Полезное:
Как сделать разговор полезным и приятным
Как сделать объемную звезду своими руками
Как сделать то, что делать не хочется?
Как сделать погремушку
Как сделать так чтобы женщины сами знакомились с вами
Как сделать идею коммерческой
Как сделать хорошую растяжку ног?
Как сделать наш разум здоровым?
Как сделать, чтобы люди обманывали меньше
Вопрос 4. Как сделать так, чтобы вас уважали и ценили?
Как сделать лучше себе и другим людям
Как сделать свидание интересным?
Категории:
АрхитектураАстрономияБиологияГеографияГеологияИнформатикаИскусствоИсторияКулинарияКультураМаркетингМатематикаМедицинаМенеджментОхрана трудаПравоПроизводствоПсихологияРелигияСоциологияСпортТехникаФизикаФилософияХимияЭкологияЭкономикаЭлектроника
|
Среды обогащенияЖелчный бульон. Применяют в качестве среды обогащения для сальмонелл, выделяемых из крови или материалов, не содержащих или содержащих в незначительных количествах другие виды бактерий. Желчь крупного рогатого скота наливают в колбу и нагревают 1 ч текучим паром. После отстаивания фильтруют через ватно-марлевый фильтр и стерилизуют текучим паром 3 дня по 30 мин. К 800 см3 МПБ добавляют 200 см3 желчи, разливают по пробиркам и стерилизуют текучим паром 3 дня по 30 мин. Среда Мюллера. Используют для накопления сальмонелл. К 4,5 г простерилизованного сухим жаром химически чистого мела (СаС03) добавляют 90 см3 МПБ или бульона Хоттингера и стерилизуют 30 мин при 121 ° С. Перед посевом к бульону асептически добавляют Среда Кауфмана. Используют для накопления сальмонелл. К 100 см3 стерильной среды Мюллера асептически добавляют 5 см3 стерильной желчи (желчь стерилизуют дробно, текучим паром 3 дня подряд по 20 мин) и 5 см3 0,1%-ного водного раствора бриллиантового зеленого. Разливают по пробиркам. Не стерилизуют. Среда Киллиана. Используют для накопления сальмонелл. К 100 см3 стерильного МПБ или бульона Хоттингера (рН 6,7-6,9) непосредственно перед применением добавляют 1 см3 0,1%-ного водного раствора бриллиантового зеленого. Селенитовая среда. Используют для накопления сальмонелл. Для приготовления используют два раствора. Раствор 1. К 950 см3 раствора фосфатов (натрия гидрофосфат безводный — 7 г, натрия дигидрофосфат безводный — 3 г) на дистиллированной воде добавляют 5 г пептона и 4 г лактозы. Разливают во флаконы по 50 см3 и стерилизуют текучим паром Раствор 2. В 40 см3 стерильной дистиллированной воды растворяют В каждый флакон с 50 см3 раствора 1 асептически добавляют 2 см3 раствора 2, перемешивают и разливают по пробиркам. Магниевая среда. Используют для накопления сальмонелл. Для приготовления используют два раствора. Раствор 1. К 890 см3 дистиллированной воды добавляют 4,2 г пептона, 7,15 г натрия хлорида, 1,43 г калия дигидрофосфата (KH2PO4 и 9 см3 дрожжевого автолизата. Раствор 2. В 90 см3 дистиллированной воды растворяют 35,7 г магния хлорида (MgCl2 х 6Н20). Растворы смешивают и добавляют 0,9 см3 0,5%-ного водного раствора бриллиантового зеленого. Разливают по пробиркам и стерилизуют 30 мин при 112° С. Среда Минка. Используют для накопления эшерихий, обладающих адгезивными антигенами. Раствор 1 (фосфатный буферный раствор рН 7,5). Берут 1,36 г калия фосфорнокислого однозамещенного (КН,Р04), 10,1г натрия фосфорнокислого двузамещенного (Na2HP04 x 7Н20) и растворяют в дистиллированной воде до конечного объема 1000 см3. Стерилизуют Раствор 2. 10 г магния сульфата (MgS04 x 7Н20), 1 г марганца хлорида (МnС12 х 4Н20), 0,135 г железа хлорного (FeCl3 x 6Н20) и 0,4 г кальция хлорида (СаС12 х Н20) растворяют в дистиллированной воде до конечного объема 1000 см3. Стерилизуют 30 мин при 115° С. Раствор 3. 5 см3 гидролизата лактальбумина (или ферментативного казеиново-дрожжевого гидролизата) растворяют в 100 см3 дистиллированной воды. Стерилизуют текучим паром 3 дня подряд по 30 мин. Раствор 4. 5 г глюкозы растворяют в 100 см3 дистиллированной воды. Стерилизуют текучим паром 3 дня подряд по 30 мин. Раствор 5. 26 г агара «Дифко» растворяют в 100 см3 дистиллированной воды. Стерилизуют 30 мин при 115° С. Приготовленные растворы асептически соединяют в следующем соотношении: раствор 1-500 см3; раствор 2-1 см3; раствор 3-20 см3; раствор 4-20 см3; раствор 5-460 см3 при 50° С. Среда Ющенко - Дунаева. Используют для накопления иерсиний. В 990 см3 дистиллированной воды растворяют 8,5 г натрия хлорида, добавляют 3 см31/15 М раствора натрия гидрофосфата (Na2HP04 x 12Н20) и 7 см3 1/15 М раствора калия дигидрофосфата (КН2Р04). Устанавливают рН 7,2, фильтруют, разливают по пробиркам и стерилизуют 10 мин при 116° С или 30 мин текучим паром. Среда ЭТ-1. Используют для накопления сальмонелл. К 1000 см3 МПБ или бульона Хоттингера (рН 7,4-7,6) добавляют 2 г глюкозы и 2 см3 5%-ного спиртового раствора розоловой кислоты. Смесь кипятят на водяной бане 15-20 мин, добавляют 25 000 ЕД полимиксина и асептически разливают по пробиркам. Для приготовления 5%-ного спиртового раствора розоловой кислоты 0,5 г розоловой кислоты растворяют в 10 см3 спирта-ректификата, после чего добавляют 90 см3 дистиллированной воды. Среда П-1. Используют для накопления протеев. В 1000 см3 стерильного бульона Хоттингера растворяют 1 г манита, 5 г желчных солей по Олькеницкому, 0,8 г калия дигидрофосфата (КН2Р04), 20 см3 0,01%-ного водного раствора кристаллвиолета. Кипятят в водяной бане 15-20 мин. Добавляют 10 см3 50%-ного водного раствора мочевины и 1 000 000 ЕД полимиксина. Асептически разливают по пробиркам. Для приготовления желчных солей по Олькеницкому к 1000 см3 бычьей или свиной желчи добавляют 40 г натрия гидроокиси и автоклавируют 3 ч при 1,5 атм. Добавляют 100 см3 20%-ного раствора бария хлорида (ВаС12 х 2Н20), автоклавируют 1 ч при 100° С и оставляют на Среда К-1. Используют как селективную и для накопления клебсиелл. В 1000 см3 стерильной дистиллированной воды растворяют 5 г натрия хлорида, 0,2 г магния сульфата (MgS04 x 7Н20), 2 г калия дигидрофосфата (КН2Р04), 2 г калия гидрофосфата (К2НР04), 2 г раффинозы, 2 см3 Для приготовления 1,6%-ного щелочного раствора бромтимолового синего в 80 см3 дистиллированной воды растворяют 1,6 г бромтимолового синего, 20 см3 0,25 Н раствора натрия гидроокиси. Среда Эндо. Селективная среда для энтеробактерий. Выпускается в сухом виде. Состоит из агара, основного фуксина, натрия сульфата, натрия фосфата, лактозы. Для посевов используют свежеприготовленную среду. В 100 см3 дистиллированной воды растворяют 5 г сухой среды, кипятят при постоянном перемешивании 2-3 мин и разливают по чашкам Петри. Для предотвращения образования большого количества конденсата среду после кипячения охлаждают до 50° С. Готовая среда имеет розовый цвет. Колонии лактозоположительных бактерий красные, лактозоотрицательных — бесцветные или слегка розоватые. Среда Левина. Селективная среда для энтеробактерий. К 100 см3 расплавленного и охлажденного до 60-70° С 2%-ного агара Хоттингера (рН 7,2-7,4) добавляют 2 см3 0,5%-ного водного раствора ме-тиленового синего (подогретого на водяной бане до 60-70° С), 1,5 см3 2%-ного раствора эозина, 2 г лактозы и 0,2 г калия фосфорнокислого двуосновного (КН2Р04). Перемешивают, разливают по чашкам Петри и подсушивают. Перед добавлением в среду раствора красителей стерилизуют текучим паром 3 дня подряд по 30 мин. Готовая среда имеет фиолетовый цвет. Колонии эшерихий синего или черного цвета, сальмонелл — бесцветные или розовые, протея — оранжевые, с измененным цветом среды вокруг колонии. Агар Мак-Конки (таурохолевыйагар). Селективная среда для энтеробактерий. В 1000 см3 дистиллированной воды растворяют 20 г пептона, Агар Плоскирева. Селективная среда для сальмонелл. Выпускается в сухом виде. Состоит из агара с желчными солями, натрия цитрата, натрия тиосульфата, натрия фосфата, лактозы, нейтрального красного, бриллиантового зеленого, соды кальцинированной, йода, натрия хлорида. Готовая среда прозрачная или розовато-желтого цвета. Лактозоположительные штаммы сальмонелл образуют колониии красного цвета, лак-тозоотрицательные штаммы — бесцветные. Висмут-сульфит агар. Селективная среда для сальмонелл. Выпускается в сухом виде. Состоит из агара, гидролизата рыбы, глюкозы, висмута цитрата, натрия сульфита, соли Мора, натрия фосфата, бри-лиантового зеленого. Готовая среда имеет зеленоватую окраску. Штаммы сальмонелл, продуцирующие сероводород, образуют черные колони с прокрашиванием агара под колонией в черный цвет. Штаммы сальмонелл, не продуцирующие сероводород, образуют бесцветные или зеленовато-коричневые колонии. Среда Рапопорта. Селективная среда для сальмонелл. Состав: МПБ или бульон Хоттингера — 900 см3, желчь бычья — 100 см3, глюкоза — Среда Ворфеля - Фергюсона. Используют для лучшего образования капсулы у клебсиелл. В 1000 см3 дистиллированной воды растворяют 2 г натрия хлорида, 1 г калия сульфата (K2S04), 0,25 г магния сульфата (Mg S04 x 7H20), 20 г сахарозы, 88 см3 дрожжевого экстракта (или 2 г сухого дрожжевого экстракта), фильтруют через бумажный фильтр, разливают по пробиркам и стерилизуют 15 мин при 121° С. Бульон с 0,2% глюкозы. Используют для лучшего образования капсулы у клебсиелл. Берут 1000 см3 МПБ или бульона Хоттингера (рН 7,2-7,4). В небольшом его объеме, нагретом до 40-50° С, растворяют 2 г глюкозы и смешивают с оставшимся бульоном. Разливают по пробиркам и стерилизуют 30 мин при 112° С.
|