Цель: Освоение практических навыков работы при выделении чистых культур бактерий: ІІ -й день исследования

Методическое указание для студентов к практическому занятию 11

Тема: Изучение колоний. Пигменты бактерий

Цель: Освоение практических навыков работы при выделении чистых культур бактерий: ІІ -й день исследования.

Модуль 1. Морфология и физиология микроорганизмов. Инфекция. Иммуни-тет.

Содержательный модуль 3. Физиология бактерий.

Тема 11: Изучение колоний. Пигменты бактерий.

Актуальность темы. На плотных питательных средах бактерии образовывают разные по форме и величине колонии - видимые скопления микроорганизмов одного вида, которые формируются в результате размножения одной клетки. Колонии бывают плоскими, выпуклыми, куполовидными, вдавленными, их поверхность - гладкой (S-форма), шероховатой (R-форма), исчерченной, края - равными, зазубренными, волокнистыми, бахромчатыми. Форма колоний также разнообразная: круглая, розеткоподобная, звездчатая. По величине колонии делятся на большие (4-5мм), средние (2-4 мм), мелкие (1-2мм). Колонии различаются за консистенцией, плотностью, цветом. Они могут быть прозрачными и непрозрачными, окрашенными и бесцветными, влажными, сухими, слизистыми.

Цвет колоний определяется образованием пигментов, которые делятся на растворимые в воде и спирте (синегнойная бактерия, бактерии сине-зеленого молока) и нерастворимые (азотобактер, черные и бурые пигменты плесени). Цвет колоний помогает дифференцировать бактерии. Колонии актиномицетов (A. вovis), микрококков окрашены в розовый цвет, стафилококка - в золотистый (S. aureus), лимонно-желтый (S. citreus) и белый цвета (S. albus), синегнойная палочка (P. aeroginosa) - в сине-зеленый, микобактерии туберкулеза (M. tuberculosis) - в желтый. Некоторые пигменты образуются только при свете (каротиноиды в M. tuberculosis), а некоторые обнаруживают антибиотические свойства (P. aeroginosa). Пигменты защищают бактерии от действия видимых и УФ-лучей.

Конкретные цели:

· Выучить методы выделения чистых культур бактерий.

· Описывать колонии, особенности их формирования у разных видов бактерий.

· Выучить особенности пигментообразования у бактерий.

· Описывать наиболее весомые пигменты, которые используются для дифференциации бактерий.

· Освоить метод пересева колоний для получения чистых культур бактерий.

· Трактовать результаты роста смеси бактерий на плотных питательных средах.

Уметь:

· Проводить макроскопическое изучение колоний.

· Проводить пересев колоний бактерий для выделения чистых культур.

· Проводить проверку выделенных культур бактерий на чистоту.

· Готовить микропрепараты из колоний бактерий.

· Окрашивать микропрепараты по Граму.

· Проводить микроскопию микропрепаратов с помощью иммерсионного микроскопа.

· Анализировать полученные данные относительно разнообразия колоний.

Теоретические вопросы:

1. Схема выделения чистых культур.

2. Особенности формирования колоний у разных видов бактерий.

3. Пигментообразование у бактерий и его значение в дифференциации бактерий.

Практические задачи, которые выполняются на занятии:

1. Продолжение выделения чистых культур бактерий: макроскопическое изучение колоний.

2. Приготовление микропрепаратов из полученных колоний.

3. Окраска микропрепаратов по Граму.

4. Микроскопия микропрепаратов, их анализ и зарисовывание в протокол.

5. Пересев выделенных колоний на МПА для получения чистых культур.

6. Оформление протокола.

Литература:

1. Воробьев А.В., Быков А.С., Пашков Е.П., Рыбаков А.М. Микробиология.- М.: Медицина, 1998.- 336с.

2. Медицинская микробиология /Под редакцией В.И. Покровского.- М.: ГЕОТАФ-МЕД, 2001.- 768с.

3. Пяткін К.Д., Кривошеїн Ю.С. Мікробіологія.- К.: "Вища школа", 1992.– 431с.

4. Конспект лекций.

Дополнительная литература:

1. Коротяев А.И., Бабичев С.О. Медицинская микробиология, иммунология и вірусологія /Учебник для медицинских ВУЗов.- С-Пб.: «Специальная литература», 1998.- 592с.

2. Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. Микробиология /Учебник.– 2-е изд., перераб. и доп.– М.: Медицина, 1983,- 512с.

Короткие методические указания к работе на практическом занятии:

В начале занятия проводится проверка уровня подготовки студентов к занятию. Самостоятельная работа состоит из макроскопического изучения колоний на МПА. Потом студенты готовят микропрепараты из разнообразных колоний (кишечной палочки, стафилококка и антракоида), окрашивают их по Граму и проводят микроскопию. После анализа микропрепаратов, их зарисовывают в протокол.

На втором этапе студенты проводят пересев выделенных колоний на МПА для получения чистых культур.

В конце занятие проводится оформление протокола, тестовый контроль и анализ результатов самостоятельной работы каждого студента.