Завдання 1. Дослідити вплив активаторів та інгібіторів на активність амілази слини

Принцип методу. Сполуки, що підвищують активність ферментів, називаються активаторами, а сполуки, що знижують активність ферментів – інгібіторами. До активаторів відносяться іони багатьох металів, зокрема: Na⁺, Mg²⁺, Mn²⁺, Co²⁺ та ряд інших, а також органічні сполуки – проміжні продукти обміну речовин в організмі. Наприклад, жовчні кислоти є активатором ліпази, ацетил-КоА – активатором піруваткарбоксилази, тощо.

Інгібування ферментів поділяють на зворотне та незворотне, В свою чергу зворотне інгібування може бути конкурентним та неконкурентним.

Активатором амілази є хлорид натрію (NaCl), інгібітором – сульфат міді (CuSO₄). Показником впливу цих сполук на активність амілази є ступінь гідролізу крохмалю під дією ферменту в присутності NaCl та CuSO₄.

Хід роботи. Слину розводять в 2 рази. Беруть 3 пробірки. В пробірку № 1 наливають 1 мл води, в пробірку № 2 – 0,8 мл води та 0,2 мл 1% -го розчину NaCl, в пробірку № 3 – 0,8 мл води та 0,2 мл 1% -го розчину CuSO₄. У всі три пробірки додають по 1 мл слини. Вміст перемішують і додають по 2 мл 1 % -го розчину крохмалю, знову перемішують і ставлять в термостат чи на водяну баню при t = 37°C на 15 хв.

Далі у всіх пробірках проводять реакцію з йодом (0,1%-й розчин йоду в 0,2%-му розчині йодиду калію). Спостерігають зміну забарвлення.

Результати роботи заносять у таблицю:

За результатами проведеного експерименту зробити висновки.

Клініко-діагностичне та практичне значення. Інгібітори ферментів широко використовуються в медицині в якості лікарських засобів, зокрема ацетилсаліцилова кислота (аспірин) – інгібітор циклооксигенази (простагландин-синтази) використовується як протизапальний препарат, трисалот – інгібітор трипсину та контрикал – інгібітор протеїназ (зокрема калікреїнів) використовуються при панкреатиті, алопуринол – інгібітор ксантиноксидази застосовується при подагрі, тощо.