Лабораторная работа

Определение полового хроматина.

В настоящее время разработан простой и доступный метод получения материала для определения полового хроматина – соскобы слизистой оболочки полости рта.

С целью получения соскобов проводится следующая процедура: слегка заострённым (но не острым) металлическим шпателем, который перед каждым соскобом обрабатывается спиртом и протирается стерильной салфеткой, производится соскоб быстрым скользящим движением шпателя по слизистой щеки, которая перед этой процедурой протирается, при лёгком надавливании, ватным тампоном. Полученный материал переносится на предметное стекло и окрашивается одной каплей 1% ацетоорсеина (свежепрофильтрованного). Препарат накрывается покровным стеклом, сверху прикладывается слой фильтрованной бумаги. После этого производят умеренное надавливание покровного стекла большим пальцем руки в течении нескольких секунд. Остатки красителя удаляются. Нельзя допускать сдвигание покровного стекла при этой процедуре!

Изучение препарата производят в световом микроскопе с иммерсионной системой (x 1200 – 1500), желательно с бинокулярной насадкой. На препарате половой хроматин должен быть обнаружен в виде тельца, окрашенного в тёмный цвет, размером около 1мкм и расположенного чаще всего под ядерной оболочкой.

Поскольку тельце Барра (половой хроматин) в норме определяется в ядрах в среднем у 30% клеток женщин, необходимо осуществить просмотр нескольких полей зрения в разных местах препарата и просчитать не менее 100 ядер. Необходимо учитывать только прилежащие к ядерной оболочке тельца полового хроматина.

Ацетоорсеин готовится по следующей методике: 1г. Синтетического орсеина растворяется в 45мл ледяной уксусной кислоты. Раствор доводится до кипения, охлаждается и фильтруется. К полученному раствору добавляются 55 частей дистиллированной воды. Производится повторное кипячение, охлаждение и фильтрование.