Полезное:
Как сделать разговор полезным и приятным
Как сделать объемную звезду своими руками
Как сделать то, что делать не хочется?
Как сделать погремушку
Как сделать так чтобы женщины сами знакомились с вами
Как сделать идею коммерческой
Как сделать хорошую растяжку ног?
Как сделать наш разум здоровым?
Как сделать, чтобы люди обманывали меньше
Вопрос 4. Как сделать так, чтобы вас уважали и ценили?
Как сделать лучше себе и другим людям
Как сделать свидание интересным?
Категории:
АрхитектураАстрономияБиологияГеографияГеологияИнформатикаИскусствоИсторияКулинарияКультураМаркетингМатематикаМедицинаМенеджментОхрана трудаПравоПроизводствоПсихологияРелигияСоциологияСпортТехникаФизикаФилософияХимияЭкологияЭкономикаЭлектроника
|
Фиксированные окрашенные препаратыСтр 1 из 2Следующая ⇒ Для приготовления фиксированного препарата покровное стекло не используется. Из капли с внесенной культурой готовят мазок, равномерно размазывая ее петлей или краем покровного стекла на площади 2--4см. Мазок просушивают на воздухе или слегка нагревая в струе теплого воздуха высоко над пламенем горелки, держа стекло мазком вверх. Нельзя перегревать мазок - клетки микроорганизмов могут деформироваться! Хорошо приготовленный мазок должен после сушки выглядеть на предметном стекле как едва заметный налет. Фиксация препарата. Высушенный препарат фиксируют. Цель фиксации: 1) быстро убить микроорганизмы (при медленной гибели клеток синтезируются автолитические ферменты, приводящие к появлению артефактных структур), 2) обеспечить лучшее прилипание препарата к стеклу, предохранив его тем самым от смывания, 3) сделать мазок более восприимчивым к окраске, так как у мертвых клеток нарушена целостность мембран, и, в результате, они прокрашиваются лучше живых. Для исследования тонкого строения клетки обычно применяют фиксацию различными химическими веществами. Фиксирующую жидкость наносят на мазок, или препарат погружают в фиксатор. Время фиксации зависит от природы используемого вещества. Например, для фиксации препаратов метиловым спиртом или ацетоном достаточно 5 минут, а время фиксирующего воздействия этилового спирта 15-20 минут. Широкое применение в качестве фиксаторов нашли альдегиды, особенно формальдегид и глутаровый альдегид. Для фиксации липидов используется четырехокись осмия (О5О4). После окончания химической фиксации препарат следует осторожно промыть водой. При исследовании морфологии клеток наиболее часто используется фиксация высокой температурой. Для этого предметное стекло захватывают металлическим пинцетом мазком вверх и три раза проводят через пламя горелки в верхней его части. Приступать к окраске препарата можно через несколько минут, когда стекло с препаратом остынет. Окраска препарата. Существуют позитивный и негативный способы окраски препаратов. При позитивном способе окраски краситель проникает в клетки микроорганизмов, окрашивая их. При негативном контрастировании краситель заполняет пространство, окружающее клетки, в результате чего микроорганизмы выглядят как светлые частицы на равномерно окрашенном поле. Для простого позитивного окрашивания клеток микроорганизмов чаще всего пользуются анилиновыми красителями: фуксином, генцианвиолетом, метиленовым синим. Фиксированный препарат помещают на параллельные стеклянные рейки, лежащие на стенках кюветы, и наносят на стекло из пипетки раствор выбранного красителя таким образом, чтобы красителем был покрыт весь мазок. Выдерживают 1-3 минуты, а затем осторожно промывают водой и высушивают, слегка промокая фильтровальной бумагой. Ни в коем случае нельзя тереть бумагой приготовленный препарат во избежание его повреждения.
|