Качественная реакция на витамин В1 (тиамин)

Реактивы: 1% р-р сульфаниловой кислоты, 5% р-р нитрата натрия, 10% р-р бикарбоната натрия, 5% р-р железосинеродистого калия, 30% р-р щелочи, изобутиловый спирт

В щелочной среде тиамин окисляется в тиохром феррицианидом калия. Тиохром обладает синей флюорисценцией при ультрафиолетовом облучении.

В щелочной среде тиамин с диазореактивом образует сложное комплексное соединение оранжевого цвета.

Ход работы:

А) реакция с диазореактивом.

к диазореактиву, состоящему из 5 капель 1% раствора сульфаниловой кислоты и 5 капель 5% раствора нитрита натрия, добавляют 5 капель 5% раствора тиамина и затем по стенке, наклонив пробирку, осторожно добавляют 5 – 7 капель 10% раствора бикарбоната натрия. На границе двух жидкостей появляется кольцо оранжевого цвета.

Б) реакция с железосинеродистым калием.

К раствору тиамина приливают 1 мл 5% раствора железосинеродистого калия. 1 мл 30% раствора щелочи и полученный раствор перемешивают Далее к полученной смеси приливают 3 мл изобутилового спирта, полученный раствор хорошо взбалтывают. Верхний спиртовой слой при помощи капиляра или микропипетки переносят в сухую пробирку и наблюдают голубую флюоресценцию раствора в ультрафиолетовых лучах. Смесь в пробирке при перемешивании нагревают на водяной бане. Наблюдают появление желтой окраски. Флуоресценция и желтая окраска обусловлены образованием тиохрома:

С) определение тиамина в молоке

Определите наличие тиамина в молоке: к 1 мл молока добавьте 10 капель диазореактива и 7 капель раствора карбоната натрия. Наблюдайте изменение окраски раствора и сделайте вывод о присутствии тиамина в молоке.

.