Лабораторная работа. Определение концентрации серогликоидов в крови. Оборудование: 1. Штатив с пробирками. 2. Пипетки на 1 мл

Определение концентрации серогликоидов в крови.

Принцип метода. Под названием серогликоиды (или серомукоиды) объединяется группа гликопротеидов, которые не осаждаются серной кислотой, трихлоруксусной и сульфосалициловой кислотами. Метод основан на осаждении всех белков, кроме серогликоидов, хлорной кислотой. Серогликоиды выделяют осаждением фосфорновольфрамовой кислотой и по степени помутнения раствора судят о содержании серогликоидов.

Ход работы. К 0,5 мл сыворотки приливают 4,5 мл 0,85% раствора хлористого натрия и добавляют по каплям 2,5 мл 1,8 H раствора хлорной кислоты. Хорошо перемешивают и оставляют на 10 мин при комнатной температуре. Затем центрифугируют 15 мин при 3000 об/мин. 5 мл центрифугата смешивают с 1 мл 5% раствора фосфорновольфрамовой кислоты и через 15 мин измеряют мутность на КФК в кювете толщиной 1 см при красном светофильтре против контроля. Контроль готовят, смешивая 3,3 мл физиологического раствора с 1,7 мл хлорной кислоты и 1 мл фосфорновольфрамовой кислоты.

Результат выражают в условных единицах – значении оптической плотности.

Норма содержания серогликоидов в крови – 0,13 - 0,2 условных единиц.

Диагностическое значение определения серогликоидов в крови

Увеличение серогликоидов наблюдается при всех воспалительных и некробиотических процессах: у больных с инфарктом миокарда, желтушным синдромом (особенно на почве новообразования), злокачественной опухолью, обострением хронического холецистита, с деструктивной формой туберкулеза легких, ревматизмом, мозговым инсультом и другими патологическими состояниями.

Снижение серогликоидов наблюдается при инфекционном гепатите, гематоцеллюлярной дистрофии, рассеянном склерозе.

Проверка качества усвоения знаний (конечный уровень)

А) Вопросы для защиты лабораторной работы

1. Что такое серогликоиды?

2. Принцип метода определения концентрации серогликоидов в крови.

3. Зачем к сыворотке крови приливают раствор хлорной кислоты?

4. Как рассчитывают концентрацию серогликоидов?

5. Для чего проводится центрифугирование?

6. Какая существует связь между концентрацией серогликоидов и состоянием больного?

7. В каких случаях содержание серогликоидов в крови может быть высоким?

8. Можно ли на основании повышения концентрации серогликоидов диагности­ровать определенное заболевание?

б) Ситуационные задачи (УИРС)

1. Глюкозу, меченную ¹⁴С в 6-м положении, добавили в раствор, содержащий ферменты и кофакторы окислительной части пентозофосфатного пути. Какова судьба радиоактивной метки?

2. На экзамене у студента содержание глюкозы в крови оказалось равным 7,2 ммоль/л. Является ли это признаком патологии?

3. Будет ли содержать радиоактивную метку рибозо-5-фосфат, полученный в пентозофосфатном пути из глюкозы, меченной ¹⁴С по 1-му атому?

4. Выберите пути использования метаболитов пентозофосфатного пути:

1) НАДФН. А. Синтез нуклеотидов.

2) Рибозо-5-фосфат. В. Восстановительные реакции в

3) 3-фосфоглицериновый окислении жирных кислот.

альдегид. С. Реакции гидроксилирования.

4) Фруктозо-6-фосфат. Д. Гликолиз.

5. Выберите определения, характеризующие свойства НАДН и НАДФН.

1) Является коферментом дегидрогеназ. А. Характерно для НАДН.

2) Служит донором водорода для дыха- В. Характерно для НАДФН

тельной цепи.

3) Используется в реакции рибозо-5-фос- С. Характерно для обоих.

фат → рибулозо-5-фосфат. Д. Не характерно для этих

4) Образуется в окислительной части ПФП. коферментов.

5) Образуется в гликолизе.

6) Образуется при синтезе липидов.

6. Выберите особенности, характерные для гликопротеинов и протеогликанов.

1) Входят в состав мембран. А. Протеогликаны.

2) Состоят из различных мономеров. В. Гликопротеины.

3) Обеспечивают взаимодействие между клетками. С. Оба.

4) Являются резервными углеводами. Д. Ни одно.

5) Определяют группоспецифические свойства крови.

7. У больного резко уменьшено время ретракции сгустка (протромбиновое время - тест для оценки количества фибриногена). Введение какого протеогликана будет целесообразным и почему?