Суретте Күміс арқылы алынған электрофорезден кейінгі ақуыздың боялуы келтірілген

Ажыратылған ақуыз салыстырмалы карта арқылы молекулалық массасы бойынша нуклеин қышқылдарының 1 мл көлемдегі нг концентрациясы анықталды.

Ақуыздарды ажырату тәсілдің екінші түрі тұндыру.Вискозиметрия тәсілі арқылы коммерциялы ақуыздардың судағы ерітіндісінің тұтқырлығыны әр түрлі рН ортасында анықталды. Ерітіндінің рН қышқыл немесе сілті ерітіндісімен титрлеу арқылы өзгертілді.

Диметиламиноэтилметакрилат және метилметакрилат қышқылы негізіндегі сызықтық полиамфолит. "Поли мерлі материалдар және технологиялар ғылыми нтститунынан" алынған Суреттен байқап отырғандарыңыздай онда теріс зарядталған СОО және оң зарядталған NH бөлшектер бар

Ақуыздың келтірілген тұтқырлығының рН тан тәуелділік графигі суретте келтірілген.

Суреттен байқап отырғанымыздай, бұқаның сарысу альбумині үшін рН 4,7 мәнінде тұтқырлықтың ең томенгі шамасы анықталды. Яғни бұл ақуыз үшін изоэлектрлік нүктенің рН (рН_ИЭН) = 4,7 ге тең екендігін көрсетті.

Осы тәсіл арқылы лизоцим ақуызы үшін изоэлектрлік нүктені анықтадық Лизоцимнің келтірілген тұтқырлығының рН тан тәуелділігі келесі суретте келтірілген.

Суреттен көріп отырғанымыздай, келтірілген лизоцим үшін изоэлектрлік нүкте рН (рН_ИЭН) = 11,0 ге тең болды.

Ақуызды тұнбаға түсу арқылы ажырату үшін синтетикалық полиамфолиттің мономерлерінің құрылымына байланысты үш түрлі полимерлер алынды. Полимерлердің изоэлектрлік нүктесін анықтау үшін олардың судағы ерітінділерінің рН тан тәуелді графигі алынды. ҚҰрылымдары әр түрлі полиамфолитттердің келтірілген тұтқырлығының рН тан тәуелділігі келесі суретте келтірілген.

[ДMAЭM]:[MAК] = 38:62 мол %, рН_ИЭН=5.0;

[ДMAЭM]:[MAК] = 57:43 мол %, рН_ИЭН=7.8;

[ДMAЭM]:[MAК] = 62:38 мол %, рН_ИЭН=8.6.

Осы ақуыздардың механикалық қоспасынан синтетикалық полимермен электростатикалық байланысу арқылы ақуыздың біреуі полимермен бірге тұнбаға түсіп екіншісі супернатантта қалады. Полимер мен ақуыздың тұнбаға түсу рН ын анықтау үшін жеке полимер және оның әр ақуызбен қоспасының келтірілген тұтқырлығының рН тан тәуелділігі алынды. Ол үшін полиамфолиттердің биологиялық макромолекулармен байланысуының рН_ИЭТ нің орналасуына әсерін қарастырдық. Изоэлетрлік нүктесі екі ақуыздың ортасында орналасқан [ДMAЭM]:[MAК] = 62:38 мол% қатынастағы полиамфолит және тұнбаға түсетін [ДMAЭM]:[MAК] = 38:62 мол % қатынастағы полиамфолиттер алынды.

Еркін полиамфолит [ДMAЭM]:[MAК] = 62:38 мол% (1)

[ДMAЭM]:[MAК]= 57:43 мол %,қатынастағыи полиамфолит ИЭН де тұнбаға түседі.Осы қасиетті біз ақуыздарды ажырату үшін колдана аламыз.

Жалпы полиамфолиттердің және олардың ақуыздармен түзген кешендерінің зерттеу нәтижесінде алынған сипаттамалары кестеде келтірілген.кестеде салыстырып отырған полиамфолттердің кейбір шамаларын келтірдік.

Суреттерден және кестеден байқағанымыздай, байқап отырғанымыздай, сополимерлердің [ДMAЭM]:[MAК] = 38:62 мол % лизоциммен байланысқан кезде полиамфолиттің изоэлектрлік нүктесі 0,3 шамаға ығысады.

Екінші айта кететін жағдай [ДMAЭM]:[MAК] = 38:62 мол % қатынастағы полиамфолит екі ақуызбенде тұнбаға түседі.