Н2-антиген, как клеточный маркер

Преимущества:

1) большой перечень маркируемых тканей;

2) возможность окрашивания клеток двух генотипов на одном и том же срезе.

Использование:

1) Выбор подходящих антител;

2) Проверка специфичности антител и линий мышей, оптимально – если одни клетки маркируются, другие нет;

3) Если нужно, чтобы были окрашены клетки обоих фенотипов, сначала первые антитела – моноклональные для разных фенотипов, а затем – антитела, специфичные для подклассов иммуноглобулинов G;

4) Тканевый препарат – криостатные срезы нефиксированной ткани. Затем фиксируют (используется холодный ацетон);

5) КОНТРОЛЬ ОБЯЗАТЕЛЕН!!! Рядом со срезом химерной ткани – срезы тканей организмов, составляющих химеру.

Еще один маркер клеточной поверхности, который применяется при работе с химерными мышами – агглютинин Dolishos biflorus = АДБ. С помощью него выявляется полиморфизм углеводов. По аналогии с полиморфизмом групп крови человека, можно ожидать, что у мышей существует система полиморфизма углеводов, тогда разные полиморфные варианты могут быть использованы в качестве клеточных маркеров.

Общая схема скрининга для выявления полиморфизма углеводов при помощи лектинов: