Задание 1. Задача. Иммунологическая диагностика брюшного тифа (возбудитель Salmonella typhi)

В бактериологическую лабораторию поступил материал (испражнения и кровь) от двух больных (А и В) с подозрением на брюшной тиф. В анамнезе у обоих: тошнота, рвота, жидкий стул без патологических примесей, разлитые боли в животе. Отмечено увеличение селезенки и печени. На коже верхних отделов живота и нижних отделов грудной клетки обнаружена розеолезная экзантема. Были проведены следующие лабораторные тесты:

1. Для обнаружения возбудителя заболевания сделан высев испражнений на диференциально-диагностическую плотную питательную среду Эндо. Через 24 ч культивирования в термостате при 37^оС обнаружен рост Гр(-) лактозонегативных микроорганизмов.

Пациент А	Пациент В

2. Для идентификации выделенных культур проведена реакция агглютинации со специфической брюшнотифозной сывороткой. Оцените результаты реакции. Сделайте вывод.

Специфическая брюшнотифозная сыворотка:

Варианты реакции агглютинации:

1. Агглютинация на стекле,

2. Агглютинация в пробирках.

Компоненты реакции:

Контроль 1 = физ. раствор (0,5мл) + культура (0,5мл);

Контроль 2 = физ. раствор (0,5мл) + диагностическая брюшнотифозная сыворотка (0,5мл)

Опыт = диагностическая брюшнотифозная сыворотка + культура.

Ход реакции: Компоненты тщательно перемешивают, реакцию оценивают через 5 минут.

Контроль 1 и 2 –нет выпадения хлопьев

Oпыт PA "+" - появление хорошо видимых хлопьев;

Опыт РА "-" -нет выпадения хлопьев

Причины агглютинации:

Зарисуйте результаты реакции:

Сделайте вывод: ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

3. С целью уточнения диагноза проведено исследование сыворотки крови пациентов А и В на наличие в ней АТ к возбудителю брюшного тифа (Salmonella typhi). Для этого проведена Развернутая реакция агглютинации с ОН-брюшнотифозным диагностикумом.

Компоненты реакции: ИР - изотонический раствор; СО - сыворотка обследуемого; Д - ОН-брюшнотифозный диагностикум

Ход реакции: РА проводили по схеме (ИР - мл; СО - мл; Д - капли):

Инкубацию реагентов вели при 37°С в течение 2 ч. КА, КС – агглютинации не обнаружено. Опыт сравнивали с контролем. Интенсивность реакции выражается в:

++++ - реакция резко положительная, весь агглютинат на дне пробирки в виде зонтика, жидкость над ним прозрачная;

+++ - реакция положительная, осадок выражен, надосадочная жидкость слегка мутная;

++ - частичная агглютинация с небольшим осадком, жидкость мутная;

+ - сомнительная агглютинация;

– - агглютинации нет, жидкость равномерно мутная

В данном случае реакция считается положительной если обнаружено 4-х кратное увеличение титра АТ по сравнению с контролем.

Результаты реакции:

Сделайте вывод:

_______________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

4. Через 2 месяца после выздоровления пациентов А и В, перенесших брюшной тиф проведено исследование на носительство у них Salmonella typhi. Для этого выбран серологический метод анализа - Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА, РПГА).

Компоненты реакции:

1. Эритроцитарный диагностикум. Сенсибилизированые эритроциты, предварительно нагруженные антигеном

2. Несенсибилизированные эритроциты на отсутствие спонтанной агглютинации.

3. Сыворотка обследуемого пациента

Ход реакции: Эритроциты, предварительно нагруженные антигеном вносят в лунки, в которой приготовлены разведения сыворотки обследуемого. Инкубация при температуре 37°С.

Учет: "+" - эритроциты оседают в виде зонтика "–" - эритроциты оседают в виде пуговки.

Достоверность результатов подтверждается контролем ингредиентов:

• КЭ - контроль несенсибилизированных эритроцитов на отсутствие спонтанной агглютинации.
• КА - контроль сенсибилизированных эритроцитов.

· КС - контроль сыворотки обследуемого.

Причины агглютинации:

Результат реакции:

Сделайте вывод:

_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________