Интерпретация хроматографических данных

t_i – время удерживания компонента – соответствует времени появления максимума пика на хроматограмме, где i – индекс, соответствующий i -му компоненту разделяемой смеси. При точном воспроизведении параметров хроматографической системы время удерживания является величиной, постоянной для данного вещества;

t ₀ – время удерживания несорбирующегося компонента;

t_R = t_i − t ₀ – приведенное (исправленное) время удерживания компонента;

R_r – относительное время удерживания компонента 2 по компоненту 1

t ₁ и t ₂ – времена удерживания двух компонентов, измеренные от момента инжекции.

r – относительное удерживание компонента 2 по компоненту 1

k ¢ = (t_i – t ₀)/ t ₀ – коэффициент емкости колонки по i компоненту;

W – ширина пика у основания (для пиков, описываемых гауссовым законом распределения, W = 4 s, см. рис. 1.2);

W _0,5 – ширина пика на половине высоты (для пиков, описываемых гауссовым законом распределения, W _0,5 = 2,35 s, см. рис. 1.2);

R – разрешение между пиками двух компонентов смеси может быть описано уравнениями:

, (1)

или

, (2)

При R ≥ 1,5 компоненты разделены полностью (до базовой линии).

Коэффициент p/ v(отношение «пик – впадина»)

,

Данное соотношение используют для оценки эффективности хроматографической системы, если компоненты смеси разделяются не полностью
(рис. 1.3).

N – число теоретических тарелок, определяется следующими выражениями:

, (3)

или

. (4)

Рис. 1.3. Хроматограмма не полностью разделяемых компонентов

H_p – высота меньшего пика относительно экстраполированной базовой линии;

H _v – высота низшей точки (седловины) кривой, разделяющей пики, относительно экстраполированной базовой линии

T – фактор асимметрии пика (хвостовой фактор) рассчитывают по уравнению (см. рис. 1.4):

(5)

где: W _0,05 – ширина пика на 5 % (1/20) его высоты;

f – расстояние между перпендикуляром, опущенным из вершины пика, и восходящей стороной пика на 5 % его высоты.

При T = 1 пик симметричен.

Рис. 1.4. Схема расчета фактора асимметрии пика

RSD (%)– относительное стандартное отклонение, вычисляемое по формуле:

(6)

где: – среднее результатов определений;

– результаты единичных определений;

n – число определений.

Для оценки пригодности хроматографической системы в колоночной хроматографии обычно используют следующие параметры: R; p/ v; N; T; RSD,– как по отдельности, так и в различных сочетаниях.

В планарной хроматографии аналогом времени удерживания является фактор удерживания:

R _f = a / b, (7)

где: a – расстояние от точки нанесения пробы до центра пятна;

b – расстояние от линии старта до линии фронта элюента.

На экспериментально определяемые значения R _f заметно влияют условия хроматографирования. Оценкой хроматографической подвижности, менее чувствительной к влиянию отклонений в условиях проведения эксперимента, является величина R _s, представляющая собой отношение величины R _f одного вещества к величине R _f другого, принятого за стандарт. Величины R _f и R _s используют для идентификации веществ. Обычно выбор стандарта осуществляется так, чтобы значение R _s анализируемого вещества было в пределах от 0,5 до 2,0. Схема определения этих величин приведена на рис. 1.5.

Рис. 1.5. Схема определения значений R _f и R _s

– место нанесения образца на линию старта

Данные планарной хроматографии могут быть представлены в виде денситограмм.