Нуклеиновые кислоты и их структурные компоненты

Цель работы: Научиться экспериментально осуществлять гидролиз

биоорганических фракций, содержащих нуклеопротеины, а также идентифицировать компоненты нуклеопротеинов в гидролизате фракций.

Оборудование и реактивы:

Гидролизная пробирка, обратный холодильник, пробирки лабораторные, штатив.

Раствор аммиака концентрированный, р-р NaOH (1 моль/л),
р-р CuSO₄ (10%), р-р AgNO₃ (10%), р-р молибдата аммония, р-р серной и азотной кислоты (1 моль/л).

Сущность работы: Для изучения химического состава нуклеопротеинов удобно пользоваться дрожжевыми клетками. При непродолжительном гидролизе дрожжевой массы или выделенных из неё нуклеопротеинов последние (нуклеопротеины) распадаются на полипептиды, пуриновые и пиримидиновые основания, рибозу и дезоксирибозу и фосфорную кислоты. Продукты гидролиза могут быть обнаружены в гидролизате специфическими для каждого вещества реакциями.

Ход работы:

Опыт I. Гидролиз фракции, содержащей нуклеопротеины.

В гидролизную (широкую длинную, снабженную пробкой с обратным холодильником) пробирку помещают 0,5 г пекарских дрожжей, добавляют 10 мл раствора серной кислоты, с (H₂SO₄)=1моль/л. Пробирку закрывают пробкой с обратным холодильником. Содержимое пробирки кипятят над асбестовой сеткой в течение 60 минут. Затем содержимое пробирки охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через бумажный фильтр.

Уравнение реакции кислотного гидролиза:

Опыт 2. Качественные реакции на компоненты нуклеопротеинов в гидролизате фракции.

а) В пробирку помещают 0,5 мл фильтрата гидролизата и проводят биуретовую реакцию: добавьте равный объем 10% раствора гидроксида натрия и по стенке добавьте 1-2 капли раствора сульфата меди (II).

Наблюдения:

Вывод:

б) В пробирку помещают 0,5 мл фильтрата гидролизата, добавляют 5 капель концентрированного раствора аммиака, 0,5 мл раствора нитрата серебра w(AgNO₃) =10%. Через 5 минут наблюдайте выпадение осадка.

Наблюдения:

Вывод (о наличии в растворе пуриновых оснований).

в) В пробирку помещают 0,5 мл фильтрата гидролизата, добавляют 10 капель раствора гидроксида натрия, с(NaOH)=1 моль/л и 6 капель раствора сульфата меди (II), ω(CuSO₄) =10%. Содержимое пробирки нагревают до кипения.

Наблюдения:

Вывод:

г) В пробирку помещают 0,5 мл фильтрата гидролизата, добавляют 2 мл насыщенного раствора молибдата аммония и 1 мл концентрированного раствора азотной кислоты. Содержимое пробирки перемешивают и кипятят
3-5 минут.

Наблюдения:

Вывод (о наличии в растворе фосфорной кислоты):

Занятие 32

Дата _________ Лабораторная работа

Изучение свойств липидов и их структурных компонентов

Цель работы: Научиться экспериментально доказывать присутствие в липидах основных структурных компонентов, определить непредельность высших жирных кислот, осуществлять омыление жиров.

Оборудование и реактивы: Пробирки лабораторные, чашки фарфоровые, камеры хроматографические.

Растительные масла (подсолнечное, касторовое), бромная вода, раствор гидроксида натрия (35%), система хроматографическая (гексан-диэтиловый эфир-уксусная кислота).

Ход работы:

Опыт 1. Омыление жиров.

В фарфоровую чашку поместите 0,5 мл касторового масла и 4 капли раствора гидроксида на­трия. Стеклянной палочкой хорошо перемешайте ще­лочь с маслом до получения однородной эмульсии.

Поставьте чашку на электрическую печь и при незначи­тельном подогревании продолжайте помешивать, пока не получится однородная, прозрачная, слегка желтоватая жидкость.

Добавьте 2 мл дистиллированной воды и вновь нагрейте, тщательно перемешивая до полного упаривания воды. При охлаждении получится кусочек твердого белого мыла.

Уравнение реакции щелочного гидролиза (омыления):

Наблюдения:

Опыт 2. Определение непредельности высших жирных кислот.

Степень непредельности жиров, обусловленную присутствием непредельных жирных кислот, количественно определяют по присоединению галогенов по месту двой­ной связи (иода, брома).

В маленькую пробирку поместите 8—10 капель бром­ной воды и 2—3 капли подсолнечного масла (содержит большое количество непредельных жирных кислот). Взболтайте.

Уравнение реакции триолеилглицерина с бромной водой:

Наблюдения:

Выводы.

Занятие 33. Защита модуля 6 Строение и свойства биополимеров. Липиды.

Дата _________

Ф.И.О. _______________________ группа _______ Билет № ________

Занятие 34. Итоговая контрольная работа

Дата _________

Ф.И.О. _______________________ группа _______ Билет № ________