Полезное:
Как сделать разговор полезным и приятным
Как сделать объемную звезду своими руками
Как сделать то, что делать не хочется?
Как сделать погремушку
Как сделать так чтобы женщины сами знакомились с вами
Как сделать идею коммерческой
Как сделать хорошую растяжку ног?
Как сделать наш разум здоровым?
Как сделать, чтобы люди обманывали меньше
Вопрос 4. Как сделать так, чтобы вас уважали и ценили?
Как сделать лучше себе и другим людям
Как сделать свидание интересным?
Категории:
АрхитектураАстрономияБиологияГеографияГеологияИнформатикаИскусствоИсторияКулинарияКультураМаркетингМатематикаМедицинаМенеджментОхрана трудаПравоПроизводствоПсихологияРелигияСоциологияСпортТехникаФизикаФилософияХимияЭкологияЭкономикаЭлектроника
Преимущества ПЦР в реальном времени
Полимеразная цепная реакция в реальном времени (Real-Time PCR)- современный, быстрый, качественный метод генодиагностики
| Особенность полимеразной цепной реакции в реальном времени - определение накопления продуктов амплификации непосредственно во время проведения реакции. Для выявления продуктов амплификации в режиме реального времени используют ДНК-зонды (Рис.1.). В состав ДНК-зонда входит флуоресцентная метка и гаситель флуоресценции. В ходе ПЦР происходит разъединение флуоресцентной метки и гасителя, что приводит к появлению свечения. |
Рисунок 1. Схема проведения ПЦР в реальном времени.
| Праймер 1 | Флуоресцентный зонд | |
| ||
| ДНК или РНК инфекционного агента | 
| Праймер 2 |
| ||
| Флуоресценция |
| |
|
Для постановки ПЦР в реальном времени необходим специальный амплификатор (Рис. 2), отличительной особенностью которого является возможность детектировать 
флуоресценцию.
Рисунок 2. Прибор ABI Prism 7000 (Applied Biosystems) для выполнения анализов методом полимеразной цепной реакции в реальном времени.
Интенсивность флуоресценции измеряется, и результат реакции выносится на экран монитора в виде графика зависимости флуоресценции от количества циклов в реакции. Таким образом, за ходом реакции можно следить уже через несколько минут после её начала (Рис.3).
| Рисунок 3. Количественное выявление вируса классической чумы свиней в разведениях. Линии выше черной горизонтальной полосы [1,2,3,4,5] соответствуют положительным результатам; ниже [6] - отрицательным. |
Преимущества ПЦР в реальном времени
- Существенное повышение специфичности метода за счет наличия внутреннего зонда;
- Возможность количественного определения;
- Надежность из-за снижения риска контаминации (за счет проведения всех стадий ПЦР в одной пробирке и отсутствия стадии электрофореза);
- Возможность создания мультиплексных систем, позволяющих детектировать несколько возбудителей в одном образце;
- Снижение времени проведения реакции;
Наши услуги:
В настоящее время в НПО «НАРВАК» выполняется анализ методом полимеразной цепной реакции в реальном времени по обнаружению:
- вируса классической чумы свиней;
- вируса репродуктивного и респираторного синдрома свиней;
- цирковируса свиней II типа;
- микобактерий туберкулезного комплекса (M.bovis и M.tuberculosis).
В скором времени планируется создание и использование тест-систем на основе полимеразной цепной реакции в реальном времени для диагностики:
- лептоспиоза;
- чумы плотоядных;
- вирусной диареи крупного рогатого скота;
- трансмиссивного гостроэнтерита свиней;
- гриппа А подтипов Н5 и Н7.
| <== предыдущая | | | следующая ==> |
| Подготовлено по материалам Минтруда, Минздрава и ПФ России | | | Сущность и отличительные черты политической культуры. Сущность и отличительные черты политической культуры |
Date: 2015-07-27; view: 1443; Нарушение авторских прав; Помощь в написании работы --> СЮДА... |