Техника подсчета количества ретикулоцитов

Окашенный мазок микроскопируют с иммерсионной системой в тонкой его части. Ретикулоциты учитываются в числе подсчитанных 1000 эритроцитов при суженном поле зрения (через «окошечко»). Таким образом определяют, сколько незрелых клеток встречается на 1000 эритроцитов.

Количество ретикулоцитов выражают на 1000 эритроцитов — в промилле и на 100 эритроцитов — в процентах.

Норма ретикулоцитов: 5-8% или 0,5-0,8 промилле.

Некоторые авторы отмечают, что у женщин количество ретикулоцитов несколько больше, чем у мужчин. У детей в первые дни жизни количество ретикулоцитов по разным данным может достигать 5-10 %, а затем уменьшается.

1. 100 мкл крови, стабилизированной ЭДТА, поместить в эпиндорф с краской, перемешать.

2. Инкубировать 15-30 минут, перемешать.

3. Сделать тонкий мазок, высушить.

4. Микроскопировать

Увеличение ретикулоцитов в периферической крови (ретикулоцитоз) отмечается:

1. При гемолитических анемиях (число ретикулоцитов может доходить до 60% и более (особенно сильно увеличиваясь при гемолитических кризах).

2. При острых кровопотерях (на 3-5 сутки после кровопотери возникает ретикулоцитарный криз), в том числе, увеличение ретикулоцитов позволяет заподозрить скрытое кровотечение (например, у больных язвенной болезнью желудочно-кишечного тракта, брюшным тифом).

3. При малярии

4. При полицитемии

5. При лечении железом железодефицитных анемий (через несколько дней 3-10) после начала антианемического лечения пернициозной анемии.

6. При остром недостатке кислорода

7. При метастазах опухолей в костный мозг

Истинный ретикулоцитоз: увеличение количества ретикулоцитов в периферической крови с одновременным увеличением количества ретикулоцитов в костном мозге.

Ложный реткулоцитоз: отсутствие повышенного количества ретикулоцитов в костном мозге при повышении их количества в периферической крови (что говорит об усилении вымывания ретикулоцитов из костного мозга в периферическую кровь).

Фактором, приводящим к увеличению значения процентного содержания ретикулоцитов могут быть прием следующих препаратов: кортикотропин, противомалярийные лекарственные средства, жаропонижающие препараты, фуразолидона (у маленьких детей), леводопы.

Возможной ошибкой при подсчете ретикулоцитов может быть их ложное завышение из-за наличия:

1. Включений в эритроцитах (тельца Жолли, малярийные паразиты)

2. Высокого лейкоцитоза

3. Аномальной формы гемоглобина

4. Гипертромбоцитоза

5. Гигантских тромбоцитов.

Снижение количества или отсутствие ретикулоцитов (ретикулоцитопения) наблюдается:

1. При арегенераторных апластических и гипопластических анемиях.

2. При анемиях, вызванных недостаточностью содержания железа, витамина В12, фолиевой кислоты (микроцитарно-гипохромные и мегалобластные анемии);

3. При талассемии

4. При сидеробластной анемии

5. При метастазах рака в кость

6. При лучевой болезни и лучевой терапии

7. При лечении цитостатиками

8. При аутоимунных заболеваниях системы кроветворения

9. При заболеваниях почек

10. При алкоголизме

11. При рецидиве анемии Аддисона -Бирмера

12. При микседеме

Факторы, искажающие результат лабораторного исследования процентного содержания ретикулоцитов:

1. Неправильный выбор антикоагулянта или недостаточное перемешивание крови с антикоагулянтом

2. Длительное сдавливание руки жгутом

3. Прием сульфаниламидов (возможны как заниженные, так и завышенные результаты)

4. Переливание крови незадолго до исследованиям

5. Гемолиз пробы крови

Показания к назначению анализа на ретикулоциты:

1. Оценка активности эритропоэза при состояниях, сопровождающихся гемолизом или кровопотерей.

2. Оценка способности костного мозга к регенерации после цитотоксической терапии и трансплантации костного мозга.

3. Оценка восстановления синтеза эритропоэтина после трансплантации почки

4. Допинговый контроль у спортсменов (прием эритропоэтина)

5. Диагностика неэффективного гемопоэза или снижения продукции эритроцитов

6. Дифференциальная диагностика анемий

7. Детекция нарушения регенераторной способности косного мозга при дефиците железа, витаминов В12, В6, фолатов, меди и мониторинга соответствующей терапии

8. Оценка реакции на терапию эритропоэтином, эритросупрессорами.