Этапы приготовления мазка.

Для приготовления мазка необходимо иметь:

· Чистое обезжиренное предметное стекло.

· Бактериологическую петлю.

· Культуру, выращенную на плотной питательной среде- агаре, или жидкой –бульоне.

· Спиртовку.

· Набор красок.

1. Обезжиренное предметное стекло и бактериологическую петлю прожигают в пламени горелки. Пробирку с изучаемой культурой держат между указательным и большим пальцами левой руки. Петлю берут правой рукой, мизинцем правой руки прижимают пробку пробирки к ладони.

Если мазок готовится с жидкой питательной среды, то каплю культуры наносят петлей на предметное стекло.

Если мазок делают из культуры с агара, то петлю с культурой вносят на предметное стекло и добавляют каплю физиологического раствора, в котором эмульгируют внесенный материал.

Петлю обжигают в пламени горелки. Мазок должен быть тонким, равномерно растертым, округлой формы, размером 1,5-2см².

2. Высушивание мазка производится при комнатной температуре.

3. Фиксация мазка производится с целью:

· Убить микробные клетки.

· Обеспечить лучшее прилипание микробов к предметному стеклу.

· Обеспечить дальнейшее окрашивание.

Фиксация мазка в пламени горелки производится 3-кратно, действие пламени должно длится 2 секунды.

Для более нежной фиксации мазков крови, спирохет и простейших используют химические фиксаторы:

· Метиловый спирт в течении 5-и минут.

· Этиловый спирт (96⁰) в течении 10-и минут.

· Смесь Никифорова – в течении 10-15 минут.

· Ацетон – в течении 5-и минут.

· Пары формалина – в течении нескольких секунд.

4. Окраска препаратов проводится:

· Простыми методами (водным фуксином Пфейффера, метиленовой синькой Леффлера), когда окрашивается вся клетка и используется только один краситель;

· Сложными методам, когда определяются клеточные структуры.

После экспозиции мазок промывают водой, высушивают фильтровальной бумагой и микроскопируют под иммерсией.