Главная Случайная страница


Полезное:

Как сделать разговор полезным и приятным Как сделать объемную звезду своими руками Как сделать то, что делать не хочется? Как сделать погремушку Как сделать так чтобы женщины сами знакомились с вами Как сделать идею коммерческой Как сделать хорошую растяжку ног? Как сделать наш разум здоровым? Как сделать, чтобы люди обманывали меньше Вопрос 4. Как сделать так, чтобы вас уважали и ценили? Как сделать лучше себе и другим людям Как сделать свидание интересным?


Категории:

АрхитектураАстрономияБиологияГеографияГеологияИнформатикаИскусствоИсторияКулинарияКультураМаркетингМатематикаМедицинаМенеджментОхрана трудаПравоПроизводствоПсихологияРелигияСоциологияСпортТехникаФизикаФилософияХимияЭкологияЭкономикаЭлектроника






Среды обогащения





Желчный бульон. Применяют в качестве среды обогащения для сальмо­нелл, выделяемых из крови или материалов, не содержащих или содержа­щих в незначительных количествах другие виды бактерий.

Желчь крупного рогатого скота наливают в колбу и нагревают 1 ч те­кучим паром. После отстаивания фильтруют через ватно-марлевый фильтр и стерилизуют текучим паром 3 дня по 30 мин. К 800 см3 МПБ добавляют 200 см3 желчи, разливают по пробиркам и стерилизуют текучим паром 3 дня по 30 мин.

Среда Мюллера. Используют для накопления сальмонелл.

К 4,5 г простерилизованного сухим жаром химически чистого мела (СаС03) добавляют 90 см3 МПБ или бульона Хоттингера и стерилизуют 30 мин при 121 ° С. Перед посевом к бульону асептически добавляют
2 см3 ра­створа Люголя (калия иодид — 25 г, йод кристаллический — 20 г, вода дистиллированная — до 100 см3) и 10 см3 раствора натрия тиосульфата (на­трия тиосульфат — 50 г, вода дистиллированная до 100 см3). Смесь переме­шивают и разливают по пробиркам.

Среда Кауфмана. Используют для накопления сальмонелл.

К 100 см3 стерильной среды Мюллера асептически добавляют 5 см3 сте­рильной желчи (желчь стерилизуют дробно, текучим паром 3 дня подряд по 20 мин) и 5 см3 0,1%-ного водного раствора бриллиантового зеленого. Раз­ливают по пробиркам. Не стерилизуют.

Среда Киллиана. Используют для накопления сальмонелл.

К 100 см3 стерильного МПБ или бульона Хоттингера (рН 6,7-6,9) не­посредственно перед применением добавляют 1 см3 0,1%-ного водного ра­створа бриллиантового зеленого.

Селенитовая среда. Используют для накопления сальмонелл. Для при­готовления используют два раствора. Раствор 1. К 950 см3 раствора фосфатов (натрия гидрофосфат без­водный — 7 г, натрия дигидрофосфат безводный — 3 г) на дистиллиро­ванной воде добавляют 5 г пептона и 4 г лактозы. Разливают во флако­ны по 50 см3 и стерилизуют текучим паром
2 дня подряд по 30 мин или 30 мин при 112° С. При приготовлении раствора количественное соотно­шение фосфатов подтитровывают так, чтобы при добавлении пептона и натрия селенита готовая среда имела рН 6,9-7,1. Раствор хранят при 4-10° С 1-2 мес.

Раствор 2. В 40 см3 стерильной дистиллированной воды растворяют
4 г натрия гидроселенита (NaHSe03). Раствор готовят непосредственно перед приготовлением среды.

В каждый флакон с 50 см3 раствора 1 асептически добавляют 2 см3 ра­створа 2, перемешивают и разливают по пробиркам.

Магниевая среда. Используют для накопления сальмонелл. Для приго­товления используют два раствора. Раствор 1. К 890 см3 дистиллированной воды добавляют 4,2 г пептона, 7,15 г натрия хлорида, 1,43 г калия дигидрофосфата (KH2PO4 и 9 см3 дрож­жевого автолизата.

Раствор 2. В 90 см3 дистиллированной воды растворяют 35,7 г магния хлорида (MgCl2 х 6Н20). Растворы смешивают и добавляют 0,9 см3 0,5%-ного водного раствора бриллиантового зеленого. Разливают по пробиркам и стерилизуют 30 мин при 112° С.

Среда Минка. Используют для накопления эшерихий, обладающих ад­гезивными антигенами. Раствор 1 (фосфатный буферный раствор рН 7,5). Берут 1,36 г калия фосфорнокислого однозамещенного (КН,Р04), 10,1г натрия фосфорнокис­лого двузамещенного (Na2HP04 x 7Н20) и растворяют в дистиллирован­ной воде до конечного объема 1000 см3. Стерилизуют
30 мин при 115° С.

Раствор 2. 10 г магния сульфата (MgS04 x 7Н20), 1 г марганца хлорида (МnС12 х 4Н20), 0,135 г железа хлорного (FeCl3 x 6Н20) и 0,4 г кальция хлорида (СаС12 х Н20) растворяют в дистиллированной воде до конечного объема 1000 см3. Стерилизуют 30 мин при 115° С.

Раствор 3. 5 см3 гидролизата лактальбумина (или ферментативного казеиново-дрожжевого гидролизата) растворяют в 100 см3 дистиллированной воды. Стерилизуют текучим паром 3 дня подряд по 30 мин.

Раствор 4. 5 г глюкозы растворяют в 100 см3 дистиллированной воды. Стерилизуют текучим паром 3 дня подряд по 30 мин.

Раствор 5. 26 г агара «Дифко» растворяют в 100 см3 дистиллированной воды. Стерилизуют 30 мин при 115° С.

Приготовленные растворы асептически соединяют в следующем соот­ношении: раствор 1-500 см3; раствор 2-1 см3; раствор 3-20 см3; раствор 4-20 см3; раствор 5-460 см3 при 50° С.

Среда Ющенко - Дунаева. Используют для накопления иерсиний. В 990 см3 дистиллированной воды растворяют 8,5 г натрия хлорида, до­бавляют 3 см31/15 М раствора натрия гидрофосфата (Na2HP04 x 12Н20) и 7 см3 1/15 М раствора калия дигидрофосфата (КН2Р04). Устанавливают рН 7,2, фильтруют, разливают по пробиркам и стерилизуют 10 мин при 116° С или 30 мин текучим паром.

Среда ЭТ-1. Используют для накопления сальмонелл. К 1000 см3 МПБ или бульона Хоттингера (рН 7,4-7,6) добавляют 2 г глюкозы и 2 см3 5%-ного спиртового раствора розоловой кислоты. Смесь кипятят на водяной бане 15-20 мин, добавляют 25 000 ЕД полимиксина и асептически разливают по пробиркам.

Для приготовления 5%-ного спиртового раствора розоловой кислоты 0,5 г розоловой кислоты растворяют в 10 см3 спирта-ректификата, после чего добавляют 90 см3 дистиллированной воды.

Среда П-1. Используют для накопления протеев. В 1000 см3 стерильного бульона Хоттингера растворяют 1 г манита, 5 г желчных солей по Олькеницкому, 0,8 г калия дигидрофосфата (КН2Р04), 20 см3 0,01%-ного водного раствора кристаллвиолета. Кипятят в водяной бане 15-20 мин. Добавляют 10 см3 50%-ного водного раствора мочевины и 1 000 000 ЕД полимиксина. Асептически разливают по пробиркам.

Для приготовления желчных солей по Олькеницкому к 1000 см3 бычьей или свиной желчи добавляют 40 г натрия гидроокиси и автоклавируют 3 ч при 1,5 атм. Добавляют 100 см3 20%-ного раствора бария хлорида (ВаС12 х 2Н20), автоклавируют 1 ч при 100° С и оставляют на
12-18 ч при комнат­ной температуре. Над осадочную жидкость сливают, фильтруют и добавля­ют 20%-ный раствор соляной кислоты (до кислой реакции), оставляют на 12-16 ч при комнатной температуре. После этого сливают, промывают водой и добавляют 40%-ный раствор натрия гидроокиси (до щелочной ре­акции). Полученный раствор солей высушивают при 115° С.

Среда К-1. Используют как селективную и для накопле­ния клебсиелл. В 1000 см3 стерильной дистиллированной воды растворяют 5 г на­трия хлорида, 0,2 г магния сульфата (MgS04 x 7Н20), 2 г калия дигидро­фосфата (КН2Р04), 2 г калия гидрофосфата (К2НР04), 2 г раффинозы, 2 см3
1,6%-ного щелочного раствора бромтимолового синего, 20 см3
0,01%-ного водного раствора кристаллвиолета. Кипятят 15-20 мин на водяной бане, добавляют 4 см3 50%-ного раствора мочевины и асепти­чески разливают по пробиркам.

Для приготовления 1,6%-ного щелочного раствора бромтимолового си­него в 80 см3 дистиллированной воды растворяют 1,6 г бромтимолового синего, 20 см3 0,25 Н раствора натрия гидроокиси.

Среда Эндо. Селективная среда для энтеробактерий. Выпускается в су­хом виде. Состоит из агара, основного фуксина, натрия сульфата, натрия фосфата, лактозы. Для посевов используют свежеприготовленную среду. В 100 см3 дистиллированной воды растворяют 5 г сухой среды, кипятят при постоянном перемешивании 2-3 мин и разливают по чашкам Петри. Для предотвращения образования большого количества конденсата среду пос­ле кипячения охлаждают до 50° С. Готовая среда имеет розовый цвет. Ко­лонии лактозоположительных бактерий красные, лактозоотрицательных — бесцветные или слегка розоватые.

Среда Левина. Селективная среда для энтеробактерий. К 100 см3 расплавленного и охлажденного до 60-70° С 2%-ного агара Хоттингера (рН 7,2-7,4) добавляют 2 см3 0,5%-ного водного раствора ме-тиленового синего (подогретого на водяной бане до 60-70° С), 1,5 см3 2%-ного раствора эозина, 2 г лактозы и 0,2 г калия фосфорнокислого двуос­новного (КН2Р04). Перемешивают, разливают по чашкам Петри и подсу­шивают. Перед добавлением в среду раствора красителей стерилизуют текучим паром 3 дня подряд по 30 мин. Готовая среда имеет фиолетовый цвет. Колонии эшерихий синего или черного цвета, сальмонелл — бесцвет­ные или розовые, протея — оранжевые, с измененным цветом среды вокруг колонии.

Агар Мак-Конки (таурохолевыйагар). Селективная среда для энтеро­бактерий. В 1000 см3 дистиллированной воды растворяют 20 г пептона,
5 г натрия хлорида, 2,5 г натрия таурохолата, 10 г лактозы, 0,1 г нейтрального крас­ного, 20 г агара. Смесь стерилизуют 20 мин при 121° С.

Агар Плоскирева. Селективная среда для сальмонелл. Выпускается в сухом виде. Состоит из агара с желчными солями, натрия цитрата, натрия тиосульфата, натрия фосфата, лактозы, нейтрального крас­ного, бриллиантового зеленого, соды кальцинированной, йода, натрия хло­рида. Готовая среда прозрачная или розовато-желтого цвета. Лактозоположительные штаммы сальмонелл образуют колониии красного цвета, лак-тозоотрицательные штаммы — бесцветные.

Висмут-сульфит агар. Селективная среда для сальмонелл. Выпускается в сухом виде. Состоит из агара, гидролизата рыбы, глю­козы, висмута цитрата, натрия сульфита, соли Мора, натрия фосфата, бри-лиантового зеленого. Готовая среда имеет зеленоватую окраску. Штаммы сальмонелл, продуцирующие сероводород, образуют черные колони с про­крашиванием агара под колонией в черный цвет. Штаммы сальмонелл, не продуцирующие сероводород, образуют бесцветные или зеленовато-корич­невые колонии.

Среда Рапопорта. Селективная среда для сальмонелл. Состав: МПБ или бульон Хоттингера — 900 см3, желчь бычья — 100 см3, глюкоза —
20 г, индикатор Андреде — 10 см3. Ингредиенты смешивают, разливают по 50 см3 во флаконы с поплавка­ми. Стерилизуют текучим паром 3 дня подряд по 30 мин.

Среда Ворфеля - Фергюсона. Используют для лучшего образования кап­сулы у клебсиелл. В 1000 см3 дистиллированной воды растворяют 2 г натрия хлорида, 1 г калия сульфата (K2S04), 0,25 г магния сульфата (Mg S04 x 7H20), 20 г саха­розы, 88 см3 дрожжевого экстракта (или 2 г сухого дрожжевого экстракта), фильтруют через бумажный фильтр, разливают по пробиркам и стерилизу­ют 15 мин при 121° С.

Бульон с 0,2% глюкозы. Используют для лучшего образования капсулы у клебсиелл. Берут 1000 см3 МПБ или бульона Хоттингера (рН 7,2-7,4). В неболь­шом его объеме, нагретом до 40-50° С, растворяют 2 г глюкозы и смеши­вают с оставшимся бульоном. Разливают по пробиркам и стерилизуют 30 мин при 112° С.

 

Date: 2016-02-19; view: 523; Нарушение авторских прав; Помощь в написании работы --> СЮДА...



mydocx.ru - 2015-2024 year. (0.005 sec.) Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав - Пожаловаться на публикацию