Главная Случайная страница


Полезное:

Как сделать разговор полезным и приятным Как сделать объемную звезду своими руками Как сделать то, что делать не хочется? Как сделать погремушку Как сделать так чтобы женщины сами знакомились с вами Как сделать идею коммерческой Как сделать хорошую растяжку ног? Как сделать наш разум здоровым? Как сделать, чтобы люди обманывали меньше Вопрос 4. Как сделать так, чтобы вас уважали и ценили? Как сделать лучше себе и другим людям Как сделать свидание интересным?


Категории:

АрхитектураАстрономияБиологияГеографияГеологияИнформатикаИскусствоИсторияКулинарияКультураМаркетингМатематикаМедицинаМенеджментОхрана трудаПравоПроизводствоПсихологияРелигияСоциологияСпортТехникаФизикаФилософияХимияЭкологияЭкономикаЭлектроника






Завдання 3. Дослідити функціонування ЦТК мітохондрій за швидкістю утворення СО2 та вплив малонової кислота на цей процес

⇐ ПредыдущаяСтр 11 из 20Следующая ⇒

Принцип методу. Перетворення ацетил-S-КоА в присутності мітохондрій, що містять ферменти ЦТК, супроводжується утворенням СО2. В якості джерела ацетил-S-КоА, що вступає в ЦТК, використовують піровиноградну кислоту (ПВК). ПВК під дією мультиферментного піруват-дегідрогеназного комплексу мітохондрій піддається окисному декарбоксилуванню з утворенням ацетил-S-КоА.

Якщо блокувати ЦТК малонатом (малоновою кислотою), то СО2 не утворюється і бульбашки газу не виділяються. Малонат є класичним конкурентним інгібітором сукцинатдегідрогенази – ферменту ЦТК, оскільки зв’язується з її активним центром та перешкоджає зв’язуванню субстрату – сукцинату (янтарної кислоти).

Для зв’язування СО2, що утворюється, в інкубаційне середовище додають Са(ОН)2. Після закінчення інкубації, зв’язаний СО2 визначають по виділенню бульбашок газу, що утворюються після додавання до інкубаційного середовища сірчаної кислоти.

Хід роботи. Три пробірки – контрольну, дослідну № 1 та дослідну № 2 заповнюють реактивами за таблицею:

 

  Вміст пробірок Пробірки
Контроль Дослід №1 Дослід №2
Фосфатний буфер, рН = 7,4 2,0 мл 2,0 мл 2,0 мл
Розчин пірувату натрію 0,5 мл 0,5 мл 0,5 мл
Малонова кислота --- --- 0,5 мл
Фізіологічний розчин 0,5 мл 0,5 мл ---
Розчин Са(ОН)2 0,5 мл 0,5 мл 0,5 мл
Суспензія мітохондрій --- 0,5 мл 0,5 мл
Суспензія мітохондрій після кип’ятіння 0,5 мл --- ---
Інкубація в термостаті: 15 хв. при температурі 37оС
0,1 М розчин H2SO4 1,0 мл 1,0 мл 1,0 мл
Результати: виділення бульбашок СО2        

 

Всі пробірки поміщають в термостат на 15 хв. при 37оС. Після інкубації в кожну пробірку додають по 1,0 мл 0,1 м розчину H2SO4 і спостерігають за вивільненням бульбашок СО2

За результатами проведеного експерименту зробити висновки.

 


⇐ Предыдущая6789101112131415Следующая ⇒





Date: 2015-10-19; view: 499; Нарушение авторских прав


mydocx.ru - 2015-2024 year. (0.006 sec.) Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав - Пожаловаться на публикацию