Среда Бабича М.А., Дигальцева Ю.М. и Фоменко А.С

A. Основа среды (95-97% общего объема среды) — ¹/₅₀ М фосфатный
буфер, который автоклавирован при 127°С в течение 1,5 часов.

Б. Альбуминовая фракция сыворотки крови овец. Готовится методом вы­саливания; диализированный раствор альбумина фильтруют через пластины «СФ» и добавляют к основе среды 150-250 мг% (в пересчете на сухое вещество).

B. Фактор роста — состоит из нативного экстракта печени овец с включе­нием витаминов, микроэлементов и биоактиваторов. В процессе изготовления нативного экстракта печени к нему добавляют: хлористого магния — 25 мг/л; молибденового натрия — 1 мг/л, хлористого цинка —
2 мг/л, карбамида —10 мг/л, никотиновой кислоты — 2 мг/л, калиевой соли индолиуксусной кис­лоты — 2 мг/л, тиамина — 20 мг/л, рибофлавина — 0,1 мг/л, кобаламина —0,02 мг/л. Этот фактор добавляют к основе среды в количестве 0,5-1%.

Твин-альбумин сывороточная среда Эллиса. В 998 мл дистиллированной воды растворяют Na₂HP0₄ — 1 г, КН РО₄ — 0,3 г, NH₄C1 — 1 мл, глицерин — 1 мл; растворяют компонен­ты, устанавливают рН 7,4, удаляют 140 мл среды, вносят 1,5 г очищенного агара, стерилизуют (121° С, 20 мин), охлаждают до 50° С, добавляют 140 мл основной среды, фильтруют через мембранные фильтры с размером пор 0,22 микрон и разливают по пробиркам.Приготовление растворов компонентов среды: в 100 мл стерильной ди­стиллированной воды растворяют раздельно ZnS0₄ х 7Н₂0 — 0,4 г, СаС1₂ хх 2Н₂0 —1,0 г, глицерина — 10,0 мл, NH₄C1 — 25 г, витамин В,₂ — 0,02 г, тиамин — 0,5 г, MgS0₄ — 0,3 г. Растворы до использования можно хра­нить до 30 суток при 4 —5° С. Ex tempore готовят следующие растворы компонентов. В дистиллированной воде разводят FeS0₄x 7Н₂0 — 0,5 г/ 100 мл Н₂0, твин-80 — 20 мл/180 мл Н₂0, твин-40 — 20 мл/180 мл Н₂0, 5-флюорацил —1,0 г/100 мл Н₂0, налидиксовая кислота —1,0 г/100 мл Н₂0, MgCl,x 6H₂0 — 0,016 г/100 мл Н₂0.

Приготовление основной среды: в 50 мл стерильной дистиллированной воды растворяют 10,0 г бычьего альбумина, 1,0 глактальбумина-гидролизата, за­тем вносят растворы тиамина — 1 мл, СаС1₂ х 2Н₂0 —
1 мл, MgS0₄ — 1 мл, ZnS0₄x 7 Н₂0 — 1 мл, MgCl₂x6 Н₂0 — 1 мл, ZnS0₄ x 7 Н₂0 — 1 мл, FeS0₄ x 7 Н₂0 — 10 мл, витамина В₁₂ — 1 мл, твина-80 —

9 мл, твина-40 — 3-5 мл. После растворения компонентов устанавливают рН 7,4, вносят дистиллиро­ванную воду до 96 мл и 4 мл кроличьей сыворотки, инактивированной при 56° С (30 минут), флюорацила —
20 мл, налидиксовой кислоты — 20 мл.

Среда с 5-флюорацилом. В питательную среду (жидкую, полужидкую, плотную) вносят 100 - 400 мкг/мл 5-флюорацила.