ПМ.05 Проведение лабораторных гистологических исследований

Б И Л Е Т №__1_Задача. Гисталогия На судебно-медицинскую экспертизу для гистологического исследования поступил мозг погибшего человека, про которого известно, что он с раннего детства страдал слепотой. Корковые центры зрения находятся в затылочной доли по бокам от шпорной борозды. Слабо или не выражены зернистые (II, IY), к которым подходят афферентные волокна. Задание: Расскажите изготовление гистологических препаратов тканей и органов для проведения диагностических исследований.Изготовление гистологических препаратов включает: 1) фиксацию материала; 2) этикетировкуу приготовление гистологических срезов; 3) окрашивание срезов.Сущность фиксации заключается в том, чтобы сохранить взятые кусочки органов и тканей от гниения и ферментативных процессов, изменяющих структуру тканей.Фиксацию тканей производят в жидкостях различного состава. Наиболее употребляемыми являются формалин, спирт, реже ацетон, сулема и др.Кусочки ткани, взятые для гистологического исследования, не должны быть толще 0,5—0,7 см. Чтобы кусочки ткани не прилегали плотно к стенкам банки, их кладут на вату или фильтровальную бумагу. Объем фиксирующей жидкости должен превышать примерно в 10 раз объем взятого материала. В случаях, когда требуется быстрое исследование, кусочки ткани фиксируют в формалине, нагретом до 85—90° С. Продолжительность фиксации кусочков толщиной 2—3 мм при такой температуре 10—15мин. Фиксация спиртом. Для изготовления гистологических срезов фиксированная ткань нуждается в дополнительном уплотнении. Для этого существует несколько методов: замораживание ткани, пропитывание ее целлоидином, парафином и т. п.Срезов одинаковой толщины, годных для макроскопического исследования, пользуются особыми аппаратами микротомами. Их существует несколько типов. микротомы (рис. Срез должен быть достаточно тонким и прозрачным, обычно изготовляют срезы толщиной от 4 до 15 м>км. Заливка ткани в целлоидин. Для заливки препаратов в целлоидин вырезают кусочки ткани толщиной 1—3 мм и последовательно проводят через спирты возрастающей крепости — 50, 75, 95 и 100°, выдерживая по 24 ч в каждом. Через спирт крепостью 100° кусочки ткани рекомендуется проводить дважды, выдерживая по 24 ч каждый раз. Затем кусочки ткани переносят в смесь равных частей абсолютного (100°) спирта и эфира также на 24 ч. После этого кусочки ткани помещают вначале в 2%-ный, а потом 8%-ный раствор целлоидина на 2—3 дня в каждый. Хранят кусочки, залитые в целлоидин, в 70° спирте. Заливка ткани в парафин. После выдержки кусочков исследуемой ткани в 100° спирте их переносят в смесь равных частей абсолютного спирта и ксилола на 2—3 ч. Затем кусочки ткани заливают чистым ксилолом и выдерживают в течение 2 — 3 ч. По истечении указанного срока их переносят в новый чистый ксилол на 2—3 ч, потом в парафин-ксилол (насыщенный раствор парафина в ксилоле при 30° С) на 1 —1,5 ч. После этого кусочки ткани помещают в чистый; парафин при температуре 54— 56° С на 1,5—2 ч. Затем их заливают парафином в бумажные или металлические формочки и охлаждают в воде и этикетируютт. Окраска гистологических срезов Ядра клеток более способны окрашиваться основными, а цитоплазма — кислыми красками. Соответственно этому различают основные, или ядерные, и кислые, или диффузные, краски.

Практике применяются окраски срезов гематоксилин-эозином по Ван-Гизону, Перлсу, Суданом III и др.Окраска гематоксилин-эозином. Окрашивают срезы в маленьких чашках Петри или на стеклах. Этот метод применяется для окраски срезов, приготовленных любым способом. При этом ядра клеток приобретают фиолетово-синий Окраску срезов в чашках Петри производят следующим образом.Окраска по Ван-Гизону. В срезах, окрашенных по Ван-Гизону, соединительная ткань красится в ярко-красный, остальные ткани — в желтый или серовато-желтый цвет. Ядра окрашиваются в черный или тёмно-фиолетовый цвет.Окраска Суданом III. Судан III — нейтральная азокраска, растворимая в спирте, ацетоне и жирах, не растворимая в воде. Окраску Суданом III производят для определения в срезах жиров и липидов.

Б И Л Е Т №_2__Задача. При заболевание желудочно-кишечного тракта у пациента часто наблюдается появление белого налета на верхней поверхности языка(так называемый «обложенный язык»). Объясните, какие структуры языка принимают участие в образование налета. Какую ткань необходимо взять для исследования активности этого процесса. Роговой слой нитевидных сосочков языка. На исследование возьмут эпителиальную ткань, выстилающую сосочки: многослойный плоский ороговевающий эпителий. Механизм: замедляется отторжение роговых чешуек. Задание: Организация, оснащение и документация патогистологической лаборатории.Гистологическая (патоморфологическая) лаборатория размещается в типовом или специально приспособленном помещении.Рабочие помещения лаборатории — комната, в которой производят вырезку секционного, биопсийного или экспериментального материала; рабочая комната лаборантов; комната для размещения аппаратуры и моечная.Рабочие помещения должны быть оснащены приточно-вытяжной вентиляцией.В лаборатории необходимо строго соблюдать правила противопожарной безопасности и работы с летучими и токсичными веществами.В рабочей комнате лаборанта должны быть вытяжной шкаф, химический и физический столы, шкаф и сейф для хранения химических реактивов. Лабораторная мебель, выполненная из древесины, малопригодна для работы с многими токсичными веществами, Перечень необходимого оборудования лаборатории включает технические и аналитические весы, рН-метр, микротомы (санные, ротационные, замораживающие), криостат или криокит, водяную баню, столик для расплавления парафиновых срезов, комплекты автоматических пипеток, термостаты, холодильники, микроскопы, автоматы для проводки материала и др. К документации, ведение которой является обязательным, относятся: алфавитный журнал для регистрации биопсийного и операционного материала; журнал регистрации выдачи биопсийного и журнал регистрации секционного материала; направления на патогистологическое исследование. Кроме того, у старшей сестры должны быть книги учета спирта, ядовитых химических реактивов, драгоценных металлов, медикаментов и каталог учета химических реактивов,

Б И Л Е Т №_3__Задача. В области раневой поверхности появляется большое количество клеток, содержащих первичные лизосомы, много фагосом и вторичных лизосом. Каково функциональное значение этих клеток? Защитное, они участвуют в фагоцитозе. Задание: Правила техники безопасности медицинского лабораторного техника при работе в гистологической лаборатории. У лаборанта должно быть свое рабочее место, с площадью рабочей поверхности не менее 60 х 120 см. Участок стола, предназначенный для непосредственной работы, следует сделать из влагоустойчивого материала, накрыть стеклом и расположить под ним небольшие листы белой и черной бумаги. Это создает соответствующий фон, который облегчает работу с окрашенными (белый лист) и неокрашенными (черный лист) препаратами. Хранить инструменты следует в определенном месте. Это облегчает их нахождение и экономит рабочее время.По окончании рабочего дня лаборант обязан проверить, выключены ли электроприборы, с которыми он работал.

Б И Л Е Т №_4__Задача. На судебно-медицинскую экспертизу для гистологического исследования поступил мозг погибшего человека, про которого известно, что он с раннего детства страдал центральным параличом конечностей. Какие отделы больших полушарий головного мозга необходимо исследовать и какие изменения в коре позволят подтвердить его принадлежность указанному выше человеку. На анализ следует брать материал предцентральной извилины. Слабое или нет развитие III, Y и YI слоев, которые связаны с формированием эфферентных нервных волокон. Задание: Забор, вырезка и проводка материала для гистологического исследования.Необходимый материал для проведения гистологического исследования может быть получен из любых внутренних органов и тканей больного. Путем иссечения хирургической операции (так называемая эксцизионная биопсия).При пункциях злокачественных опухолевых образований, проводимых с помощью специальных длинных иг­л различных видов и конструкций (то есть пункционная биопсия).Путем отрезания или вырезания небольших кусков ткани из удаленных внутренних органов.Путем скусывания с помощью специальных щипцов нужного количества ткани пациента в ходе эндоскопических исследований: бронхоскопии, колоноскопии и эзофагогастродуоденоскопии (щипцевая биопсия).Путем отсасывания небольшого количества материала, содержащегося в полых внутренних органах (так называемая аспирационная биопсия).Для получения наиболее правильных и достоверных результатов при выполнении гистологического исследования необходимо строго соблюдать все правила забора биологического материала у больного. биопсию тканей осуществляют при помощи очень тонкой и длинной иглы, предназначенной для внутримышечных введений. При необходимости срочного исследования проводят ускоренную фиксацию в термостате +60°С в течение 1 часа, после чего можно производить вырезку, в процессе которой материал кладут в подогретый формалин. Если вырезку решено отложить, материал сохраняют в 10% нейтральном формалине вне термостата сколь угодно долгое время. При наличии аутолиза ускоренную фиксацию проводят в термостате при темературе +37°С, продолжительность экспозиции - 1,5 - 2 часа (в зависимости от характера ткани или органа). Схема изопропанольной проводки1 50%-ный водный раствор изопропилового спирта 1 час.

2 Абсолютированный изопропанол 30 мин.

3 Абсолютированный изопропанол. 30 мин

4 Абсолютированный изопропанол 30 мин.

5 Абсолютированный изопропанол 1 час.

6 Абсолютированный изопропанол 1 час.

7 Абсолютированный изопропанол 2 час.

8 Абсолютированный изопропанол 3 час

9 Абсолютированный изопропанол 3 час.

10 Парафин. 1 час

11 Парафин. 3 час

12 Парафин 4 час. Кроме этого изопропиловый спирт наилучшим образом заменяет абсолютный этиловый спирт при обезвоживании окрашенных препаратов перед просветлением. Фабричный абсолютный спирт отечественного производства очень сложно

Б И Л Е Т №_5_Задача. Доказано, что при травмах селезенки возникающее кровотечение некогда самопроизвольно не останавливается. Именно поэтому хирургическая тактика направлена на удаление всего органа. Объясните, с особенностями строения и расположения, каких сосудов селезенки это связано. Особенность заключается в том что кроме закрытого кровоснабжения, селезенка имеет открытое-для депонирования крови, утилизации старых форменных элементов. К тому же артерии плотно срастаются с трабекулами селезенки и при повреждении не спадаются. В сумме кровотечения при повреждении не остановить. Задание: Алгоритм взятия материала на гистологическое исследование. В зависимости от того, какой орган необходимо проверить, форма взятия анализа различается: мазки, отпечатки, срезы или плёнки из тканей. Алгоритм взятия анализа должен быть точным и обязательно соблюдение всех правил исследования. После того как врач получает фрагмент ткани, его необходимо поместить в формалин или этанол, сделать тонкий срез и окрасить с помощью специальных средств. Способы окрашивания срезанных тканей также различаются. Наиболее часто используется гематоксилин и эозин. Из-за воздействия окрашивающих веществ происходит изменение цвета состава тканей. Например, гематоксилин окрашивает нуклеиновые кислоты в синий цвет, а белки с его помощью становятся красными. После выполненных процедур специалист изучает подготовленный образец с помощью электронного микроскопа на наличие болезнетворных и опасных клеток. Но существует ещё способ, как проводится гистология. В некоторых случаях срезы тканей помещают в специальный бальзам или парафин, причём полученные образцы можно хранить. А по возможности проводить исследование, используя различные микроскопы: световые, сканирующие, электронные, люминесцентные и другие. Использование фазово-контрастного микроскопа позволяет рассмотреть изображения образцов, которые невозможно заметить с использованием обычной микроскопии. Забор необходимого образца ткани происходит с использованием пункционной иглы, трепанации кости или с помощью аспирации.

Б И Л Е Т №_6__Задача. При гистологическом исследование языка взрослого человека на его верхней поверхности обнаружен вырост собственной пластинки слизистой оболочки, покрытой многослойным плоским неороговевающим эпителием с вкусовыми почками. Определите что это за сосочек, проведите сравнение с другими сосочками языка.

рибовидные –расположены поодиночке среди нитевидных на спинке, много на кончике языка Это желобовидный сосочек, так как на его верхушке расположен вырос собственной пластинки-валик, он расположен на границе корня и тела языка. Нитевидный сосочек не содержит вкусовых луковиц, листовидные - только у ребенка, у грибовидного нет выростов. Задание: Методы приготовления гистологических препаратов.

Гистологический препарат любой формы должен отвечать следующим требованиям:

сохранять прижизненное состояние структур;быть достаточно тонким и прозрачным для изучения его под микроскопом в проходящем свете;быть контрастным, то есть изучаемые структуры должны под микроскопом четко определяться;препараты для световой микроскопии должны долго сохраняться и использоваться для повторного изучения.

Эти требования достигаются при приготовлении препарата.Выделяют следующие этапы приготовления гистологического препарата.Взятие материала (кусочка ткани или органа) для приготовления препарата. При этом учитываются следующие моменты:

забор материала должен проводиться как можно раньше после смерти или забоя животного, а при возможности от живого объекта (биопсия), чтобы лучше сохранились структуры клетки, ткани или органа;забор кусочков должен производиться острым инструментом, чтобы не травмировать ткани;толщина кусочка не должна превышать 5 мм, чтобы фиксирующий раствор мог проникнуть в толщу кусочка;обязательно производится маркировка кусочка (указывается наименование органа, номер животного или фамилия человека, дата забора и так далее).

Фиксация материала необходима для остановки обменных процессов и сохранения структур от распада. Фиксация достигается чаще всего погружением кусочка в фиксирующие жидкости, которые могут быть простыми спирты и формалин и сложными раствор Карнуа, фиксатор Цинкера и другие. Фиксатор вызывает денатурацию белка и тем самым приостанавливает обменные процессы и сохраняет структуры в их прижизненном состоянии. Фиксация может достигаться также замораживанием (охлаждением в струе СО2, жидким азотом и другие).Заливка кусочков в уплотняющие среды (парафин, целлоидин, смолы) или замораживание для последующего изготовления тонких срезов.

Приготовление срезов на специальных приборах (микротоме или ультрамикротоме) с помощью специальных ножей. Срезы для световой микроскопии приклеиваются на предметные стекла, а для электронной микроскопии - монтируются на специальные сеточки.Окраска срезов или их контрастирование (для электронной микроскопии). Перед окраской срезов удаляется уплотняющая среда (депарафинизация). Окраской достигается контрастность изучаемых структур. Красители подразделяются на основные, кислые и нейтральные. широко используются (обычно гематоксилин) и кислые (эозин).

Просветление срезов (в ксилоле, толуоле), заключение в смолы (бальзам, полистерол), закрытие покровным стеклом. После этих последовательно проведенных процедур препарат может изучаться под световым микроскопом.

Срезы для электронной микроскопии используются однократно. При этом вначале интересующие объекты препарата фотографируются, а изучение структур производится уже на электронограммах.Из тканей жидкой консистенции (кровь, костный мозг и другие) изготавливаются препараты в виде мазка на предметном стекле, которые также фиксируются, окрашиваются, а затем изучаются. Из ломких паренхиматозных органов (печень, почка и другие) изготавливаются препараты в виде отпечатка органа: после разлома или разрыва органа, к месту разлома органа прикладывается предметное стекло, на которое приклеиваются некоторые свободные клетки. Затем препарат фиксируется, окрашивается и изучается.

Б И Л Е Т №_7__Задача. При изучение гистологического препарата одного из отделов пищеварительной трубки обнаружено наличие простых разветвленных трубчатых желез в собственной пластинке и альвеолярно-трубчатых слизистых желез в подслизистой оболочке. Определите: какой это отдел, какой орган пищеварительной трубки, проведите дифференциальное сравнение с другими органами, в своем строение железы. Определите: какой это отдел, какой орган пищеварительной трубки? В подслизистой основе железы имеет только двенадцатиперстная кишка. В собственной пластинке слизистой разветвленные слизистые железы имеет пилорический отдел желудка. Это переход желудка в 12-перст.

Задание: Фиксация. Приготовление фиксаторов. Простые и сложные фиксаторы. Приготовление забуференного 10% нейтрального формалина рН 7.2-7.4.

Цель фиксации - убить клетку, прекратить происходящие в ней процессы (прежде всего ферментативные) и, по возможности, сохранить ее прижизненное строение.

Существует ряд общих правил фиксации: 1) объем фиксирующей жидкости должен не менее чем в 20 раз превышать объем фиксируемого кусочка ткани; 2) фиксатор должен иметь доступ к фиксируемому материалу со всех сторон, по этому на дно сосуда кладут вату или кусочек фильтровальной бумаги или подвешивают кусочек на нитке; 3) продолжительность фиксации зависит от свойств фиксатора, прежде всего от скорости проникновения фиксатора в ткань; 4) различные фиксаторы сохраняют различные структурные и химические компоненты клетки. Большинство фиксаторов оказывает уплотняющее действие на обрабатываемый материал. Размер исследуемых кусочков должен быть таким, чтобы произошло полное его пропитывание в оптимальные для данного фиксатора сроки. В среднем для большинства фиксаторов берут кусочки толщиной 5-10 мм.Различают фиксирующие средства (простые фиксаторы)и фиксирующие смеси (сложные фиксаторы)

ПРОСТЫЕ ФИКСАТОРЫ 1.ФОРМАЛЬДЕГИД (ФОРМАЛИН)Формалин является самым дешевым и распространенным фиксатором. Применяют преимущественно в виде 10% водного раствора, для чего часть формалина (т. е. 40% раствора формальдегида) разводят 9 частями воды. Приготавливают раствор обязательно на водопроводной воде, так как дистиллированная вызывает набухание тканей.

Широкое применение формалин получил благодаря ряду свойств:

а) высокой степени диффузии;

б) способности хороню сохранять форму, окраску и структуру исследуемого объекта;

в) оказывать длительное фиксирующее действие (до нескольких лет), существенно не ухудшая при этом качество материала;

г) хорошо сохранять жиры и липоиды.

Высокая диффузионная способность и незначительное осаждающее действие позволяют формалину довольно быстро и глубоко проникать в ткани, что позволяет фиксировать кусочки органа. Срок фиксации тканей в формалине 24—48ч. Нейтрализация формалина. Примесь в формалине муравьиной кислоты придает раствору слабокислый характер, что нежелательно при применении ряда методов исследования (некоторые гистохимические реакции, серебрение раствором нитрата серебра). Способ нейтрализации формалина довольно прост: в сосуд засыпают карбонат кальция (или карбонат магния) в таком количестве, чтобы на дне образовался слой толщиной 1,5—2 см. Затем наливают формалин, несколько раз энергично встряхивают и оставляют стоять 24—48 ч. В течение этого времени происходит нейтрализация раствора.

Побочные действия формалина. Длительное хранение придает тканям чрезмерную плотность, набуханию объекта затрудняющую дальнейшую обработку и ухудшающую качество препарата. Устранить этот недостаток можно путем помещения материала на 2 недели в 1% раствор нитрата серебра или 10% раствор лимонной кислоты.

2. ЭТИЛОВЫЙ СПИРТ дорогой!!Этиловый спирт. фиксирующее действие осуществляется за счет отнятия у тканей воды и коагуляции белков. Несмотря на ряд отрицательных свойств спирта (сморщивание клеток в результате быстрого отнятия воды, этиловый спирт осуществляет быструю фиксацию, не требующую обезвоживания тканей перед заливкой в парафин и целлоидин. Будучи химически неактивным веществом, спирт особенно пригоден при гистохимических исследованиях Чаще применяют 96% и абсолютный этиловый спирт. Некоторые авторы рекомендуют также концентрации 80 и 90%. Время фиксации зависит от материала: для тонких пленок — 15—30 мин, для кусочков толщиной 3—4 мм — 2—4 ч.

Время фиксации в этиловом спирте -12-24 ч, при этом фиксатор нужно З раза сменить. Преимущества метода: быстрота, пригодность почти для всех методов окрашивания, хорошая сохранность водорастворимых элементов (гликоген, мочевая кислота).

3. АЦЕТОН. Недостаток метода — нарушение тонкой цитологической структуры. Применять следует бесцветный (безводный) раствор. Фиксировать можно как кусочки тканей так и срезы. Приготовленные в криостате срезы расправляют кисточкой на предметном стекле, переносят в плотно закрытый стаканчик с холодным (5—10%). Срок фиксации зависит от толщниы срезов (в среднем 5—10 мин можно хранить и несколько дней).СЛОЖНЫЕ ФИКСАТОРЫ

Жидкость Мюллера.

В настоящее время применение ее в чистом виде ограничено. Однако она служит исходным раствором для приготовления таких распространенных фиксаторов, как жидкости Ценкера, Орта, Максимова и др.Состав:Бихромат калия 2,5 гСульфат натрия 1,0 г.Вода дистиллированная 100 мл.

Состав:Первый раствор- Спирт этиловый 96%-100 мл., Нитрат меди-1,8 г., Нитрат кальция-0,9г., Формалин нейтральный-10 мл.

Второй раствор - Спирт этиловый 96%-100 мл., Нитрат кадмия-2,6 г., Формалин нейтральный -10 мл.

Кусочки органа (не более З х З мм) фиксировать З ч в первом растворе, затем перенести во второй раствор на З ч. Промыть в трех-четырех сменах 70% спирта по 2 ч. Залить в парафин или целлоидин.

Б И Л Е Т №_8__Задача. При биопсии яичника у пациента М., 26 лет в гистологическом срезе в корковом веществе обнаружено крупное овальной формы образование, центральная часть которого представлена соединительно-тканным рубцом. Что это за образование, какое его происхождение, и основные функции. Белое тело, бывшие желтые тела. Образуется соединительно-тканный рубец. Гормоны не вырабатывает, со временем рассасывается Задание: Промывание и обезвоживание материала. Приготовление гистологической батареи. Цель этой процедуры — освободить исследуемый объект от излишнего количества фиксатора. Способ промывания зависит от методики фиксации. Например, после фиксирующих смесей, содержащих пикриновую кислоту, дихлорид ртути, трихлоруксусную кислоту, применяют этиловый спирт разной концентрации. После фиксации в формалине, в жидкостях, содержащих хром, осмиевую кислоту, обычно употребляют воду. В большинстве случаев промывку кусочков тканей производят в проточной водопроводной воде. Наиболее удобно это делать, помещая объект в стеклянные или фарфоровые сита, которые закрывают пробкой и опускают в сосуд с проточной водой. Пробка обеспечивает плавучесть, а отверстия - постоянную циркуляцию воды. Если кусочек не прошит ниткой, то этикетку также помещают в сито. нему несильную струю воды. Среднее время промывание 20—24 ч.Обезвоживание

банки с завинчивающейся крышкой) этикетируют их и заливают спиртами: 50, 60, 70, 80 и 96% (по два стаканчика), 100% (два стаканчика). Такой последовательный ряд сосудов получил название гистологической батареи.Спирты нужной крепости приготавливают заранее по специальной таблице разведения из 96 или 95 % этилового спирта

Способ приготовления абсолютного этилового спирта.

Обычный спирт-ректификат содержит 96% чистого спирта и 4% воды. Для того чтобы получить абсолютный спирт, необходимо извлечь воду. Наиболее распространенным способом является обезвоживание при помощи прокаленного медного купороса (сульфат меди).В процессе, обезвоживая, могут быть допущены ошибки:

1) переуплотнение при полном обезвоживании;

2) нормальное уплотнение при недостаточном обезвоживании.

Обезвоживание в изопропаноле (2-ПРОПАНОЛ)Обезвоживание тканей возможно с помошью 99% изопропилового спирта,

Изопропиловый спирт и его применений в гистологической технике

Изопропиловый спирт (изопропанол) может служить заменителем этилового спирта (этанола) во многих областях его применения. Можно предложить следующую схему обезвоживания препаратов после окрашивания:

1. 100°этиловый спирт

2. Изопропиловый спирт

3. Смесь 1:1 изопропилового спирта и ксилола

4. Ксилол или заменитель I

5. Ксилол или заменитель II

Заключение в полистерол или другую синтетическую среду.

Б И Л Е Т №_9__Задача. При обследование пациента М., 32 лет в мазке крови, окрашенном эозином, среди лейкоцитов 21% составляют клетки диаметром 18-20 мкм, имеющие ядро бобовидной формы, занимающее около 1/3 площади слабобазофильной цитоплазмы, не содержащей специфической зернистости. Дайте оценку полученным данным: что это за клетки, соответствуют ли их содержание в крови нормальным показателям, какие функции они выполняют в крови, при каких состояниях может изменяться их количество. Моноциты. В крови 3-11%. Функции: Защитная путем фагоцитоза и переваривания микроорганизмов, инородных частиц и продуктов ра-пада собственных тканей. Вырабатывают противовирусный белок интерферон и противомикробный белок лизоцим; В пирогены (в-вы повыш t тела); 1е звено имунного ответа (антигенпрезентирующая клетка); В организм человека введён чужеродный белок. Повышение свидетельствует о инфекционных вирусных заболеваниях, различных воспалительных и гнойных процессах (артриты, энтериты, туберкулез)
Задание: Техника удаления остатков спирта и ксилола (хлороформа, толуола) из исследуемого материала.Для удаления спирта и подготовки к пропитыванию парафином материал обрабатывают одним из растворителей парафина, обладающим способностью вытеснять спирт. К таким веществам относятся хлороформ, бензол, толуол, ксилол, сероуглерод и др. Чаще используют хлороформ и бензол. Толуол и ксилол делают кусочки более твердыми.Обезвоженные и уплотненные кусочки перекладывают из абсолютного спирта в смесь абсолютного спирта и О-ксилола (1:1) на 2-3 ч, а затем в чистый ксилол, где они вначале плавают (выступая над его поверхностью), а затем по мере пропитывания постепенно погружаются.В процессе удаления спирта ксилол меняют 2-3 раза на протяжении 1-3 ч (в зависимости от свойств объекта и толщины кусочков). При величине кусочка 1 х 1 см его держат в ксилоле 30 мин. Затем, соблюдая принцип постепенного замещения ксилола парафином, помещают объект в смесь из равных частей парафина (желательно мягкого) и ксилола. Эта смесь, застывающая при комнатной температуре, при нагревании до 37°С расплавляется и приобретает жидкую консистенцию.

Б И Л Е Т №_10_Задача. При обследование пациента М., 37 лет в мазке крови обнаружено, что среди ядерных клеток 25% составляют клетки 18-20 мкм в диаметре со слабо базофильной цитоплазмой, не содержащей специфической зернистости и светлым ядром бобовидной формы. Какие это клетки? Макрофаги Данная клетка является предшественником макрофагов, обладающих высокой фагоцитирующей способностью. Норма содержания в крови 3-11%. Повышение свидетельствует о инфекционных вирусных заболеваниях, различных воспалительных и гнойных процессах (артриты, энтериты, туберкулез).

Задание: Забор, вырезка и проводка материала для гистологического исследования

Необходимый материал для проведения гистологического исследования может быть получен из любых внутренних органов и тканей больногоПутем отрезания или вырезания небольших кусков ткани из удаленных внутренних органов.

Путем скусывания с помощью специальных щипцов нужного количества ткани пациента в ходе эндоскопических исследований: бронхоскопии, (щипцевая биопсия).

Путем отсасывания небольшого количества материала, содержащегося в полых внутренних органах могут быть получены как в ходе оперативного вмешательства, к

При необходимости срочного исследования проводят ускоренную фиксацию в термостате +60°С в течение 1 часа, после чего можно производить вырезку, в процессе которой материал кладут в подогретый формалин. Если вырезку решено отложить, материал сохраняют в 10% нейтральном формалине вне термостата сколь угодно долгое время. При наличии аутолиза ускоренную фиксацию проводят в термостате при темературе +37°С, продолжительность экспозиции - 1,5 - 2 часа Кроме этого изопропиловый спирт наилучшим образом заменяет абсолютный этиловый спирт при обезвоживании окрашенных препаратов перед просветлением.

Б И Л Е Т №_11__Задача. В 1872 г. итальянский анатом Камилло Гольджи зафиксировал ткань в растворе бихромата калия, затем опустил его в раствор нитрата серебра и на срезах увидел …… что? Так в условиях импровизированной в кухне маленькой лаборатории было сделано открытие, ставшее революционным в изучение нервной ткани. Метод окраски называется импрегнацией серебром, выявляет нервные и глиальные клетки, нервные волокна. Задание: Как называется данная методика исследования? Задача.

Биопси́я (от др.-греч. βίος — жизнь + ὄψις — внешний вид) — метод исследования, при котором проводится прижизненный забор клеток или тканей (биоптата) из организма с диагностической или исследовательской целью. Биопсия является обязательным методом подтверждения диагноза при подозрении на наличие онкологических заболеваний.

Б И Л Е Т №_12__Задача. При гистологическом исследований крупной слюнной железы у пациента М., 17 лет в ней обнаружены три секреторных отдела: белковые, слизистые и смешанные. Преобладают слизистые клетки. Какакие это железы? (ОКОЛОУШНЫЕ, ПОДНИЖНЕЧЕЛЮСТНЫЕ, ПОДЪЯЗЫЧНЫЕ)

Задание: Пропитывание и заливка материала в парафин.тонких срезов с исследуемого объекта. Для того чтобы их получить, кусочки тканей надо пропитать и залить такой средой, которая превратила бы их в хорошо режущуюся массу. являются парафин. ЗАЛИВКА В ПАРАФИН благодаря относительной быстроте заливки (в течение 1—2 дней после обезвоживания), возможности приготовления серийных срезов, а также тонких срезов для цитологических исследований (толщина 2—3 мкм неудобство представляет необходимость удаления парафина из срезов перед их окраской. Парафин при комнатной температуре — твердое гомогенное вещество. Существует несколько сортов парафина: мягкие (точка плавления 45-54С) и твердые точка плавления 58-60С).

В большинстве случаев для заливки применяют парафин с точкой плавления 54-56"С.Если резка предполагается при низкой температуре окружающей среды, то лучше применять парафин с более низкой точкой плавления (48—50°С). Нужная степень твердости парафина достигается смешиванием в различных комбинациях мягких и твердых сортов..

Парафин не растворяется в воде, но растворяется в большинстве органических растворителей: бензине, эфире, жирных и эфирных маслах. Температура плавления 45-52С, температура кипения 350С. Состав включает в себя компоненты, которые значительно улучшают пропитывание тканей. Обеспечивает получение качественных срезов до 4 мкм, в том числе в сериях. Срезы легко расправляются и хорошо прилипают к стеклу.

Б И Л Е Т №__13_Задача. При изучение гистологического препарата одного из отделов пищеварительной трубки в подслизистой основе обнаружены концевые отделы желез. Какие отделы и органы пищеварительной трубки могут быть представлены в препарате? Что требуется дополнительно исследовать для более точного определения органа? 12-перстная. Точное определение: ворсинки: они короткие и широкие, выстланы однослойным призматическим каемчатым эпителием. Задание: Пропитывание материала парафином. Обезвоженные и уплотненные кусочки перекладывают из абсолютного спирта в смесь абсолютного спирта(этанол или изопропанол) и О-ксилола (1:1) на 2-3 ч, а затем в чистый ксилол, где они вначале плавают (выступая над его поверхностью), а затем по мере пропитывания постепенно погружаются.В процессе удаления спирта ксилол меняют 2-3 раза на протяжении 1-3 ч (в зависимости от свойств объекта и толщины кусочков). При величине кусочка 1 х 1 см его держат в ксилоле 30 мин. Затем, соблюдая принцип постепенного замещения ксилола парафином, помещают объект в смесь из равных частей парафина (желательно мягкого) и ксилола. Эта смесь, застывающая при комнатной температуре, при нагревании до 37°С расплавляется и приобретает жидкую консистенцию. Кусочки находятся в ксилоле - парафине при 37°С в течение 3-6 ч Парафин для пропитывания можно применять многократно, но при этом нужно строго следить за тем, чтобы не перепутать порции парафина.

Б И Л Е Т №__14_Задача. При изучение гистологического препарата одного из отделов пищеварительной трубки обнаружен однослойный однорядный призматический эпителий, покрывающий ворсинки и крипты органа. Какой отдел и органы пищеварительной трубки могут быть представлены в препарате? Ворсинки и крипты, выстланные однослойным однорядным призматическим каемчатым эпителием имеет только тонкая, 12-перстная, толстая кишка. Дополнительно следует изучить подслизистую основу: при наличии в ней концевых отделов сложных слизистых желез, можно сделать вывод, что это 12-перстная. Слизистая: одиночные лимфатические фолликулы в рст свидетельствуют об тощей кишке. Толстая-крипты. Задание: Заливка материала в парафин в заливочном центре или ручным способом. После окончательного пропитывания объекта его заливают расплавленным парафином, специально приготовленным для этих целей и хранящимся в термостате. В качестве формочек Угольники кладут на отполированную металлическую или стеклянную пластину и, сдвигая углы, создают формочку нужных размеров.Бумажные коробочки. Применяют также фольгу, Заливку осуществляют следующим образом. Предназначенный для заливки парафин подогревают до 58—60°С и аккуратно наливают в приготовленную формочку, заполняя ее до самых краев и избегая образования пузырьков воздуха Затем подогревают пинцет или металлический шпатель, быстро переносят подготовленный заливке объект в формочку После этого формочку охлаждают водой (10—18°СЕсли заливку производят с помощью металлических угольников, то пластину помещают в плоскую чашку таким образом, чтобы нижняя ее поверхность не соприкасалась с дном сосуда (на стеклянные или металлические палочки). Затем осторожно наливают воду до верхних краев и дают парафину застыть. При заливке в бумажной коробочке ее постепенно опускают в сосуд с водой и оставляют плавать до полного застывания парафина.Для этого из затвердевшего парафина скальпелем вырезают четырехугольный блок таким образом, чтобы объект со всех сторон был окружен слоем парафина толщиной 1-3 мм. Затем, положив на деревянный кубик небольшой кусочек твердого парафина, расплавляют его горячим металлическим скальпелем проводят этим же шпателем по нижней поверхности парафинового блока и быстро придавливают его к кубику.

Б И Л Е Т №__15_Задача. При изучении гистологического препарата биопсии одного из отделов пищеварительной трубки обнаружен только фрагмент слизистой оболочки с однослойным однорядным призматическим каемчатым эпителием. Другие структуры в материал биопсии не попали. Что требуется дополнительно исследовать для более точного определения органа? Ворсинки и крипты, выстланные однослойным однорядным призматическим каемчатым эпителием имеет только тонкая, 12-перстная, толстая кишка. Дополнительно следует изучить подслизистую основу: при наличии в ней концевых отделов сложных слизистых желез, можно сделать вывод, что это 12-перстная. Слизистая: одиночные лимфатические фолликулы в рст свидетельствуют об тощей кишке. Толстая-крипты Задание: Нарезание и наклеивание парафиновых блоков. Резание Наклеенный на деревянную колодку парафиновый блок прочно закрепляют в зажиме микротома, расположив длинной осью параллельно длиннику микротома. Затем, установив необходимый угол резания и правильный угол наклона ножа, его прочно закрепляют винтовыми зажимами и располагают над блоком. После этого устанавливают микрометрическую шкалу на нужную толщину среза и приступают к окончательной резке материала. перемещение ножевых салазок вдоль рельсового пути нужно производить плавно и без излишних усилий. Движение микротомным ножом в момент прохождения над блоком надо производить быстро.Правильно залитые небольшие кусочки органов и тканей при оптимальном температурном режиме в помещении режутся хорошо, и срез, как правило, ложится на нож в расправленном состоя Готовый срез осторожно снимают с ножа влажной кисточкой и переносят либо на подготовленное предметное стекло, либо в чашку с теплой (35—40°С) дистиллированной водой. При резке надо следить, чтобы волоски от кисточки не попадали под режущий край ножа, так как это приводит к повреждению лезвия. Для ряда исследований необходимо получение серийных срезов. Очень важно не перепутать очередность серийных срезов при наклеивании на предметное стекло. Для этого ленту срезов разрезают скальпелем на отдельные фрагменты длиной около 3/4 предметного стекла и укладывают всегда в определенном порядке вдоль или поперек стекла. Наклеивание.Существует несколько методов наклеивания срезов, но наиболее широко распространено приклеивание при помощи белка с глицерином.

Б И Л Е Т №_16__Задача. При гистологическом исследований крупной слюнной железы у пациента М., 17 лет в ней обнаружены три секреторных отдела: белковые, слизистые и смешанные. Преобладают слизистые клетки. Какие это железы? (ОКОЛОУШНЫЕ, ПОДНИЖНЕЧЕЛЮСТНЫЕ, ПОДЪЯЗЫЧНЫЕ)

Задание: Микротом и работа с ним. Приготовление гистологических срезов. Метод замораживания тканей. Микротом — специальное механическое устройство, предназначенное для приготовления гистологических срезов определенной толщины.

Санный и полуавтоматические Прибор получил название благодаря тому, что нож и механизм подачи с зажимом для блока (объектодержателем) движутся на специальных салазках. Фиксирование на нужном уровне производят специальной рукояткой.

Так как с каждым срезом блок поднимается все выше, то периодически нужно отсоединять микровинт от разъемной гайки и опускать салазки с механизмом подачи в крайнее нижнее положение.

Помимо описанной конструкции микротома, существуют и другие. Имеются также варианты способа подачи блоков и устройства зажимов для них. Однако, несмотря на существующее разнообразие моделей микротомов, все они имеют общие принципы устройства, знание которых позволит успешно освоить их эксплуатацию. Для получения гистологических срезов применяют специальные микротомные ножи, различающиеся по форме, длине и углу сечения лезвия. Точка ножеййййййй

Одно разов затем лезвие меняют. Замораживание ткани при изготовлении гистологических препаратов производится на замораживающем микротоме с применением жидкой, углекислоты, эфира, хлор-этилена или электрическим током на столике из полупроводников.При помощи замораживания удается быстро изготовить гистологические препараты.

Б И Л Е Т №_17__Задача. При гистологическом исследование крупной слюнной железы пациентки Ю., 17 лет обнаружен только один секреторный отдел- альвеолярные секреторные отделы из клеток, вырабатывающих серозный секрет. Какая это железа? трубчато-альвеолярная железа

Задание: Микротомные ножи, подготовка их к работе. Для получения гистологических срезов применяют специальные микротомные ножи, различающиеся по форме, длине и углу сечения лезвия сменные или одноразз По Металлическое магнитное лезвие (одноразовый нож)позволяет получить срезы с 50-60 парафиновых блоков, затем лезвие меняют. ЗАТОЧКА МИКРОТОМНЫХ НОЖЕЙ с помощью микротомного ножа, толщина лезвия которого должна быть от 3 до 5 мкм. Для работы на замораживающем микротоме необходимо иметь острый нож без зазубрин на лезвии. Нож необходимо своевременно точить, а перед каждой резкой объектов проверять на микроскть.

Микротомные ножи затачивают с помощью специальных аппаратов,Вручную микротомные ножи точат на камне Перед заточкой на поверхность камня наносят машинное масло или керосин, глицерин, разведенный 70 % спиртом (1:1), мыльную воду.

Б И Л Е Т №_18__Задача. При обследование пациента М., 37 лет в мазке крови обнаружено, что среди ядерных клеток 25% составляют клетки 18-20 мкм в диаметре со слабо базофильной цитоплазмой, не содержащей специфической зернистости и светлым ядром бобовидной формы. Какие это клетки? Моноциты. В крови 3-11%. Функции: Защитная путем фагоцитоза и переваривания микроорганизмов, инородных частиц и продуктов ра-пада собственных тканей. Вырабатывают противовирусный белок интерферон и противомикробный белок лизоцим;В пирогены (в-вы повыш t тела); 1е звено имунного ответа (антигенпрезентирующая клетка); В организм человека введён чужеродный белок. Повышение свидетельствует о инфекционных вирусных заболеваниях, различных воспалительных и гнойных процессах (артриты, энтериты, туберкулез) Задание: Подготовка предметных стекол для гистологических срезов. Предметные стекла, применяемые для получения гистологических препаратов, необходимо предварительно подготовить. 1. Мойка в тёплой мыльной воде или кипятят 2-3% растворе гидрокарбоната натрия. 2. Ополаскивают горячей водой.3. Промывают проточной водой несколько часов. 4. Протирают тканью 5. Обезжиривание: помещают на несколько суток в смесь Никифорова:эфир+96%спирт. соляной кислоты Контроль: капля воды по обезжиренному стеклу расходится тонким слоем, а не собирается каплей. Извлекают пинцетом, протирают и складывают в коробочку.

Б И Л Е Т №_19__Задача. При обследовании пациента Т., 18 лет в мазке крови, окрашенном азур-эозином, среди лейкоцитов 65% составляют клетки диаметром 10- 12 мкм, ядра состоят из 3-4 сегментов, цитоплазма содержит пылевидную фиолетово-розовую специфическую зернистость. Дайте оценку полученным данным: что это за клетки? Сегментоядерные нейтрофилы. В крови 47-72%; Ф: спец: лизоцим-антимикробное, лактофферин-связывает Fe, лактопероксидаза-бактериальная активность. Неспец-лизосомальный фермент-макрофаги! Увеличение свидетельствует об бактериальных инфекциях (гнойных). Задание: Показания к методу замораживания тканей. Работа с замораживающим микротомом и криостатом.. ПОРЯДОК РАБОТЫ. Микрогайку микротома установите в крайнее верхнее положение.. Лимб микротома установите в положение соответствующее для получения необходимой толщины срезов. Подготовьте объектодержатели, которые будут использованы в работе, для примораживания объектов и установите их в контейнер, подвешенный на трубке испарителя. Внесите в камеру все необходимые приспособления для получения срезовЛюки для рук плотно закройте диафрагмами Установите на датчике-реле температуры необходимый температурный режим и проследите за достижением заданной температуры воздуха в камере аппарата. Кусочки ткани, подлежащие резанию на микротоме, приморозьте к объектодержателям. Объектодержатель с исследуемой тканью установите на рычаге микротома. Внесите в камеру нож, установите его в ножедержатель и зафиксируйте замком.. На свободный конец ножа оденьте защитную оправу и закрепите ее. Установленный на рычаге объектодержатель приблизьте к ножу так, чтобы кусочек ткани касался ножа, и зафиксируйте замком. Можно приступать к резанию ткани.. В случае применения углекислоты для охлаждения ножа, подсоедините баллон с углекислотой с помощью гибкого шланга штуцеру, расположенному на правой боковой стенке камеры. Закройте кран узла подачи углекислоты на нож и приоткройте вентиль баллона. Перед производством среза охлаждайте нож. После окончания работы снимите нож и вынесите его из камеры, закройте вентиль баллона с углекислотой, вынесите из камеры использованные объектодержатели и лоток с неиспользованными срезами. Использованные объектодержатели продезинфицируйте и установите в контейнере, подвешенном к трубке испарителя в рабочей камере аппарата. Удалите из лотка неиспользованные срезы, протрите его и установите на микротоме.

Б И Л Е Т №_20__Задача. При гистологическом исследование языка взрослого человека на его верхней поверхности обнаружен вырост собственной пластинки слизистой оболочки, покрытой многослойным плоским неороговевающим эпителием с вкусовыми почками. Определите что это за сосочек, проведите сравнение с другими сосочками языка. Это желобовидный сосочек, так как на его верхушке расположен вырос собственной пластинки-валик, он расположен на границе корня и тела языка. Нитевидный сосочек не содержит вкусовых луковиц, листовидные - только у ребенка, у грибовидного нет выростов. Задание: Приготовление гистологических срезов на санном и ротационном микротомах. Оснащение: санный микротом, препаровальная игла, кисточка для снятия срезов, парафиновые блоки Алгоритм действий:Фиксировать блок в объектодержателе так, чтобы длинная ось блока располагалась вдоль длинной оси микротома, а поверхность была горизонтальной. Установить лезвие/нож под углом 13-15 градусов Медленно подвести лезвие/нож к блоку При помощи макровинта регулировать высоту расположения блока до соприкосновения с ножом Установить микрометрическую шкалу на получение толстых срезов (20-25 мкм) Движением лезвия/ножа срезать верхний слой парафина и выровнять поверхность блока до тех пор, пока не начнут получаться первые полные срезы. Перевести микрометрическую шкалу на получение тонких срезов (6-8 мкм) Изготовить необходимое количество парафиновых срезов Алгоритм действий:

1.Парафиновый блок закрепить в объектодержателе

2.Закрепить нож под углом 7-9 градусов

3.Перевести объектодержатель в среднее положение (на уровне лезвия ножа)

4.Подвести нож до соприкосновения с объектом

5.Установить микрометрическую шкалу на 20 мкм

6.Выровнять поверхность блока до тех пор, пока не начнут получаться первые полные срезы

Б И Л Е Т №_21__Задача. При обследование пациента Т., 18 лет в мазке крови, окрашенном азур-эозином, среди лейкоцитов 65% составляют клетки диаметром 10- 12 мкм, ядра состоят из 3-4 сегментов, цитоплазма содержит пылевидную фиолетово-розовую специфическую зернистость. Дайте оценку полученным данным: что это за клетки, соответствуют ли их содержание в крови нормальным показателям, какие функции они выполняют в крови, при каких состояниях может изменятся их количество. Сегментоядерные нейтрофилы. В крови 47-72%; Ф: спец: лизоцим-антимикробное, лактофферин-связывает Fe, лактопероксидаза-бактериальная активность. Неспец-лизосомальный фермент-макрофаги! Увеличение свидетельствует об бактериальных инфекциях (гнойных). Задание: Приготовление гистологических срезов на замораживающем микротоме и криостате. Замораживающие микротомы используют для резки не залитых, но фиксированных объектов, материала, залитого в желатин и водорастворимые пластмассы. замораживающие микротомы для изготовления препаратов при исследовании материала срочных биопсий. По своей конструкции замораживающие микротомы относятся к микротомам санного типа, но в их устройстве есть некоторые особенности. Станина имеет приспособление для крепления к столу. Нож устанавливают под нужным углом в подвижной ручке с помощью одного или двух зажимов. Автоматическая подача осуществляется при каждом размахе ручки с ножом через систему рычагов. Замораживающий столик снабжен приспособлением для подачи углекислоты или охлаждается термоэлектрически с помощью полупроводниковых элементов. Криостаты, вибратомы. Криостат — специализированная холодильная камера с установленным в ней микротомом, в которой имеются отверстия для рук, люминесцентная лампа и смотровое стекло. Надежная изоляция позволяет поддерживать в криостате температуру от -5 до -25 °С. Отрицательными моментами при работе с криостатом являются значительное переохлаждение рук оператора, недостаточная освещенность рабочего поля, а также невозможность ориентировать объект относительно кромки ножа.

Б И Л Е Т №_22__Задача. При гистологическом исследование языка взрослого человека на его верхней поверхности обнаружен вырост собственной пластинки слизистой оболочки, покрытой многослойным плоским неороговевающим эпителием с вкусовыми почками. Это желобовидный сосочек, так как на его верхушке расположен вырос собственной пластинки-валик, он расположен на границе корня и тела языка. Нитевидный сосочек не содержит вкусовых луковиц, листовидные - только у ребенка, у грибовидного нет выростов. Задание: Общие принципы и методы окрашивания гистологических препаратов. В основе окрашивания клеток и тканей лежат физико-химические процессы (диффузия, адсорбция, абсорбция, растворимость и др Целью окрашивания является более отчетливое выявление различных компонентов клеток и тканей. например гематоксилин окрашивает ткань в присутствии солей металлов. В гистологической практике применяют основные, кислотные и нейтральные красители. К ним относятся гематоксилин, тионин, кармин, метиловый зеленый и др. Кислотные красители — это кислоты или их соли, с помощью которых выявляют вещества и структуры основной природы (цитоплазматические структуры клеток, эритроциты и т.д.). Таковыми являются эозин, кислый фуксин, Конго красный (конгорот), эритрозин. Нейтральные красители: судан III, судан IV, метиленовый синий. Окрашивание одним красителем - простое, а при использовании нескольких красителей — сложное.Перед приготовлением нужно внимательно осмотреть реактивы, так как возможны изменение цвета, окисление, кристаллизация. Для хранения красителей и проведения окраски применяют химически чистую маркированную посуду.

Б И Л Е Т №_23__Задача.При изучение гистологического препарата одного из отделов пищеварительной трубки в подслизистой основе обнаружены концевые отделы желез. Какие отделы и органы пищеварительной трубки могут быть представлены в препарате? 12-перстная. Точное определение: ворсинки: они короткие и широкие, выстланы однослойным призматическим каемчатым эпителием.(Железы в подслизистой – пищевод-секреторные отделы слизисто-белковых желез) Задание: Депарафинирование: цели и техника. Для парафиновых срезов такой подготовкой является удаление парафина — депарафинирование. При депарафинировании срезы держат в ксилоле 1 и II, а также в спиртах по 2—3 мин, в йодистом спирте и тиосульфате натрия 10 мин. Далее следует промывка в дистиллированной воде (после тиосульфата натрия — в нескольких порциях воды. Методика окрашивания срезов гематокси-лин-эозином. Замороженные срезы перед окрашиванием следует обезжирить, поместив их на 20—30 мин или на ночь в 96% спирт. Далее срезы переносят в дистиллированную воду. Батарея депарафинирования включает высокие бюксы или биологические стаканчики, содержащие две порции ксилола- ксилол I и ксилол II, абсолютный спирт 96% спирт, 70% спирт и стаканчик для воды.

Б И Л Е Т №_24__Задача. При изучение гистологического препарата одного из отделов пищеварительной трубки обнаружен однослойный однорядный призматический эпителий, покрывающий ворсинки и крипты органа. Какой отдел и органы пищеварительной трубки могут быть представлены в препарате? Ворсинки и крипты, выстланные однослойным однорядным призматическим каемчатым эпителием имеет только тонкая, 12-перстная, толстая кишка. Дополнительно следует изучить подслизистую основу: при наличии в ней концевых отделов сложных слизистых желез, можно сделать вывод, что это 12-перстная. Слизистая: одиночные лимфатические фолликулы в рст свидетельствуют об тощей кишке. Толстая-крипты

Задание: Утилизация отработанного материала, дезинфекция использованной лабораторной посуды, инструментария, средств защиты. И хранениее 3 год Архивирование оставшегося после исследования материала. Система утилизации медицинских отходов включает в себя следующие этапы: сбор внутри организаций, осуществля перемещение из подразделений и временное хранение на территории организации; дезинфекция обеззараживание / обезвреживание медицинских отходов; транспортирование с территории организации; захоронение или уничтожение медицинских отходов. Дезинфекция медицинских отходов перед утилизацией

Отходы Класса А удаляются путем сброса в мусоропровод и в систему городской канализации. Дезинфекции подвергаются контейнеры не реже одного раза в неделю, профилактическая дезинфекция стволов трубопроводов проводится не реже одного раза в месяц. Класса Б подлежат обязательному обеззараживанию обезвреживанию физическим или химическим методом. В случае отсутствия участка или централизованной системы обезвреживания медицинских отходов, Класса Б проводится ежедневно. Для отходов Класса В химические методы дезинфекции применяются для обеззараживания пищевых отходов и выделений больных, а также при организации первичных противоэпидемических мероприятий в очагах. Химический метод обеззараживания отходов Класса Б и В, включающий воздействие растворами дезинфицирующих средств, обладающих бактерицидным (включая туберкулоцидное), вирулицидным, фунгицидным (спороцидным –Обработке дезинфицирующими средствами подвергается также транспорт для перевозки необеззараженных отходов класса Б.

Б И Л Е Т №_25__Задача. При изучении гистологического препарата биопсии одного из отделов пищеварительной трубки обнаружен только фрагмент слизистой оболочки с однослойным однорядным призматическим каемчатым эпителием. Другие структуры в материал биопсии не попали. Что требуется дополнительно исследовать для более точного определения органа? Ворсинки и крипты, выстланные однослойным однорядным призматическим каемчатым эпителием имеет только тонкая, 12-перстная, толстая кишка. Дополнительно следует изучить подслизистую основу: при наличии в ней концевых отделов сложных слизистых желез, можно сделать вывод, что это 12-перстная. Слизистая: одиночные лимфатические фолликулы в рст свидетельствуют об тощей кишке. Толстая-крипты Задание: Окрашивание гистологических срезов с обзорными целями (окраска гематоксилин-эозином). Эта методика наиболее часто применяется Этим методом можно окрашивать целлоидиновые срезы, депарафинированные, парафиновые или замороженные срезы. Замороженньие срезы перед окрашиванием следует обезжирить, поместив их на 20-3О мин или на ночь в 96% спирт. Далее срезы переносят в дистиллированную воду. Целлоидиновые срезы переносят из одного бюкса в другой с помощью препаровальной иглы с загнутым концом. Депарафинированные и замороженные срезы можно окрашивать на предметном стекле, наливая или сливая соответствующие растворы Порядок окрашивания срезов гематоксилин-эозином следующий:1) срезы переносят в дистиллированную воду;2) окрашивают гематоксилином Эрлиха 2-5 мин;3) промывают в дистиллированной воде;4) затем промывают в водопроводной воде 3-5 мин;5) осуществляют контроль под микроскопом;6) дифференцируют 1% раствором хлористоводородной кислоты в 70° спирте 1—2 с; 7) быстро переносят срезы в водопроводную воду на 30 мин при частой смене; в водопроводной воде вишневая окраска ядер сменяется синей; 8) осуществляют контроль под микроскопом; если хроматин и ядрышко видны недостаточно четко, то дифференцировку следует повторить 9) промывают в дистиллированной воде;10) 1% водный раствор эозина 0,5-1 мин; 12) проводят обезвоживание, осветляют в ксилоле, заключают в бальзам. В спиртах эозин также отмывается, так что проводить срезы по спиртам следует быстро.