Розділ 1. Огляд літератури

КУРСОВА РОБОТА

з біології

на тему: АНТИОКСИДАНТНИЙ ПОТЕНЦІАЛ В РІЗНИХ ШТАМАХ ДРІЖДЖІВ

SACCHAROMYCES CEREVISIAE

Студентки ІІІ курсу, групи Б-31

напряму 6.040102 «Біологія»

Фучко І.Т.

Керівник: доц., д.б.н. Семчишин Г.М.

Національна шкала:

Університетська шкала:

Оцінка ECTS:

Члени комісії:

^{(підпис) (прізвище та ініціали)}

^{(підпис) (прізвище та ініціали)}

^{(підпис) (прізвище та ініціали)}

м. Івано-Франківськ – 2016 рік

ЗМІСТ

с.

СПИСОК СКОРОЧЕНЬ......................................................................................... 3

ВСТУП.....................................................................................................................4

1. ОГЛЯД ЛІТЕРАТУРИ...................................................................................... 6

1.1. Дріжджі Saccharomyces cerevisiae та їх використання......................... 6

1.2. Морфологічні та біохімічні особливості клітин дріжджів

Saccharomyces cerevisiae........................................................................................ 8

1.3 Активовані форми кисню........................................................................ 10

1.4Антиоксидативний потенціал.................................................................. 12

2. МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ.................................................. 13

2.1. Об’єкт дослідження і реактиви........................................................... 13 2.2. Умови культивування дріжджів............................................................ 13 2.3 Умови отримання безклітинних екстрактів...........................................13 2.4 Оцінка загальної антиоксидантної здатності........................................ 14 2.5Визначення концентрації білка і статистична обробка результатів... 14

3. РЕЗУЛЬТАТИ ДОСЛІДЖЕННЯ ТА ЇХ ОБГОВОРЕННЯ........................... 15

ВИСНОВКИ.......................................................................................................... 22

СПИСОК ЛІТЕРАТУРИ...................................................................................... 23

СПИСОК СКОРОЧЕНЬ

АФК - активні форми кисню

ДНК - дезоксирибонуклеїнова кислота

ВРО - вільнорадикальне окиснення

ВРР - вільнорадикальні реакції

СОД - супероксиддисмутаза

ВСТУП

Усі живі організми, у тому числі і дріжджі в природних умовах можуть піддаватися впливу різних зовнішніх факторів, потраплячи таким чином в стресові ситуації. Неочікувані зміни в середовищі існування, можуть спричиняти зміни в структурах біомолекул та їх клітинних функцій. В таких випадках клітини змушені швидко реагувати, адаптовуючи власні внутрішньоклітинні системи, щоб не загинути. Серед таких стресових умов, існує такий як оксидативний стрес, що призводить до збільшення АФК.

Окислювально-відновлювальний стан клітини підтримується спеціалізованими ферментами в результаті постійного притоку енергії. Порушення цього стану викликає підвищення активних форм кисню, таких як пероксиди і вільні радикали. Білки, ліпіди і ДНК окислюються в результаті дії АФК, що призводить до мутацій і нездатності виконувати свої функції в подальшому. У людей окислювальний стрес призводить до таких захворювань, як атеросклероз і хвороба Альцгеймера, і також відповідає за прискорене старіння. Проте, організм може використовувати окислювальний стрес як захисний механізм. Імунна система людини використовує окислювальний стрес для боротьби з патогенами, а деякі АФК можуть служити медіаторами в клітинних сигнальних шляхах.(3)

Надлишок АФК може спричинити модифікацію біологічно важливих молекул, тому генерація АФК у клітині врівноважується знешкодженням і рівень цих оксидантів є відносно низьким (10^-10 – 10^-6 М). Каталаза разом з іншими антиоксидантними ферментами бере участь у деградації АФК.

Дріжджі Saccharomyces cerevisiae містять дві форми каталази – каталазу А та каталазу Т, які кодуються відповідними генами СТА1 і СТТ1. Каталаза А локалізується в пероксисомах і її основна функція – детоксикація Н₂О₂ , який утворюється при β-окисленні жирних кислот. Фізіологічна роль цитозольної каталази Т менше вивчена. Проте відомо, що зростання активності ферменту за дії оксидативного, осмотичного стресу та у разі голодування пов’язано, в першу чергу, з експресією гена СТТ1.(4)

Мета роботи – дослідити антиоксидантивну відповідь у різних штамах дріжджів Saccharomyces cerevisiae. Та зробити висновки про їх захист на дію АФК що утворюються при оксидативному стресі у дріжджів Saccharomyces cerevisiae штамів: УPH₂₅₀ - дикий, та безкаталазні CTA1 та CTT1.

Розділ 1. ОГЛЯД ЛІТЕРАТУРИ