Главная Случайная страница


Полезное:

Как сделать разговор полезным и приятным Как сделать объемную звезду своими руками Как сделать то, что делать не хочется? Как сделать погремушку Как сделать так чтобы женщины сами знакомились с вами Как сделать идею коммерческой Как сделать хорошую растяжку ног? Как сделать наш разум здоровым? Как сделать, чтобы люди обманывали меньше Вопрос 4. Как сделать так, чтобы вас уважали и ценили? Как сделать лучше себе и другим людям Как сделать свидание интересным?


Категории:

АрхитектураАстрономияБиологияГеографияГеологияИнформатикаИскусствоИсторияКулинарияКультураМаркетингМатематикаМедицинаМенеджментОхрана трудаПравоПроизводствоПсихологияРелигияСоциологияСпортТехникаФизикаФилософияХимияЭкологияЭкономикаЭлектроника






N С одной стороны, молекулы ДНК животных и человека имеют большие размеры

⇐ ПредыдущаяСтр 8 из 9Следующая ⇒

n Такие молекулы неудобны для исследования и их предварительно разрезают, фрагментируют с помощью специальных ферментов - рестриктаз, выделяемых из бактерий

n Рестриктазы «узнают» определенные последовательности и разрезают ДНК в определенных местах;

n С другой стороны, количество ДНК в клетке невелико, поэтому необходим способ умножения (амплификации) изучаемой ДНК in vitro

n Таким методом является полимеразная цепная реакция - ПЦР, которая позволяет амплифицировать ДНК или ее фрагмент в миллионы раз за несколько часов

Метод ПЦР

n Методом ПЦР осуществляют диагностику следующих заболеваний: ВИЧ –инфекции, гепатиты А, В, С, Д, цитомегаловирусную инфекцию, токсоплазмоз, хламидии, то есть многие вирусные и бактериальные инфекции.

n ПЦР осуществляют в пробирке с помощью термостабильной ДНК-полимеразы при участии дезоксинуклезидтрифосфатов - субстратов и коротких олигонуклеотидных затравок - праймеров

n Праймер - короткие, длиной в 20-30 нуклеотидов одноцепочечные фрагменты ДНК, комплементарные 3’-концевым последовательностям копируемой ДНК-матрицы

n Реакция происходит в несколько стадий:

Стадии одного цикла ПЦР:

· Денатурация.

· Инкубационную смесь нагревают до 90о

· При этом происходит разрушение слабых связей в ДНК и из одной двухцепочечной молекулы образуются две одноцепочечные

· Гибридизация праймеров

· Температуру снижают до 50о

· При этом происходит гибридизация цепей ДНК с праймерами

· Полимеризация

· Инкубационную смесь нагревают до 70о

· При этой температуре полимераза удлиняет оба праймера с их 3’-концов

· Праймеры дорастают до размеров матрицы

· В результате количество ДНК удваивается

N Метод основан на том, что первичная структура ДНК разных видов организмов различна


⇐ Предыдущая123456789Следующая ⇒





Date: 2015-07-17; view: 419; Нарушение авторских прав


mydocx.ru - 2015-2024 year. (0.005 sec.) Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав - Пожаловаться на публикацию