Вывод___

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

V.ТЕМА: БИОЛОГИЧЕСКОЕ ОКИСЛЕНИЕ

Лабораторная работа № 9

Обнаружение НАД в дрожжах

Принцип метода НАД встречается во многих органах и тканях человека и животных, богаты им и дрожжи. НАД легко извлекается из дрожжей горячей водой (он термостабилен) и может быть обнаружен по образованию флуоресцирующего комплекса с ацетоном. Эта реакция характерна для N-производных амида никотиновой кислоты. Она применяется для определения метилникотинамида в моче.

Реактивы:

1. дрожжи,
2. ацетон,
3. 30% раствор NaOH,
4. спиртовой раствор фенолфталеина.

Ход работы. В пробирку помещают кусочек дрожжей величиной 4—5 мм, добавляют 1/3 пробирки воды и кипятят 20—30с, не допуская выбрасывания жидкости. Отфильтровывают в пустую пробирку 5—10 капель полученного экстракта, добавляют 3—5 капель ацетона и 1—2 капли 30% раствора едкого натра. Оставляют пробирку на 2 мин; затем добавляют 1 каплю 5 г/л спиртового раствора фенолфталеина и по каплям концентрированную соляную кислоту до обесцвечивания фенолфталеина. Пробирку в процессе добавления кислоты встряхивают. Поместить пробирку на 2 мин в кипящую водяную баню, затем охладить и поднести к включенному флюориметру. Ацетоновый комплекс НАД флюоресцирует, синим светом.

Результат: __________________________________________________________________

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Вывод_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Лабораторная работа № 10

Обнаружение каталазы в крови

Принцип метода: При окислительных процессах может образовываться перекись водорода, которая разлагается ферментом каталазой (содержится в различных клетках включая кровь) на воду и молекулярный кислород.

Реактивы:

1. 30 г/л перекиси водорода;

2. кровь.

Ход работы: в пробирку внести 10-15 капель 30 г/л перекиси водорода и 3 капли крови. Отметить выделение пузырьков кислорода. При внесении в пробирку тлеющей лучинки она вспыхивает. Так как выделяющийся кислород усиливает горение.

Результат: ___________________________________________________________________

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________