой специфичностью.Гематологический метод: в крови обнаруживается лейкоцитоз с лимфоцитозом (или изолированный лимфоцитоз) при нормальной СОЭ..

3. Взятие материала производит лечащий врач при соблюдении правил асептики. При взятии материала из раны стерильным ватным тампоном кожу вокруг раны предварительно обрабатывают спиртом или другим антисептиком, некротические массы, детрит и гной удаляют стерильной салфеткой. Взятие материала стерильным тампоном производят круговыми вращательными движениями от центра к периферии поверхности раны. Материал берут двумя тампонами, один из которых используют для микроскопии, а другой - для посеваНе более чем через 1 час после взятия весь материал доставляют в микробиологическую лабораторию для немедленного посева. При невозможности доставить материал в течение этого времени, он должен храниться в холодильнике, но не более двух часов.

БИЛЕТ 6

1. Микробиологическая диагностика сальмонеллезных гастроэнтеритов. Основные возбудители сальмонеллезных гастроэнтеритов. Материал для исследования, сроки отбора. Исследования испражнений, рвотных масс, смывов и другого материала. Бактериологическое исследование.

2. Условно-патогенные бактерии-возбудители ГВЗ и пищевых токсикоинфекций (про гей. псевдомонада, клебсиелла).

3. Микробиологические методы исследования отделяемого глаз и ушей.

1. Сальмонеллезы – это зоонозно-антропонозные инфекции.

Лабораторная диагностика сальмонеллезных гастроэнтеритов.

Основные возбудители: S. typhimurium, S. heidelberg, S. enterica, S. derby и др

Основным возбудителем сальмонеллёзов в последние годы стала S. enterica. Вид S.enterica имеет 7 подвидов: S.choleraesuis, S.salamae, S.arizonae, S.diarizonae, S.houtenae, S.bougori, S.indica.

1.Забор материала.

· Испражнения исследуют с первых дней заболевания и до выписки больного из cтационара: в первый раз — до начала антибактериальной терапии, в последующем — после окончания (не ранее 48 ч). Вероятность выделения сальмонелл из испражнений наибольшая на 1 нед заболевания, на 2 и 3 нед она снижается в 2-6,7 раза соответственно. При гастроинтестинальной форме возбудителя чаще выделяют из испражнений преимущественно на 1 нед

· Рвотные массы и промывные воды желудка забирают в объёме до 100мл. Для исследования используют первые порции промывных вод, полученные без применения дезинфицирующих средств. При кислых значениях рН рвотных масс перед посевом их нейтрализуют 10% раствором бикарбоната натрия, промывные воды центрифугируют 15 мин при 3 000 об/мин и в дальнейшем используют осадок. В случае невозможности центрифугирования допускают посев нативного материала.

· Жёлчь (дуоденальное содержимое) отбирают в стерильные пробирки. При этом отдельно собирают дуоденальное содержимое, пузырную жёлчь и жёлчь из жёлчных протоков (порции А, В и С). Кислая среда, белесоватый оттенок, хлопья делают материал непригодным для бактериологического исследования.

· Моча. Забирают после тщательного туалета наружных половых органов; первую порцию отбрасывают, остальную в количестве 20-30 мл собирают в стерильную посуду. Мочу центрифугируют 15 мин при 3 000 об/мин, для исследования используют осадок. Однако допускают высев и нативного материала. С наибольшей частотой сальмонеллы в моче обнаруживают на 2-3 нед заболевания.

· Спинномозговая жидкость.

2. Посев на питательные среды

· Среды. В качестве сред обогащения используют селенитовый бульон с аминопептидом селенитовую и магниевую среду, тетратионатовый бульон Мюллера, среду Кауффмана 20% жёлчный бульон.

·. Подозрительные колонии (не менее трёх) пересевают в пробирки со скошенной или одной из комбинированных сред (Олькеницкого, Клиглера, Ресселя). В случае эпидемической вспышки из подозрительных колоний (параллельно с пересевом на комбинированную среду) проводят высев на МПА для последующей постановки реакции агглютинации

· Для дальнейшей работы отбирают колонии, уреазаотрицательных бактерий, ферментирующих глюкозу, неферментирующих сахарозу и образующих H2S. Культуры, пересеянные со среды Олькеницкого в среду Гисса с маннитом, 1 % пептонную воду для определения образования индола и в полужидкий агар для определения подвижности. При выделении культур, имеющих ферментативные свойства, характерные для сальмонелл, изучают антигенную структуру в реакции агглютинации на стекле с О - и Н-агглютинирующими диагностическими антисыворотками, а также определяют биовары. По результатам реакции агглютинации ставят окончательный бактериологический диагноз, а исследование прекращают.

. 2. Умовно-патогенні ентеробактерії- Клебсієли.

Родина Enterobacteriaceae-Рід Klebsiella Klebsiella pneumoniae Klebsiella ozaenae Klebsiella rhinoscleromatis

Морфологія форма Гр- еліпсовидни палички

розташування Поодиноко, попарно або короткими ланцюжками

спора Немає.руливість Нерухома капсула Є

Методи культивування Факультативний анаероб 36º С рН - 7,0- 7,4 Живильні середовища - МПА, МПБ

Резистентність Чутливі до дії дезінфектантів. Стійкі до низьких та високих температур (25º С – тижні, місяці)

Антигени О- АГ: 5 серогруп К- АГ: 72 серовари

Культуральні властивості МПБ- дифузне помутніння МПА- утворення S- форми колонії, крупні, слизисті, випуклі. Середовище Ендо, Лєвіна, Плоскірєва – колонії Klebsiella pneumoniae та Klebsiella ozaenae забарвлені в колір індикатора. Розташування клебсієл в юних колоніях: Klebsiella pneumoniae- петлеподібно Klebsiella ozaenae- спіралевидно Klebsiella rhinoscleromatis- концетрично

Методи лабораторної діагностики Мікроскопічний (виявлення капсули методом Буррі - Гінса, Романовського - Гімза) Бактеріологічний Серологічний (РЗК) Біологічний Алергічний (алерген - склерозан)

Умовно-патогенні ентеробактерії- Протеї.

Родина Enterobacteriaceae- Рід Proteus. Proteus vulgaris Proteus mirabilis Proteus rettgeri Proteus inconstans

Морфологія форма Гр- поліморфні палички Розташування Попарно або ланцюжкамиспора Немає Руливість перитрихкапсула Немає

Методи культивування Факультативний анаероб 25-37º С рН - 7,2- 7,4 Живильні середовища - МПА, МПБ

Резистентність Стійкі до фізичних факторів та протимікробних препаратів.

Ферментативна активність Оксидаза – Каталаза Ферментативна активність знижується від Proteus vulgaris до Proteus inconstans.Антигени О- АГ: 49 сероварів Н- АГ: 19 сероварів

Культуральні властивості МПБ- дифузне помутніння з осадом. МПА- О- колонії (окремі S- форми з рівними краями), Н- колонії (вигляд “ роїння ” з дочірніми відростками)

Методи лабораторної діагностики Бактеріологічний (посів за методом Шукевича в конденсаційну воду скошеного агару).

Фактори вірулентності Ендотоксин Фімбрії Джгутики Протеаза Уреаза Гемолізин

3. Микробиологическое исследование Взятие материалаМатериал забирают с пораженных мест в разгар воспалительного процесса с соблюдением правил асептики. Не менее чем за 5 - 6 часов до исследования отменяют все медикаменты и процедуры. Взятие материала производит врач-окулист.

1. Конъюнктива. Отделяемое берут с конъюнктивы платиновой петлей, предварительно прожженной в пламени спиртовки и остуженной, или стеклянными стерильными палочками. При наличии достаточно обильного гнойного отделяемого используют стерильные ватные тампоны, которыми берут гной с внутренней поверхности нижнего века движением к внутреннему углу глазной щели. Необходимо следить, чтобы при моргании ресницы не касались тампона (придерживать веки руками).

2. Край век. Корочки гноя удаляют пинцетом. Берут материал из язвочки у основания ресниц.

3. Роговица. Материал на исследование, после обезболивания, можно взять платиновой петлей или другим подходящим инструментом. Если больной применяет контактные линзы, необходимо исследовать их внутреннюю поверхность. Взятый влажным тампоном материал наносят на поверхность предметного стекла, обезжиренного и прокаленного над пламенем горелки. Мазки высушивают, стекло маркируют, на его обратной стороне обводят границы мазка.

В кабинете врача производят посев на сывороточный бульон и тиогликолевый бульон. Мазок и посевы затем доставляются в лабораторию для исследования.

Бактериоскопию нативного материала проводят при подозрении на кандидоз методом "раздавленной капли"

ИССЛЕДОВАНИЯ ОТДЕЛЯЕМОГО УШЕЙПри воспалительных заболеваниях наружного, среднего и внутреннего уха исследуют гнойное или серозное отделяемое. При этом следует учитывать, что в норме в наружном ухе, слуховом проходе присутствует нормальная микрофлора В среднем и внутреннем ухе микрофлора отсутствует. Взятие исследуемого материалаПри поражении наружного уха проводят обработку кожи 70% спиртом с последующим промыванием физиологическим раствором, затем отделяемое из очага собирают на стерильный ватный тампон.

При поражениях среднего и внутреннего уха исследуют пунктаты и материал, полученный во время оперативных вмешательств, собранный в стерильную посуду.Микроскопия исследуемого материала

1. Бактериоскопия нативного материала

2. Бактериоскопия нативного окрашенного материала. Во всех случаях исследования окрашивание мазков проводят по Граму.

БИЛЕТ№ 7

1. Возбудители пищевых токсикоинфекций (клостридиоз, ботулизм, патогенные стафилококки). Биологические особенности. Эпидемиология, патогенез. Специфическая профилактика.

2. Систематика, классификация. биологические свойства возбудителей микозов.Эпидемиологию, патогенез, биологические свойства плесневых и грибов рода Сапс/к/а.

3.Проведение микробиологической диагностики воздушно-капельных инфекций.

1. Пищевые токсикоинфекций – острые болезни, возникающие в результате употребления пищи, инфицированной микроорганизмами, и характеризующиеся симптомами гастроэнтерита и нарушением водно-солевого обмена. В том случае, если для развития болезни достаточно попадания в организм с пищей лишь токсинов микробов, говорят о пищевых интоксикациях.

Этиология. Возбудителями пищевых токсикоинфекций являются различные условно-патогенные бактерии – Escherichia coli, Clostridium perfringens, Bacillus cereus, некоторые виды протея, клебсиелл, вибрионов, энтерококков и др.; к возбудителям интоксикаций относятся Clostridium botulinum, стафилококки, некоторые грибы (см. главу 2). Заболевание, вызываемое С. botulinum, по патогенезу и клинической картине отличается от интоксикаций, вызванных другими микроорганизмами, и описывается отдельно. Факторы патогенности. Возбудители пищевых токсикоинфекций продуцируют как эндо-, так и экзотоксины. Эндотоксины оказывают энтеротропное, нейротропное действие, повышают температуру тела, вызывают головную боль, недомогание и другие симптомы общей интоксикации. Экзотоксины обладают эн-теротоксическими и цитотоксическими свойствами. В результате действия энтеротоксина усиливается секреция жидкости и солей в просвет кишечника, развивается диарея, с чем связано нарушение водно-солевого обмена. Цитотоксический эффект заключается в повреждении клеток эпителия слизистой оболочки пищеварительного тракта, в которой происходят воспалительные изменения..

Эпидемиология. Острые пищевые токсикоинфекций – заболевания, распространенные повсеместно.. Уровень заболеваемости увеличивается в теплое время годаИсточником инфекции могут быть животные и люди, выделяющие большую часть возбудителей пищевых токсикоинфекций с испражнениями.. Механизм передачи инфекции – фекально-оральный. Путь передачи – пищевой. Употребление самых разных продуктов может привести к развитию пищевой токсикоинфекций или интоксикации.

Патогенез. Особенностью пищевых токсикоинфекций является способность возбудителей продуцировать экзо- и эндотоксины не только в организме человека, но и в пищевых продуктах, чем и объясняется короткий инкубационный период. Развитие стафилококковой пищевой интоксикации обусловлено лишь попаданием в организм экзотоксина. В результате действия освобождающегося при гибели бактерий эндотоксина повышается температура тела, ухудшается самочувствие, могут возникнуть нарушения сердечно-сосудистой, нервной систем и др. Экзотоксины вызывают поражение пищеварительного тракта и нарушение водно-солевого обмена.

Профилактика. Соблюдение санитарно-гигиенических норм при приготовлении и хранении пищи.

2. Грибы - эукариотические одно- и многоклеточные организмы, в большинстве случаев - сапрофиты.Выделяют следующие основные группы микозов.

1.Поверхностные микозы (сапрофитии).

2.Микозы кожи или ее придатков - дерматомикозы.

3.Подкожные микозы (болезни имплантации, при травме).

4.Системные микозы - респираторные, при поражении внутренних органов - висцеральные микозы.

5.Оппортунистические микозы.

Плесневые грибы (гифомицеты) весьма устойчивы к воздействию различных неблагоприятных факторов (в т.ч. и температурного); они растут преимущественно при доступе кислорода. Этим, по-видимому, обьясняется излюбленное поражение плесневыми грибами слизистых оболочек полости рта. зева, носа, дыхательных путей, наружного слухового прохода, роговицы глаза, стенок каверн легких, «омертвевшей» коже (при сухой гангрене).

3 Особенностью микробиологического исследования при инфекциях дыхательных путей является обязательное наличие в исследуемом материале нескольких видов микроорганизмов

Взятие исследуемого материала Материалом для изучения этиологии заболеваний дыхательных путей служат: отделяемое зева и носа; мокрота; содержимое бронхов, полученное при бронхоскопии или при отсасывании через трахеостому (у больных, находящихся на аппаратном дыхании); экссудаты; резецированные ткани и др. Материал собирают с соблюдением правил асептики в предварительно простерилизованные баночки или пробирки и доставляют в лабораторию. Интервал между взятием материала и его посевом не должен превышать 1 - 2 часа.

Промывные воды бронхов. При отсутствии или скудном количестве мокроты производят смыв из бронхов физиологическим раствором, однако, при этом микробиологическая ценность исследования снижается из-за разведения секрета (часто значительного) и бактерицидного действия раствора на чувствительные микроорганизмы, поэтому нередко концентрация бактерий в бронхиальном содержимом в 10 - 1000 раз ниже, чем в мокроте. Кроме того, трудоемкость эндоскопического взятия материала и тяжесть манипуляции для больного ограничивает проведение повторных исследований в динамике заболевания.

Материал из носовой полости забирают сухим стерильным ватным тампоном, который вводят в глубь полости носа. Материал из носоглотки берут стерильным заднеглоточным ватным тампоном. Тампон осторожно вводят через носовое отверстие в носоглотку. Если при этом начинается кашель, тампон не удаляют до его окончания. Для проведения анализов на дифтерию исследуют одновременно пленки и слизь из носа и глотки. Материал из носа и глотки берут разными тампонами. При подозрении на клебсиеллы, независимо от места локализации процесса, исследуют материал из носоглотки и обеих половин носовой полости.

Микроскопия исследуемого материала

Из мокроты или материала, взятого стерильным ватным тампоном, одновременно с посевом приготавливают мазки, окрашивают их по Граму и микроскопируют с иммерсионным объективом.

Микроскопическое исследование является важным ориентиром. При просмотре мазков из мокроты оценивают общую картину микрофлоры: наличие скоплений грамположительных кокков (Staphylococcus, Micrococcus); цепочек грамположительных кокков (Streptococcus); мелких ланцетовидных, окруженных зоной неокрасившейся капсулы (S. pneumoniae); грамотрицательных кокков (Neisseria); грамотрицательных палочек с закругленными концами, окруженных капсулой в виде светлого ореола (Klebsiella и др.); грамотрицательных палочек (E. coli, P. aeruginosa и др.); мелких грамотрицательных палочек в виде скоплений (Haemophylus); мицелия в бластоспор гриба.

По результатам микроскопии могут быть внесены изменения в ход микробиологического исследования.Посев исследуемого материала

БИЛЕТ№ 8

1. Микробиологическая диагностика эшерихиозов. Классификация патогенных эшерихий. Определение вирулентности эшерихий. Исследование адгезивных свойств. Исследование инвазивности. Определение токсигенности. Идентификация патогенных эшерихий но антигенной структуре. Идентификация патогенных эшерихий методом гибридизации ДНК.

2. Значение нормальной микрофлоры кишечника; качественный и количественный сос тав микрофлоры толстого кишечника.

3. Этапы бактериологического метода. Накопительные, чистые, смешанные культуры микроорганизмов. Выделение чистых культур микроорганизмов. Методы и техника посева клинического материала на плотные и жидкие питательные среды, техника пересева бактериальных культур на плотные и жидкие среды с целью накопления чистой культуры и постапов ки ди фферен циал ьных тесто в.

1. Эшерихиозы - инфекционные болезни, возбудителем которых являетсяEscherichiacoli.Различают энтеральные (кишечные) и парентеральные эшерихиозы. Энтеральные эшерихиозы — острые инфекционные болезни, характеризующиеся преимущественным поражением ЖКТ. Парентеральные эшерихиозы — болезни, вызываемые условно-патогенными штаммами Таксономическое положение. Возбудитель — кишечная палочка — основной представитель родаEscherichia, семействаEnterobacteriaceae, относящегося к отделуGracilicutes.

Морфологические и тинкториальные свойства.E.coli— это мелкие грамотрицательные палочки с закругленными концами. В мазках они располагаются беспорядочно, не образуют спор, перитрихи. Некоторые штаммы имеют микрокапсулу, пили.Культуральные свойства.Кишечная палочка — факультативный анаэроб, оптим. темп. для роста - 37С.E.coli не требовательна к питательным средам и хорошо растет на простых средах, давая диффузное помутнение на жидких и образуя колонии на плотных средах. Для диагностики эшерихиозов используют дифференциально-диагностические среды с лактозой — Эндо, Левина.

Ферментативная активность.E.coli обладает большим набором различных ферментов. Наиболее отличительным признакомE.coli является ее способность ферментировать лактозу.

Антигенная структура. Кишечная палочка обладает соматическимО-, жгутиковым Н и поверхностным К -антигенами. О-антиген имеет более 170 вариантов, К-антиген — более 100, Н-антиген — более 50. Строение О-антигена определяет принадлежность к серогруппе. ШтаммыE.coli, имеющие присущий им набор антигенов (антигенную формулу), называютсясерологическими вариантами (серовары).По антигенным, токсигенным, свойствам различают два биологических варианта E.coli: 1) условно-патогенные кишечные палочки; 2) «безусловно» патогенные, диареегенные.

Факторы патогенности. Образует эндотоксин, обладающий энтеротропным, нейротропным и пирогенным действием. Диареегенные эшерихии продуцируют экзотоксин вызывающий значительное нарушение водно-солевого обмена. Кроме того, у некоторых штаммов, как и возбудителей дизентерии, обнаруживается инвазивный фактор, способствующий проникновению бактерий внутрь клеток. Патогенность диареегенных эшерихии - в возникновении геморрагии, в нефро-токсическом действии. К факторам патогенности всех штаммовE.coli относятся пили и белки наружной мембраны, способствующие адгезии, а также микрокапсула, препятствующая фагоцитозу.

Резистентность.E.coli отличается более высокой устойчивостью к действию различных факторов внешней среды; она чувствительна к дезинфектантам, быстро погибает при кипячении.Штаммы, обитающие в толстой кишке и являющиеся условно-патогенными, могут попасть за пределы ЖКТ и при снижении иммунитета и их накоплении стать причиной различных неспецифических гнойно-воспалительных болезней (циститов, холециститов) - парентеральных эшерихиозов.

Микробиологическая диагностика. Основной метод —бактериологический. Определяют вид чистой культуры (грамотрицательные палочки, оксидазоотрицательные, ферментирующие глюкозу и лактозу до кислоты и газа, образующие индол, не образующие сероводород) и принадлежность к серогруппе, что позволяет, отличить условно-патогенные кишечные палочки от диареегенных. Внутривидовая идентификация, имеющая эпидемиологическое значение, заключается в определении серовара с помощью диагностических адсорбированных иммунных сывороток

Бактериологическое На агаре Эндо колонии имеют дискообразной форму, слегка выпуклые с ровными краями, малиново-красного цвета

ИФА. Адгезивные свойства эшерихий (ЕАКП) обнаруживают на культурах Неиа и Нед-2. Самым быстрым и високоспецифиччим методом диагностики заболеваний, вызванных энтеропатогенных эшерихии, является использование специфических ДНК-зондов. Они позволяют выявить гены плазмид, кодирующих патогенность кишечных палочек или синтез их цитотоксин. Метод основан на том, что одноцепная молекула ДНК может гибридизуватися с комплементарным к нее вторым цепью ДНК. В большинстве патогенных эшерихий гены вирулентности локализованы в плазмидах. Итак, зондом для обнаружения этих бактерий могут быть меченые последовательности, клонированные из таких плазмид.

2. Нормальная микрофлора (эубиоз) – это качественное и количественное соотношение разнообразных микробов отдельных органов и систем, поддерживающее биохимическое, метаболическое и иммунное равновесие макроорганизма, необходимое для сохранения здоровья человека.

Пищеварительный тракт человека и животных «заселен» микроорганизмами. В одних отделах тракта в норме их содержание незначительно или они почти отсутствуют, в других их находится очень много. Макроорганизм и его микрофлора составляют единую динамичную экологическую систему. Динамичность эндоэкологического микробного биоценоза пищеварительного тракта определяется количеством поступающих в него микроорганизмов (у человека за сутки перорально поступает около 1 млрд. микробов), интенсивностью их размножения и гибели в пищеварительном тракте и выведения из него микробов в составе кала (у человека в норме выделяется за сутки 10х12—10х14 микроорганизмов).Всвязи с анаэробными условиями у здорового человека в составе нормальной микрофлоры в толстом кишечнике преобладают (96-98 %) анаэробные бактерии:

•бактероиды (особенно Bacteroides fragilis),

•анаэробные молочнокислые бактерии (например, Bifidumbacterium),

•клостридии (Clostridium perfringens),

•анаэробные стрептококки,

•фузобактерии,

•эубактерии,

•вейлонеллы.

И только 14% микрофлоры составляют аэробные и факультативно-анаэробные микроорганизмы:

•грамотрицательные колиформные бактерии (прежде всего кишечная палочка - E.Coli),

•энтерококки,

в небольшом количестве:

•стафилококки,

•протеи,

•псевдомонады,

•лактобациллы,

•грибы рода Candida,

•отдельные виды спирохет, микобактерий, микоплазм, простейших и вирусов.

3. Бактериологическое исследование клинического материала состоит из нескольких этапов:

- отбор проб на исследование;

- посев на питательные среды;

- выделение чистой культуры;

- идентификация и дифференциация выделенных культур микроорганизмов;

- анализ результатов исследования.

Методы бактериологического исследования все шире внедряются в практику для более детального обследования больных, установления этиологического фактора воспалительного процесса, назначения рациональной терапии и определения ее эффективности. Разнообразие клинического материала и своеобразие микрофлоры отдельных органов определяют особенности методов бактериологического исследования, которые требуют применения специальных приемов отбора проб, посевов на питательные среды и проведения хода анализов. Бактериологическое исследование клинического материала состоит из нескольких этапов:

- отбор проб на исследование;

- посев на питательные среды;

- выделение чистой культуры;

- идентификация и дифференциация выделенных культур микроорганизмов;

- анализ результатов исследования.

При бактериологическом исследовании проводят так называемый посев собранного у больного материала на питательные среды, что способствует росту и размножению возбудителя заболевания. В ходе исследования можно выявить не только сам факт наличия, но и концентрацию патогенных микроорганизмов в том или ином биоматериале.

Методом бактериологического исследования исследуют мокроту, ликвор, кровь, а также отделяемое из половых органов, ротовой полости, зева и ран пациента. Таким образом, микроорганизмы можно высевать практически с любого участка организма человека.

Методика бактериологического посева чрезвычайно удобна и эффективна для обнаружения и определения вида бактерий и грибков. Определенную сложность представляет обнаружение вирусов в связи с особенностями их биологии.Бактериологическое исследование (посевы) имеет огромное значение не только для определения конкретного типа микроорганизма, но и установления степени чувствительности к нему того или иного антибиотика. Таким образом, определяется максимальная эффективность того или иного вида антибиотикотерапии.

БИЛЕТ № 9

1. Методы микробиологической диагностики туберкулеза, дифтерии, коклюша. Прием, регистрация биологического материала, подготовка рабочего места для проведения микробиологического исследования.Проведение забора биологического материала, посев, выделение и идентификация чистой культуры.

2. Возбудители боррелиозов. Биологические особенности возбудителей. Эпидемиология, патогенез, клиника. Микробиологическая диагностика. Профилактика.

3. Проведение микробиологической диагностики микозов.

1. Микробиологическая диагностика туберкулеза,. Для лабораторного подтверждения диагноза туберкулеза обычно исследуют мокроту, промывные воды бронхов, мочу, спинномозговую жидкость и др. Бактериоскопия мазков, окрашенных по Цилю.Нильсену, эффективна только при высокой концентрации микобактерий в исследуемом материале. Для «обогащения» исследуемого материала используют различные методы, в частности центрифугирование. Бактериологический метод, посев на жидкие и плотные питательные среды более эффективны, но требуют 3-4 нед. Как ускоренный метод диагностики используется микрокультивирование на стеклах в среде Школьникова. Иногда используют биологический метод – заражение морской свинки.

Микробиологическая диагностика дыфтерие. Для бактериологической диагностики дифтерии берут материал из зева и носа. Для постановки предварительного диагноза возможно применение бакте-риоскопического метода. Основной метод – бактериологический. В процессе идентификации выделенной чистой культуры С. diphtheriae дифференцируют от других коринебактерий. Внутривидовая идентификация заключается в определении биовара, что имеет только эпидемическое значение.