Механические и биологические методы.

Чистая культура – это популяция микроорганизмов одного вида. Для выделения чистой культуры аэробов используют методы, основанные на:

1. Механическом разобщении бактериальных клеток

· Метод Дригальского – распределение капли суспензии материала с помощью шпателя;

· Рассев штрихом;

· Метод Коха является количественным и позволяет определить количество бактерий в исследуемом материале

2. Биологические методы:

· Посев на элективные среды;

· Метод Шукевича – посев материала в конденсат скошенного МПА для выделения чистых культур бактерий, обладающих ползучим ростом (например, протей);

· Обработка кислотами и щелочами (например, микобактерии туберкулеза);

· Прогревание при 80⁰С для выделения споровых форм;

· Заражение лабораторных животных – для диагностики зоонозов и др. (туляремия).

Метод Дригальского основан на механическом разобщении на поверхности плотной питательной среды микробов всех видов, входящих в состав исследуемого материала.

I этап.

1. Определение микробного состава исследуемого материала (приготовление мазка, окраска по Граму).

2. Посев на чашку Петри: одну каплю материала наносят на поверхность МПА и растирают шпателем. Не обжигая шпателя и не набирая нового материала, засевают вторую и третью чашки.

3. Засеянные чашки переворачивают вверх дном и инкубируют в термостате 18-20 часов при температуре 37⁰С.

II этап.

1. Макроскопическое изучение колоний по величине, форме, окраске, характеру поверхности, краев, консистенции.

2. Микроскопическое изучение одной исследуемой колонии (приготовление мазка, окраска по Граму).

3. Оставшуюся часть колонии пересевают в пробирку со скошенным агаром.

4. Пробирку инкубируют в термостате 18-20 часов при температуре 37⁰С.

III этап.

Проверка культуры на чистоту (макроскопическим – однородный рост, микроскопическим – однородные по морфологическим признакам и тинкториальным признаками клетки).

IV этап.

Идентификация проводится по:

- ферментативным свойствам.

- антигенным свойствам, токсигенности и другим признакам

- фагочувствительности